| 目录 | 第1-6页 |
| 中文摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-53页 |
| 前言 | 第11-15页 |
| 第一节 无脊椎动物免疫 | 第15-38页 |
| 1. 非己的识别(Recognition of non-self) | 第16-23页 |
| ·肽聚糖识别蛋白(peptidoglycan recognition proteins,PGRPs ) | 第18-19页 |
| ·硫酯蛋白(thioester—containing proteins,TEPs) | 第19页 |
| ·革兰氏阴性菌结合蛋白(Gram negative binding proteins,GNBPs) | 第19-20页 |
| ·清除受体(scavenger receptors,SCRs) | 第20-21页 |
| ·C型凝集素(C-type lectins,CTLs) | 第21页 |
| ·硫依赖型凝集素(galectins,GALEs) | 第21-22页 |
| ·Toll 样受体(Toll like receptor,TLRs) | 第22-23页 |
| 2. 免疫信号的调整和放大(Signal modulation and amplification) | 第23-28页 |
| ·丝氨酸蛋白酶级联反应(Serine protease cascades) | 第23-25页 |
| ·免疫信号转导的途径(Signal transduction pathways) | 第25-28页 |
| 3. 病原体的清除(Pathogen elimination) | 第28-38页 |
| ·物理屏障 | 第29-30页 |
| ·细胞免疫 | 第30-31页 |
| ·体液免疫 | 第31-38页 |
| 第二节 动物免疫系统中的丝氨酸蛋白酶及其抑制剂 | 第38-51页 |
| 1. 动物免疫系统中的丝氨酸蛋白酶 | 第38-45页 |
| ·丝氨酸蛋白酶级联与补体系统 | 第38-39页 |
| ·丝氨酸蛋白酶级联与血液凝结体系 | 第39-42页 |
| ·丝氨酸蛋白酶级联与前酚氧化酶激活系统体系 | 第42-43页 |
| ·丝氨酸蛋白酶级联与背腹发育和抗菌肽的合成 | 第43-45页 |
| 2. 动物免疫系统中的丝氨酸蛋白酶抑制剂 | 第45-51页 |
| ·动物丝氨酸蛋白酶抑制剂的分类 | 第45-47页 |
| ·丝氨酸蛋白酶抑制剂在无脊椎动物免疫体系中的作用 | 第47-51页 |
| 第三节 研究目的和意义 | 第51-53页 |
| 第二章 材料与方法 | 第53-67页 |
| 第一节 材料 | 第53-56页 |
| 1. 样品及样品处理 | 第53-54页 |
| ·构建CDNA 文库的样品及样品处理 | 第53页 |
| ·应激实验的样品及样品处理 | 第53-54页 |
| 2. 主要化学试剂与仪器设备 | 第54-56页 |
| ·主要化学试剂 | 第54-55页 |
| ·主要仪器设备 | 第55-56页 |
| 第二节 方法 | 第56-67页 |
| 1. 扇贝总RNA 提取 | 第56-57页 |
| ·注意事项:实验用品的预处理 | 第56页 |
| ·扇贝总RNA 提取 | 第56-57页 |
| 2. CDNA 文库的构建及序列分析 | 第57页 |
| ·CDNA 文库的构建 | 第57页 |
| ·序列分析与目的基因片段的获得 | 第57页 |
| 3. RACE PCR 获得全长CDNA 序列 | 第57-60页 |
| ·扇贝CDNA 模板第一链的合成 | 第58页 |
| ·3 '-RACE 扩增 | 第58-59页 |
| ·5 ' -RACE 扩增 | 第59-60页 |
| 4. 感受态细胞的制备、连接及转化 | 第60-62页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第60-61页 |
| ·连接 | 第61页 |
| ·转化 | 第61-62页 |
| 5. Northern 杂交 | 第62-64页 |
| ·CDNA 探针制备 | 第62页 |
| ·Northern blotting 分析 | 第62-64页 |
