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L-异亮氨酸产生菌的融合育种选育及其关键酶与发酵条件的研究

1 前言第1-23页
   ·引言第7页
   ·L-异亮氨酸的理化性质及用途第7-8页
     ·L-异亮氨酸的理化性质第7页
     ·L-异亮氨酸的用途第7-8页
   ·L-异亮氨酸的测定方法第8-9页
   ·L-异亮氨酸的生产方法第9-11页
     ·提取法第9-10页
     ·合成法第10页
     ·生物发酵法第10-11页
   ·L-异亮氨酸的生物合成途径及调节机制第11-12页
     ·L-异亮氨酸的生物合成途径第11页
     ·L-异亮氨酸生物合成的调节机制第11-12页
     ·L-异亮氨酸产生菌应具备的生化特征第12页
   ·L-异亮氨酸产生菌常规育种思路及育种实例第12-19页
     ·L-异亮氨酸产生菌常规育种思路第12-15页
     ·利用基因工程技术选育L-异亮氨酸高产菌第15-17页
     ·L-异亮氨酸产生菌育种实例第17-19页
   ·发酵条件的优化第19-22页
     ·培养方式第19-20页
     ·发酵条件的优化第20-22页
   ·论文立题背景及主要研究内容第22-23页
2 材料与方法第23-33页
   ·实验材料第23-27页
     ·菌种第23页
     ·主要试剂第23-24页
     ·主要仪器第24页
     ·培养基第24-26页
     ·主要溶液第26-27页
   ·实验方法第27-33页
     ·发酵液预处理第27页
     ·纸层析-色斑洗脱比色法测定L-异亮氨酸含量第27页
     ·高速氨基酸分析仪测定L-异亮氨酸含量第27页
     ·偏最小二乘分光光度法测定L-异亮氨酸含量第27页
     ·菌体生长曲线的测定第27-28页
     ·菌体前培养第28页
     ·原生质体形成方法第28页
     ·原生质体再生方法第28页
     ·原生质体形成率和再生率的计算第28-29页
     ·原生质体融合方法第29页
     ·目的融合子筛选方法第29页
     ·目的融合子摇管初筛第29页
     ·目的融合子摇瓶复筛第29页
     ·遗传稳定性测验第29页
     ·原生质体融合育种实验过程第29-30页
     ·菌体培养方法第30页
     ·液氮研磨法第30页
     ·盐析第30页
     ·细胞破壁率的计算第30-31页
     ·苏氨酸脱氨酶测定方法第31页
     ·苏氨酸脱氨酶纯化实验过程第31页
     ·种子培养第31-32页
     ·发酵第32页
     ·分析方法第32-33页
3 结果与讨论第33-65页
   ·L-异亮氨酸测定方法的研究第33-38页
     ·高速氨基酸分析仪测定L-异亮氨酸的含量第33-34页
     ·偏最小二乘分光光度法测定原理第34-35页
     ·偏最小二乘分光光度法的算法第35-36页
     ·偏最小二乘分光光度法测定条件的确定及测定结果第36-38页
   ·L-异亮氨酸产生菌的融合育种选育的研究第38-46页
     ·亲株对数生长曲线的测定第39页
     ·亲株原生质体的形成与再生第39-43页
     ·原生质体融合第43-44页
     ·融合子的检出和目的融合子的筛选第44页
     ·融合子摇管初筛第44页
     ·融合子摇瓶复筛第44-45页
     ·融合子遗传稳定性和遗传标记验证第45-46页
     ·融合子摇瓶产酸验证第46页
   ·L-异亮氨酸发酵过程中的关键酶研究第46-53页
     ·破壁方法的确定第46-48页
     ·酶活测定方法的研究第48-50页
     ·酶纯化结果与调节性质研究第50-53页
   ·L-异亮氨酸发酵条件的研究第53-65页
     ·种子培养时间的确定第53页
     ·发酵培养基优化第53-59页
     ·发酵条件的优化第59-61页
     ·优化条件下的摇瓶分批发酵过程曲线第61-62页
     ·L-异亮氨酸的补料分批发酵第62-65页
4 结论与展望第65-68页
   ·全文总结第65-67页
     ·应用偏最小二乘分光光度法对发酵液中L-异亮氨酸进行了定量分析研究第65页
     ·以菌株ISW330和AS1.495为亲本菌株,采用原生质体融合技术成功地选育出一株L-异亮氨酸高产菌SW0370第65-66页
     ·研究了菌株SW0370的苏氨酸脱氨酶粗酶的性质第66页
     ·研究了菌株SW0370的摇瓶分批发酵和补料分批发酵条件第66-67页
   ·本论文创新点第67页
   ·展望第67-68页
参考文献第68-72页
致谢第72-73页
读研究生期间发表论文情况第73页

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