中文摘要 | 第1-15页 |
英文摘要 | 第15-21页 |
第一章 文献综述 | 第21-47页 |
1. 弹性蛋白酶的来源与分布 | 第21-25页 |
1.1 弹性蛋白酶的来源 | 第21-22页 |
1.2 弹性蛋白酶的获取途径 | 第22-25页 |
1.2.1 直接从动物胰脏中提取 | 第22页 |
1.2.2 微生物发酵产生弹性蛋白酶 | 第22-24页 |
1.2.3 利用动物细胞培养产生弹性蛋白酶 | 第24-25页 |
1.2.4 构建弹性蛋白酶基因工程菌 | 第25页 |
2. 弹性蛋白酶的性质 | 第25-27页 |
2.1 弹性蛋白酶的物理特性 | 第25页 |
2.2 弹性蛋白酶的化学特性 | 第25-26页 |
2.3 弹性蛋白酶降解弹性蛋白的酶促特性 | 第26-27页 |
3. 弹性蛋白酶的功能与用途 | 第27-31页 |
3.1 医药作用 | 第27-30页 |
3.1.1 影响脂质代谢、降低胆固醇和抑制动脉硬化发展 | 第27-29页 |
3.1.2 抑制实验性肝纤维化、脂肪肝及增强肝中脂肪分解作用 | 第29页 |
3.1.3 具有降血压耐缺氧保护心肌作用 | 第29页 |
3.1.4 其它作用 | 第29-30页 |
3.2 弹性蛋白酶在食品工业中的应用 | 第30-31页 |
3.3 弹性蛋白酶在日用化工方面的应用 | 第31页 |
4. 弹性蛋白酶的研究现状与发展前景 | 第31-42页 |
4.1 弹性蛋白酶的研究现状 | 第31-40页 |
4.1.1 微生物弹性蛋白酶的研究 | 第31-35页 |
4.1.2 弹性蛋白酶分离纯化的研究 | 第35-40页 |
4.2 发展前景 | 第40-42页 |
4.2.1 弹性蛋白酶的经济价值较高 | 第40-41页 |
4.2.2 弹性蛋白酶应用广泛 | 第41页 |
4.2.3 应用发酵工程可实现工业化生产 | 第41-42页 |
主要参考文献 | 第42-47页 |
第二章 引言 | 第47-50页 |
1. 研究的目的和意义 | 第47-48页 |
2. 主要研究内容 | 第48-49页 |
2.1 菌种筛选 | 第48页 |
2.2 发酵工艺研究 | 第48页 |
2.3 酶学研究 | 第48页 |
2.4 酶的功能及应用特性研究 | 第48-49页 |
3. 论文研究的创新点 | 第49-50页 |
第三章 弹性蛋白酶优良微生物菌种筛选研究 | 第50-68页 |
前言 | 第50页 |
1. 材料与方法 | 第50-56页 |
1.1 材料 | 第50-52页 |
1.1.1 实验材料 | 第50-51页 |
1.1.2 培养基 | 第51页 |
1.1.3 主要仪器与设备 | 第51-52页 |
1.2 实验方法 | 第52-55页 |
1.2.1 样品预处理 | 第52页 |
1.2.2 菌种的分离选育 | 第52-54页 |
1.2.3 菌种的鉴定 | 第54页 |
1.2.4 育种谱系 | 第54页 |
1.2.5 菌种复合诱变处理 | 第54-55页 |
1.3 测定方法 | 第55-56页 |
1.3.1 酶活力的测定 | 第55-56页 |
1.3.2 理化指标的测定 | 第56页 |
1.3.3 细菌生长浓度测定 | 第56页 |
2. 结果与讨论 | 第56-66页 |
2.1 菌种的分离筛选 | 第56-58页 |
2.1.1 初筛结果 | 第56-58页 |
2.1.2 复筛结果 | 第58页 |
2.1.3 菌株的产酶稳定性试验 | 第58页 |
2.2 菌种的鉴定 | 第58-63页 |
2.2.1 菌种的形态学特征 | 第58-61页 |
2.2.2 弹性蛋白酶产生菌的生理性能测定 | 第61-62页 |
2.2.3 弹性蛋白酶产生菌的运动性试验 | 第62页 |
2.2.4 弹性蛋白酶产生菌生理生化特性 | 第62-63页 |
2.2.5 鉴定结果 | 第63页 |
2.3 菌株的诱变选育 | 第63-66页 |
2.3.1 诱变剂剂量的选择 | 第63-65页 |
2.3.2 高产菌株的复筛 | 第65页 |
2.3.3 诱变菌株稳定性试验 | 第65-66页 |
3. 小结 | 第66页 |
主要参考文献 | 第66-68页 |
第四章 弹性蛋白酶菌种发酵条件优化研究 | 第68-82页 |
前言 | 第68页 |
1. 材料与方法 | 第68-70页 |
1.1 材料 | 第68-69页 |
1.1.1 供试菌种 | 第68页 |
1.1.2 主要药品与试剂 | 第68-69页 |
1.2 培养基与培养方法 | 第69页 |
1.2.1 种子斜面培养基 | 第69页 |
1.2.2 种子培养基 | 第69页 |
1.2.3 液体发酵基础培养基 | 第69页 |
1.3 测定方法 | 第69-70页 |
1.3.1 弹性蛋白酶活性测定方法 | 第69-70页 |
1.3.2 还原糖及总糖的测定 | 第70页 |
1.3.3 菌体生长曲线的测定 | 第70页 |
1.3.4 生物量的测定[细胞干重(DCW)] | 第70页 |
2. 结果与分析 | 第70-80页 |
