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转ATP/ADP转运蛋白基因水稻的获得及其初步研究

中文摘要第1-7页
Abstract第7-9页
缩略词第9-10页
文中所用特殊标识符列表第10-14页
1 文献综述第14-28页
   ·水稻转基因技术的发展第14-17页
     ·以原生质体为受体的转化第14-16页
       ·PEG法第14-15页
       ·电击法第15页
       ·其它转化方法第15-16页
     ·基因枪转化法第16-17页
     ·根癌农杆菌介导转化法第17页
   ·水稻源库流途径研究第17-21页
     ·源库流的概念及其地位关系第17-18页
     ·源库流关系的分子生物学研究第18-21页
   ·淀粉合成途径的分子生物学研究第21页
     ·主要合成途径第21页
   ·ATP/ADP转位蛋白第21-25页
     ·AATP的发现、分布部位及主要功能概述第22页
     ·AATP的基因序列、结构功能和生化特性研究第22-25页
   ·淀粉合成调控及ATP浓度的影响第25-26页
     ·AGPase活性调控及ATP浓度对其影响第25-26页
     ·AGPase在禾本科植物贮存器官中的存在部位第26页
   ·本论文研究的目的和意义第26-28页
2 材料与方法第28-40页
   ·实验材料第28-31页
     ·供试水稻品种第28页
     ·菌株和质粒第28-30页
     ·主要试剂和仪器第30-31页
       ·主要试剂第30页
       ·主要仪器第30-31页
   ·实验方法第31-40页
     ·农杆菌菌株的鉴定第31-32页
     ·农杆菌介导法转化水稻第32-34页
       ·培养基第32页
       ·胚性愈伤组织的诱导及继代第32-33页
       ·愈伤组织的预培养第33页
       ·农杆菌的培养及处理第33页
       ·共培养第33页
       ·洗除农杆菌第33页
       ·愈伤组织的筛选第33页
       ·抗性愈伤组织的继代与植株的再生第33页
       ·转化率和分化率计算第33-34页
     ·转基因水稻的种植管理第34页
     ·转基因水稻的PCR检测第34-36页
       ·水稻叶片DNA模板的制备第34页
       ·PCR扩增引物序列第34-35页
       ·PCR检测第35-36页
     ·转基因水稻的Southern blot检测第36-38页
       ·水稻叶片DNA的大量提取(CTAB法)第36-37页
       ·酶切与电泳第37页
       ·印迹(向下毛细管法)第37-38页
       ·杂交与检测第38页
     ·转基因水稻自交后代(T_1)的遗传分析第38页
     ·插入基因在RNA水平上的表达情况及影响检测第38-39页
       ·水稻叶片总RNA的提取第38-39页
       ·转基因植株的RT-PCR第39页
     ·转基因水稻后代产量和品质分析第39-40页
       ·转基因株系的经济产量考种第39页
       ·稻米直链淀粉含量的测定第39-40页
3 结果与分析第40-53页
   ·转aatp基因水稻植株的获得第40页
   ·转基因水稻的分子整合鉴定第40-43页
     ·转化水稻植株的PCR检测第40-42页
     ·转化植株的hpt基因Southern blot检测第42-43页
   ·转基因水稻的初步遗传分析第43-44页
   ·转基因水稻内外源基因在RNA水平的表达第44-47页
     ·外源基因ht-aatp的RNA表达第45页
     ·内源基因aatp的RNA表达第45-47页
   ·转基因水稻产量和品质性状的表现第47-53页
4 讨论第53-57页
   ·外源基因转化及遗传稳定性分析第53页
   ·目的基因在转基因水稻中的表达分析第53-54页
   ·转aatp基因对淀粉产量和品质的可能影响分析第54-55页
   ·后续工作及展望第55-57页
参考文献第57-62页
附录第62-74页
 图版1:农杆菌介导水稻胚性愈伤组织转化获得再生植株第62-63页
 图版2:转基因水稻的潮霉素抗性测定实验第63-64页
 基本培养基配方第64-69页
 部分转化植株T_0代(自交)种子遗传分离分析结果第69-74页
致谢第74页

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