| 6. 目的基因的生物信息学分析 | 第64页 |
| 7. RT-PCR 检测目的基因的表达 | 第64-67页 |
| 第三章 扇贝丝氨酸蛋白酶及其抑制剂基因的克隆与表达 | 第67-155页 |
| 前言 | 第67-69页 |
| 第一节 栉孔扇贝丝氨酸蛋白酶基因的克隆与表达 | 第69-99页 |
| 1. 栉孔扇贝丝氨酸蛋白酶基因CFP51 的克隆与表达 | 第69-80页 |
| ·栉孔扇贝丝氨酸蛋白酶基因CFP51 全长CDNA 的克隆 | 第69-70页 |
| ·栉孔扇贝丝氨酸蛋白酶基因CFP51 的结构与同源性分析 | 第70-78页 |
| ·栉孔扇贝丝氨酸蛋白酶基因CFP51 的表达 | 第78-80页 |
| 2. 栉孔扇贝丝氨酸蛋白酶基因CFP52 的克隆与表达 | 第80-91页 |
| ·栉孔扇贝丝氨酸蛋白酶基因CFP52 全长CDNA 的克隆 | 第80-81页 |
| ·栉孔扇贝丝氨酸蛋白酶基因CFP52 的结构与同源性分析 | 第81-89页 |
| ·栉孔扇贝丝氨酸蛋白酶基因CFP52 的表达 | 第89-91页 |
| 3. 讨论 | 第91-99页 |
| ·栉孔扇贝丝氨酸蛋白酶基因CFP51 和CFP52 的结构分析 | 第92-96页 |
| ·栉孔扇贝丝氨酸蛋白酶基因CFP51 和CFP52 的表达 | 第96-99页 |
| 第二节 海湾扇贝丝氨酸蛋白酶抑制剂基因的克隆与表达 | 第99-122页 |
| 1. 海湾扇贝丝氨酸蛋白酶抑制剂基因AISPI-1 的克隆与表达 | 第99-109页 |
| ·海湾扇贝丝氨酸蛋白酶抑制剂基因AISPI-1 的全长CDNA 克隆 | 第99-100页 |
| ·海湾扇贝丝氨酸蛋白酶抑制剂基因 AISPI-1 的结构与同源性分析 | 第100-107页 |
| ·海湾扇贝丝氨酸蛋白酶抑制剂基因AISPI-1 的表达 | 第107-109页 |
| 2. 海湾扇贝丝氨酸蛋白酶抑制剂基因AISPI-2 和AISPI-3 的克隆与表达 | 第109-122页 |
| ·丝氨酸蛋白酶抑制剂基因AISPI-2 和AISPI-3 全长CDNA 的克隆 | 第109-110页 |
| ·丝氨酸蛋白酶抑制剂基因AISPI-2 和AISPI-3 的结构与同源性分析 | 第110-116页 |
| ·海湾扇贝丝氨酸蛋白酶抑制剂基因AISPI-2 和AISPI-3 的表达 | 第116-122页 |
| 第三节 栉孔扇贝丝氨酸蛋白酶抑制剂基因的克隆与表达 | 第122-155页 |
| 1. 栉孔扇贝丝氨酸蛋白酶抑制剂基因 CFPSI -1 和 CFPSI -2 的克隆与表达 | 第122-136页 |
| ·丝氨酸蛋白酶抑制剂基因CFPSI-1 和CFPSI-2 全长CDNA 的克隆 | 第122-123页 |
| ·丝氨酸蛋白酶抑制剂基因CFPSI-1 和CFPSI-2 结构与同源性分析 | 第123-133页 |
| ·栉孔扇贝丝氨酸蛋白酶抑制剂基因CFPSI-1 和CFPSI-2 的表达 | 第133-136页 |
| 2. 栉孔扇贝丝氨酸蛋白酶抑制剂基因CFPSI -3 和CFPSI -4 的克隆与表达 | 第136-150页 |
| ·丝氨酸蛋白酶抑制剂基因CFPSI -3 和CFPSI -4 全长CDNA 的克隆 | 第136页 |
| ·丝氨酸蛋白酶抑制剂基因CFPSI-3 和CFPSI-4 结构与同源性分析 | 第136-147页 |
| ·栉孔扇贝丝氨酸蛋白酶抑制剂基因CFPSI-3 和CFPSI-4 的表达 | 第147-150页 |
| 3. 讨论 | 第150-155页 |
| 第四章 结论 | 第155-159页 |
| 1. 栉孔扇贝丝氨酸蛋白酶基因CFP51 和CFP52 | 第155页 |
| 2. 栉孔扇贝丝氨酸蛋白酶抑制剂基因CFPSI-1,CFPSI-2,CFPSI-3 和CFPSI-4 | 第155-156页 |
| 3. 海湾扇贝丝氨酸蛋白酶抑制剂基因AISPI-1,AISPI-2 和AISPI-3 | 第156-159页 |
| 参考文献 | 第159-175页 |
| 博士期间发表和完成的论文 | 第175-176页 |
| GenBank 注册的功能基因 | 第176-177页 |
| 致谢 | 第177页 |