2.1 菌株的生长与弹性蛋白酶产生的相关性 | 第70-75页 |
2.1.1 菌株摇瓶发酵的产酶动态变化 | 第70-71页 |
2.1.2 碳源对产酶的影响 | 第71-72页 |
2.1.3 氮源对产酶的影响 | 第72-73页 |
2.1.4 无机盐对产酶的影响 | 第73页 |
2.1.5 培养基的确定 | 第73-75页 |
2.2 发酵条件的优化 | 第75-79页 |
2.2.1 起始pH对产酶的影响 | 第75页 |
2.2.2 接种量与接种龄的影响 | 第75-76页 |
2.2.3 通气量和溶氧量的影响 | 第76页 |
2.2.4 培养温度的影响 | 第76-77页 |
2.2.5 菌体细胞渗透性对产酶的影响 | 第77页 |
2.2.6 刺激因子 | 第77-78页 |
2.2.7 诱导因子的影响 | 第78-79页 |
2.3 发酵过程中的条件变化对产酶的影响 | 第79-80页 |
2.3.1 补加碳源、氮源对产酶的影响 | 第79页 |
2.3.2 温度变化对产酶的影响 | 第79-80页 |
2.3.3 消泡剂对产酶的影响 | 第80页 |
3. 小结 | 第80-81页 |
主要参考文献 | 第81-82页 |
第五章 弹性蛋白酶的分离纯化与酶特性研究 | 第82-105页 |
前言 | 第82-83页 |
1. 材料与方法 | 第83-88页 |
1.1 材料 | 第83-84页 |
1.1.1 试验材料与试剂 | 第83页 |
1.1.2 培养基 | 第83-84页 |
1.1.3 主要仪器与设备 | 第84页 |
1.2 实验方法 | 第84-88页 |
1.2.1 酶活测定 | 第84页 |
1.2.2 制备原料 | 第84-85页 |
1.2.3 弹性蛋白酶的分离 | 第85-86页 |
1.2.4 酶的纯化 | 第86页 |
1.2.5 酶的催化动力学研究 | 第86-88页 |
2. 结果与讨论 | 第88-101页 |
2.1 弹性蛋白酶的分离提取 | 第88-93页 |
2.1.1 盐析最适PH值确定 | 第88-89页 |
2.1.2 盐析对酶活的影响 | 第89-90页 |
2.1.3 有机溶剂沉淀-丙酮沉淀 | 第90-91页 |
2.1.4 透析与超滤 | 第91-92页 |
2.1.5 酶的纯化 | 第92页 |
2.1.6 分子量的测定 | 第92-93页 |
2.2 酶催化动力学研究 | 第93-101页 |
2.2.1 酶作用最适pH值 | 第93-94页 |
2.2.2 酶作用的最适温度 | 第94页 |
2.2.3 酶对酸碱的稳定性 | 第94-95页 |
2.2.4 酶对热的稳定性 | 第95页 |
2.2.5 金属离子对酶活力的影响 | 第95-96页 |
2.2.7 有机溶剂对酶活性和热稳定性的影响 | 第96-97页 |
2.2.8 巯基乙醇对酶活性及热稳定性的影响 | 第97-98页 |
2.2.9 EDTA对酶活性的影响 | 第98-99页 |
2.2.10 硫酸铵对酶活性的影响 | 第99页 |
2.2.11 酶反应初速度的确定 | 第99-100页 |
2.2.12 弹性蛋白酶动力学特性 | 第100-101页 |
2.2.13 酶对底物亲和作用的研究 | 第101页 |
3. 小结 | 第101-102页 |
主要参考文献 | 第102-105页 |
第六章 微生物弹性蛋白酶降解肉类蛋白质作用的研究 | 第105-114页 |
前言 | 第105页 |
1. 材料与方法 | 第105-108页 |
1.1 试剂 | 第105页 |
1.2 仪器 | 第105-106页 |
1.3 酶的提取方法 | 第106页 |
1.4 测定方法 | 第106-108页 |
1.4.1 弹性蛋酶活性测定方法 | 第106页 |
1.4.2 肉类嫩度测定方法—质构仪测定剪切力(shearing force) | 第106-107页 |
1.4.3 酶对蛋白质的消化水解能力的测定方法 | 第107页 |
1.4.4 酶对肉类蛋白质的消化水解力的测定方法—称重法 | 第107-108页 |
2. 结果与分析 | 第108-111页 |
2.1 弹性蛋白酶对弹性蛋白的优先分解作用 | 第108页 |
2.2 弹性蛋白酶和木瓜蛋白酶对不同蛋白质的分解比较 | 第108-109页 |
2.3 弹性蛋白酶和木瓜蛋白酶对肉类的分解能力 | 第109-110页 |
2.4 弹性蛋白酶对肉类的嫩化作用 | 第110-111页 |
3. 小结 | 第111页 |
主要参考文献 | 第111-114页 |
第七章 研究结果与展望 | 第114-117页 |
1. 研究结果 | 第114-115页 |
2. 后续研究展望 | 第115-117页 |
作者简历 | 第117页 |
攻读博士学位期间发表的论文与获奖情况 | 第117-119页 |
一、 发表论文情况(论文题目、刊物名称、刊号等) | 第117-118页 |
二、 教材与著作 | 第118页 |
三、 获奖情况(论文、科研成果等) | 第118-119页 |
缩略词 | 第119-120页 |
致谢 | 第120页 |