| 第一章 引言 | 第1-21页 |
| 1 环境污染与芳香烃污染 | 第7页 |
| 2 芳香烃化合物的微生物降解 | 第7-9页 |
| 3 微生物降解芳香烃化合物的基本机制和加氧酶 | 第9-13页 |
| 4 微生物降解芳烃化合物的基本途径 | 第13-18页 |
| 5 本研究的背景,目的和意义 | 第18-21页 |
| 第二章 Pseudomonas putida ZWL73 对3-羟基苯甲酸(3-HBA)等多种芳烃化合物降解的初步研究 | 第21-35页 |
| 1 材料和方法 | 第21-24页 |
| ·材料 | 第21-22页 |
| ·药品与试剂 | 第21-22页 |
| ·菌株 | 第22页 |
| ·仪器与设备 | 第22页 |
| ·培养基与缓冲液 | 第22页 |
| ·方法 | 第22-24页 |
| ·培养条件 | 第22-23页 |
| ·生长实验 | 第23页 |
| ·细胞粗提物(粗酶)的制备 | 第23页 |
| ·蛋白浓度测定 | 第23页 |
| ·酶活性的测定 | 第23-24页 |
| 2 结果与分析 | 第24-32页 |
| ·Pseudomonas putida ZWL73 对3-羟基苯甲酸(3-HBA)和龙胆酸的代谢 | 第24-30页 |
| ·Pseudomonas putida ZWL73 对4-氯硝基苯(4-CNB)的降解 | 第30-31页 |
| ·Pseudomonas putida ZWL73 对邻苯二酚,原儿茶酸及4-羟基苯甲酸(4-HBA)的降解 | 第31-32页 |
| 3 讨论 | 第32-35页 |
| 第三章 3-羟基苯甲酸-6-单加氧酶基因的克隆与表达 | 第35-49页 |
| 1 材料和方法 | 第35-38页 |
| ·材料 | 第35-36页 |
| ·菌株和质粒 | 第35页 |
| ·培养基 | 第35页 |
| ·工具酶和试剂 | 第35-36页 |
| ·仪器与设备 | 第36页 |
| ·实验方法 | 第36-38页 |
| ·质粒提取 | 第36页 |
| ·引物设计 | 第36页 |
| ·菌落PCR | 第36-37页 |
| ·PCR 产物的加尾反应及纯化 | 第37页 |
| ·重组质粒的构建 | 第37页 |
| ·阳性克隆的验证 | 第37-38页 |
| ·E.coli Rosetta(pZWXC5)的诱导表达及SDS-PAGE | 第38页 |
| ·粗酶的制备及蛋白浓度测定 | 第38页 |
| ·显色反应及酶活性测定 | 第38页 |
| ·序列分析 | 第38页 |
| 2 结果与分析 | 第38-46页 |
| ·3-HBA-6-单加氧酶基因的克隆 | 第38-40页 |
| ·3-HBA-6-单加氧酶活性分析 | 第40-44页 |
| ·3-HBA-6-单加氧酶的诱导表达 | 第44页 |
| ·序列分析 | 第44-46页 |
| 3 讨论 | 第46-47页 |
| 4 小结及下一步工作设想 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 发表文章 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55页 |
