一、论文 | 第1-48页 |
中文摘要 | 第6-8页 |
英文摘要 | 第8-10页 |
前言 | 第10-11页 |
1 材料和方法 | 第11-18页 |
1.1 试剂和仪器 | 第11-13页 |
1.1.1 实验样品 | 第11页 |
1.1.2 菌株和质粒 | 第11页 |
1.1.3 试剂 | 第11-12页 |
1.1.4 培养基 | 第12页 |
1.1.5 缓冲液 | 第12-13页 |
1.1.6 仪器 | 第13页 |
1.2 方法 | 第13-18页 |
1.2.1 林麝及马麝总DNA的提取 | 第13页 |
1.2.2 简并引物的设计 | 第13-14页 |
1.2.3 林麝及马麝SRY基因片段的扩增 | 第14页 |
1.2.4 PCR扩增片段的回收、连接 | 第14-15页 |
1.2.5 PCR扩增片段的转化和鉴定 | 第15-16页 |
1.2.6 单克隆重组子菌落筛选 | 第16-17页 |
1.2.7 测序、蛋白质结构预测与分析 | 第17-18页 |
1.2.8 进化分析 | 第18页 |
2 结果与分析 | 第18-40页 |
2.1 林麝及马麝总DNA的提取 | 第18-19页 |
2.2 目的基因的扩增与克隆 | 第19-20页 |
2.2.1 SRY基因HMG—box区片断的扩增 | 第19页 |
2.2.2 SRY基因CDS区片断的扩增 | 第19-20页 |
2.2.3 目的基因片断的连接、转化、克隆 | 第20页 |
2.3 目标质粒的提取和酶切鉴定 | 第20-22页 |
2.3.1 对插入200bp左右片段质粒的酶切鉴定 | 第20页 |
2.3.2 对插入700bp左右片段重组质粒的PCR鉴定 | 第20-22页 |
2.4 目标质粒测序及序列分析 | 第22页 |
2.5 蛋白质结构预测与分析 | 第22-36页 |
2.5.1 SRY CDS区推导出的氨基酸序列 | 第22-26页 |
2.5.2 氨基酸组成分析 | 第26-27页 |
2.5.3 编码蛋白疏水区的预测 | 第27-29页 |
2.5.4 信号肽结构和跨膜区域的分析 | 第29-30页 |
2.5.5 SRY CDS区编码蛋白氨基酸序列中结构域的分析 | 第30-31页 |
2.5.6 蛋白质二级结构的预测 | 第31-34页 |
2.5.7 蛋白质三维结构预测 | 第34-36页 |
2.6 系统进化分析 | 第36-40页 |
2.6.1 以偶蹄目部分动物SRY基因HMG-box区序列构建的系统发育树 | 第36页 |
2.6.2 以偶蹄目部分动物SRY基因CDS区序列构建的系统发育树 | 第36-40页 |
3 讨论 | 第40-43页 |
3.1 SRY基因编码蛋白的结构预测分析 | 第40页 |
3.2 从父系遗传角度对麝及鹿科、牛科系统进化分析 | 第40-42页 |
3.3 分子水平研究系统发育时基因的选择 | 第42-43页 |
4 参考文献 | 第43-48页 |
二、综述 | 第48-77页 |
1 引言 | 第48-52页 |
1.1 TDF的寻找历程 | 第49-51页 |
1.1.1 H-Y抗原性别决定假说 | 第49页 |
1.1.2 Bkm序列性别决定假说 | 第49页 |
1.1.3 ZFY基因性别决定假说 | 第49-50页 |
1.1.4 SRY/Sry基因性别决定假说 | 第50-51页 |
1.2 SRY基因作为TDF的证据 | 第51-52页 |
1.2.1 同源保守 | 第51页 |
1.2.2 SRY基因的定位符合作为TDF的要求 | 第51页 |
1.2.3 SRY基因表达具有时间特异性和空间特异性 | 第51页 |
1.2.4 遗传学证据也表明SRY基因是TDF的最佳候选基因 | 第51-52页 |
2 SRY基因的结构与表达 | 第52-58页 |
2.1 SRY基因的结构 | 第52-55页 |
2.2 SRY基因的表达 | 第55-56页 |
2.3 SRY蛋白 | 第56-58页 |
2.3.1 SRY蛋白的功能区 | 第56-57页 |
2.3.2 mSRY和hSRY的HMG-box结合DNA性质的差异 | 第57页 |
2.3.3 SRY基因编码蛋白质的作用机理 | 第57-58页 |
3 SRY基因与性别分化调控 | 第58-65页 |
3.1 哺乳动物性别分化的层次调控体系 | 第58-59页 |
3.2 SRY基因作用的几种模式 | 第59-61页 |
3.2.1 SRY激活穆勒氏抑制因子的表达 | 第59-60页 |
3.2.2 SRY抑制睾丸形成的负调节因子 | 第60-61页 |
3.2.3 DaX1和SRY相互拮抗的性别决定机制 | 第61页 |
3.3 SRY的其它相关基因 | 第61-63页 |
3.4 SRY基因与SOX基因家族 | 第63-65页 |
3.4.1 SOX3 | 第63-64页 |
3.4.2 SOX9 | 第64-65页 |
4 SRY基因关联的疾病 | 第65-66页 |
5 SRY基因的进化 | 第66-69页 |
5.1 SRY基因与SOX基因的分子进化 | 第67页 |
5.2 SRY基因的序列变异 | 第67-69页 |
6 展望 | 第69-70页 |
7 参考文献 | 第70-77页 |
三、研究生期间发表的论文 | 第77-78页 |
四、声明 | 第78-79页 |
五、致谢 | 第79页 |