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新型环氧化物水解酶筛选及其在手性合成中的应用

摘要第1-12页
Abstract第12-16页
第一章 前言第16-42页
   ·手性环氧化物的重要性第16-19页
   ·手性环氧化物的化学合成方法第19-21页
     ·前手性烯烃的不对称环氧化第19-20页
     ·外消旋环氧化物的化学动力学拆分第20-21页
   ·手性环氧化物的生物合成方法第21-23页
     ·单加氧酶催化体系第21-22页
     ·氯过氧化物酶催化体系第22页
     ·环氧化物降解酶体系第22-23页
     ·脂肪酶/酯酶水解体系第23页
   ·环氧化物水解酶第23-40页
     ·环氧化物水解酶概述第23-24页
     ·环氧化物水解酶的作用机理第24-27页
     ·微生物环氧化物水解酶的立体选择性第27-36页
       ·单取代型底物第28-29页
       ·苯乙烯环氧化物型底物第29-33页
       ·双取代型底物第33-36页
       ·三取代型底物第36页
     ·环氧化物水解酶的性质第36-38页
     ·环氧化物水解酶在手性合成中的应用第38-39页
     ·环氧化物水解酶的最新研究进展第39-40页
       ·生物学方面第39-40页
       ·新型环氧化物水解酶和新型底物第40页
   ·本研究的总体思路第40-42页
第二章 双波长微板法测定细胞悬浮液中的环氧化物第42-49页
   ·实验部分第43-44页
     ·仪器与试剂第43页
     ·实验方法第43-44页
   ·结果与讨论第44-47页
     ·测定波长的选择第44-45页
     ·缓冲溶液与细胞悬浮液中测定结果的比较第45-46页
     ·细胞悬浮液浓度对测定的影响第46-47页
     ·环氧化物水解酶活力的测定第47页
   ·小结第47-49页
第三章 环氧化物水解酶产生菌的筛选与菌种鉴定第49-69页
   ·高效毛细管电泳检测手性苯基乙二醇方法的建立第49-53页
     ·仪器与试剂第49-50页
     ·方法第50页
     ·结果与讨论第50-52页
       ·手性选择剂的种类对分离的影响第50-51页
       ·缓冲溶液pH值对分离度的影响第51页
       ·磺酰化β-环糊精含量对分离度及迁移时间的影响第51-52页
       ·毛细管长度对分离度的影响第52页
     ·小结第52-53页
   ·环氧化物水解酶产生菌的筛选第53-57页
     ·材料和方法第53-55页
       ·仪器和试剂第53页
       ·样品第53页
       ·培养基第53-54页
       ·菌株分离第54页
       ·菌株初筛和复筛第54页
       ·毛细管电泳分析条件第54页
       ·液相色谱分析条件第54-55页
     ·结果和讨论第55-57页
       ·初筛第55页
       ·复筛第55-56页
       ·各菌株的底物特异性第56-57页
   ·环氧化物水解酶产生菌BZS21的种属鉴定第57-67页
     ·材料与方法第57-60页
       ·形态与鞭毛观察第57页
       ·生理生化鉴定方法第57页
       ·16S rDNA测序法鉴定BZS21第57-60页
     ·结果与讨论第60-67页
       ·BZS21菌株的形态及生理生化特征第60-62页
       ·16S rDNA测序法鉴定BZS21菌株第62-67页
     ·结论第67页
   ·本章小结第67-69页
第四章 类产碱假单胞菌BZS21产酶与拆分条件的初步研究第69-78页
   ·材料和方法第69-70页
     ·仪器与试剂第69页
     ·菌株第69页
     ·发酵用基础培养基第69页
     ·细胞悬液制备与转化第69-70页
     ·生物量测定第70页
     ·分析方法第70页
     ·环氧化物水解酶活力的测定第70页
     ·脂肪酶与酯酶活力测定第70页
     ·酯酶抑制剂对酯酶活力与对映体选择性的影响第70页
   ·结果与讨论第70-77页
     ·碳源对生长与对映体选择性的影响第71页
     ·氮源对生长与对映体选择性的影响第71-73页
     ·类产碱假单胞菌BZS21的发酵过程第73页
     ·细胞浓度对EPG拆分的影响第73-74页
     ·pH值对EPG拆分的影响第74页
     ·助溶剂对EPG拆分的影响第74-76页
     ·类产碱假单胞菌BZS21菌株的酯酶活力与水解EPG时的对映体选择性第76-77页
   ·本章小结第77-78页
第五章 不同反应体系中苯基缩水甘油酸乙酯的拆分第78-93页
   ·材料与方法第79-81页
     ·材料与试剂第79页
     ·培养基第79页
     ·类产碱假单胞菌BZS21粗酶的制备第79-80页
     ·类产碱假单胞菌BZS21粗酶的固定化第80页
     ·两相体系中EPG的拆分第80页
       ·不同有机溶剂对拆分的影响第80页
       ·有机相比例对拆分的影响第80页
       ·反应体系pH值对拆分的影响第80页
     ·乳化体系中EPG的拆分第80-81页
       ·不同表面活性剂对苯基缩水甘油酸乙酯拆分的影响第80-81页
       ·表面活性剂浓度对拆分的影响第81页
       ·体系pH值对拆分的影响第81页
     ·环糊精诱导的乳化体系中EPG的拆分第81页
   ·结果与讨论第81-92页
     ·两相体系中EPG的拆分第81-85页
       ·不同有机溶剂对拆分的影响第81-82页
       ·有机溶剂含量对拆分的影响第82-83页
       ·pH值对拆分的影响第83-84页
       ·酶浓度和底物浓度对拆分的影响第84-85页
       ·酶固定化对拆分的影响第85页
     ·乳化体系中EPG的拆分第85-89页
       ·不同表面活性剂对拆分的影响第85-86页
       ·表面活性剂浓度对拆分的影响第86-87页
       ·pH值对拆分的影响第87-88页
       ·温度对拆分的影响第88页
       ·转速对拆分的影响第88页
       ·酶与底物浓度对拆分的影响第88-89页
     ·环糊精诱导的乳化体系中EPG的拆分第89-92页
       ·不同环糊精对拆分的影响第89-90页
       ·环糊精浓度对拆分的影响第90-91页
       ·底物浓度对拆分的影响第91-92页
   ·本章小结第92-93页
第六章 黑曲霉HNG5环氧化物水解酶的性质与苄基缩水甘油醚拆分第93-103页
   ·材料与方法第93-95页
     ·仪器与试剂第93-94页
     ·菌株第94页
     ·发酵培养基第94页
     ·菌株培养与粗酶制备第94页
     ·添加剂对酶活力的影响第94页
     ·外消旋BGE拆分的动力学过程第94-95页
   ·结果与讨论第95-102页
     ·粗酶制备第95页
     ·温度对酶活力的影响第95-96页
     ·pH值对酶活力的影响第96-97页
     ·金属离子对酶活力的影响第97-98页
     ·有机溶剂对酶活力的影响第98-99页
     ·表面活性剂对酶活力的影响第99-100页
     ·外消旋BGE拆分的动力学过程第100-101页
     ·高浓度底物的拆分第101-102页
   ·本章小结第102-103页
参考文献第103-118页
在读期间已发表和录用的论文第118-119页
致谢第119-120页
学位论文评阅及答辩情况表第120页

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