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棉铃虫对Bt棉的抗性个体检测标准与单雌系F1代检测方法的研究

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-12页
第一章 文献综述第12-33页
 1 苏云金芽孢杆菌及杀虫晶体蛋白第12-14页
   ·苏云金芽孢杆菌的发现第13页
   ·苏云金芽孢杆菌的应用历史第13-14页
 2 转Bt基因作物的研究与应用第14-17页
   ·转Bt基因作物的研究第14-16页
   ·转Bt基因作物的应用第16-17页
 3 害虫对Bt毒素及转Bt基因作物的抗药性第17-19页
   ·对Bt商品制剂的抗药性第17-18页
   ·对转Bt基因作物的抗药性第18页
   ·害虫交互抗性第18-19页
   ·害虫抗药性的稳定性第19页
 4 对Bt抗性的机制和遗传方式第19-23页
   ·昆虫对Bt抗性的机制第19-21页
     ·Bt毒素与中肠细胞膜上受体结合的变化第20-21页
     ·ICPs在中肠水解作用的变化第21页
   ·害虫对Bt抗性的遗传方式第21-22页
   ·昆虫对Bt抗性的特点第22-23页
 5 抗性检(监)测技术第23-28页
   ·测定害虫的抗性倍数第23-24页
   ·区分剂量检(监)测法第24-25页
   ·在转Bt基因作物田间直接检(监)测第25-26页
   ·单雌系F_1代遗传检(监)测法第26-27页
   ·单雌系F_2代基因浓缩遗传检(监)测法第27-28页
   ·生化检测法和抗性等位基因频率检测法第28页
     ·生化检测法第28页
     ·抗性等位基因频率检测法第28页
 6 转Bt基因棉的抗性治理第28-30页
   ·基因策略第28-29页
     ·培育转其它基因抗虫棉第28-29页
     ·寻找和筛选广谱抗虫基因第29页
     ·采用特异启动子和诱导表达启动子第29页
     ·基因表达策略第29页
   ·高剂量/庇护区策略第29-30页
 7 转Bt基因棉棉田害虫种群的变化第30-31页
   ·对鳞翅目的影响第30-31页
   ·对非鳞翅目的影响第31页
 8 研究的目的和意义第31-33页
第二章 室内棉铃虫对转Bt基因棉抗性品系的筛选第33-37页
 1 材料与方法第33-34页
   ·供试棉铃虫第33页
   ·供试棉花第33页
   ·Bt毒素第33-34页
   ·棉铃虫对转Bt基因棉的抗性筛选与保持第34页
   ·室内选育棉铃虫抗性品系的抗性水平测定第34页
 2 结果与分析第34-37页
   ·棉铃虫对转Bt基因棉的抗性筛选与保持第34-35页
   ·室内选育棉铃虫抗性品系的抗性水平测定第35-37页
第三章 棉铃虫对转Bt基因棉抗性个体检测标准的研究第37-47页
 1 材料和方法第37-38页
   ·供试材料第37页
     ·供试棉铃虫第37页
     ·供试棉花第37页
     ·Bt毒素第37页
   ·方法第37-38页
     ·建立抗性个体(rr)检测标准(简称“检测标准”)第37-38页
       ·新棉33~B叶片喂饲法第37页
       ·含Cry1Ac毒素的饲料感染法第37-38页
     ·检测标准的验证第38页
 2 结果与分析第38-46页
   ·建立抗性个体(rr)的检测标准第38-42页
     ·新棉33~B叶片喂饲法第38-40页
     ·含Cry1Ac毒素的饲料感染法第40-42页
   ·检测标准的验证第42-46页
     ·新棉33~B叶片喂饲法第42-44页
     ·含Cry1Ac毒素的饲料感染法第44-46页
 3 结论第46-47页
第四章 单雌系F_1代检测方法的研究第47-53页
 第一节 F_1代检测第47-50页
  1 材料和方法第47-48页
   ·供试材料第47页
     ·供试棉铃虫第47页
     ·供试棉花第47页
   ·方法第47-48页
  2 结果与分析第48-50页
 第二节 应用等位基因特异性PCR扩增技术(PASA)核查验证单雌系F_1代抗性检测的结果第50-53页
  1 材料与方法第50-51页
   ·基因组DNA的提取采用酚/氯仿抽提法第50页
   ·PCR反应的体系和扩增的条件第50-51页
   ·PCR产物电泳分析第51页
  2 结果与分析第51-53页
   ·室内对照的PCR产物琼脂糖凝胶电泳分析第51页
   ·达到检测标准个体的PCR产物琼脂糖凝胶电泳分析第51-53页
第五章 讨论第53-61页
 1 早期抗性检测的技术第53-56页
   ·测定害虫的抗性倍数第53页
   ·区分剂量法第53-54页
   ·单雌系F_2代法第54页
   ·单雌系F_1代遗传检测法第54-55页
   ·分子抗性等位基因检测法第55-56页
 2 抗性个体的检测标准第56-57页
 3 高剂量/庇护区策略第57-61页
   ·转Bt基因植物的毒素的表达第57-58页
   ·抗性等位基因起始频率第58-59页
   ·庇护区的种植第59页
   ·其它方面的影响第59-60页
   ·高剂量/庇护区的有效性第60-61页
全文总结第61-62页
参考文献第62-72页
致谢第72页

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