| Abstract | 第1-6页 |
| Abbreviations | 第6-7页 |
| Chapter 1 Introduction | 第7-13页 |
| ·About the most common modification of adenosines in mRNA | 第7-8页 |
| ·About the MB*(AtMT-A70B) | 第8页 |
| ·About the gateway cloning technology | 第8-9页 |
| ·About the Yeast two Hybrid system | 第9-10页 |
| ·The ProQuest? Two-Hybrid System with Gateway? Technology | 第10-12页 |
| ·The procedure of the experiment | 第12-13页 |
| Chapter 2 Material and methods | 第13-27页 |
| ·Growth of plant | 第13页 |
| ·RNA extraction | 第13-14页 |
| ·Preparation of agarose gels | 第14页 |
| ·RT-PCR(Reverse Transcription PCR) | 第14-15页 |
| ·QIaquick gel extraction kit protocol | 第15页 |
| ·Information of pENTR/D-TOPO vector | 第15-16页 |
| ·Put PCR products(MB*) into Entry vector use Gateway? Cloning Technology(BP Recombination reaction) | 第16-17页 |
| ·Preparation of competent host strain DH5a E. coli cells | 第17-18页 |
| ·Transformation of competent DH5a E. coli cells by MB* / pENTR | 第18页 |
| ·MB*/ pENTR plasmid DNA minipreps(QIAGEN) | 第18页 |
| ·Mediums for Yeast-two Hybrid screen | 第18-20页 |
| ·Plates for Yeast two Hybrid screen | 第20页 |
| ·Low-Copy-Number DB and AD Vectors (ARS/CEN) | 第20-22页 |
| ·Small-Scale Transformation of MaV203 | 第22页 |
| ·Library scale transformation | 第22-23页 |
| ·Galactosidase filter assay | 第23页 |
| ·Assessing Self-Activation | 第23-24页 |
| ·Transfer MB* to pDESTTM 32 and two-hybrid screen | 第24-25页 |
| ·Yeast plasmid isolation | 第25-27页 |
| Chapter 3 Cloning of MB* | 第27-30页 |
| ·Cloning of MB* | 第27页 |
| ·Construction of the bait plasmid | 第27页 |
| ·Sequence of MB*/ pENTR | 第27-30页 |
| Chapter 4 Screening Arobidopsis cDNA library by MB* bait | 第30-41页 |
| ·Transfer MB* to pDEST32 using gateway technology | 第30页 |
| ·Test of the autoactivation of the MB*-bait | 第30-31页 |
| ·Library-scale transformation of yeast competent cell Mav203 | 第31-32页 |
| ·Identification of positive clones | 第32-41页 |
| ·Growth assays | 第32页 |
| ·X-gal assays | 第32-33页 |
| ·Library plasmid isolation | 第33-34页 |
| ·Confirmation of positive clones | 第34-35页 |
| ·Sequence of the positive clones | 第35-40页 |
| ·Identification of positive clones (BLAST searches) | 第40-41页 |
| Chapter 5 Discussion and future work | 第41-43页 |
| Reference | 第43-46页 |
| 摘要 | 第46-47页 |
