摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
第一章 引言 | 第9-14页 |
·zfp36 基因及蛋白的结构 | 第9-10页 |
·zfp36 基因功能 | 第10-12页 |
·zfp36 基因与炎症的关系 | 第10页 |
·zfp36 基因与肥胖的关系 | 第10-11页 |
·zfp36 基因的分子机理研究 | 第11-12页 |
·关于zfp36 基因结构和功能研究中的方法 | 第12-13页 |
·生物信息学技术 | 第12页 |
·细胞生物学技术 | 第12页 |
·基因的敲除及敲入技术 | 第12页 |
·基因的时空表达谱分析 | 第12-13页 |
·小结 | 第13-14页 |
第二章 zfp36 基因的克隆测序及多态性分析 | 第14-35页 |
·试验材料 | 第14-17页 |
·样品来源与采样方法 | 第14页 |
·药品和酶 | 第14-15页 |
·试验仪器设备 | 第15页 |
·试剂的配制 | 第15-17页 |
·分析工具软件 | 第17页 |
·试验方法 | 第17-23页 |
·山羊卵巢组织RNA 的提取、纯化及检测 | 第17-19页 |
·反转录合成cDNA | 第19页 |
·PCR 引物的设计及反应 | 第19-20页 |
·PCR 产物的纯化与回收 | 第20页 |
·克隆测序及同源性分析 | 第20-21页 |
·zfp36 基因部分序列的单核苷酸多态性分析 | 第21-23页 |
·结果与分析 | 第23-32页 |
·山羊zfp36 基因的克隆测序 | 第23-26页 |
·山羊zfp36 基因的序列分析 | 第26-31页 |
·zfp36 基因在不同山羊品种间的多态性分析 | 第31-32页 |
·讨论 | 第32-34页 |
·zfp36 基因序列及结构 | 第32-33页 |
·zfp36 基因遗传变异 | 第33-34页 |
·小结 | 第34-35页 |
第三章 zfp36 基因的原核表达 | 第35-43页 |
·材料与方法 | 第35-39页 |
·所用菌株、载体及试剂 | 第35页 |
·Western-blot 所用溶液的配制 | 第35-36页 |
·质粒抽提 | 第36页 |
·peasy-t-zfp36 质粒和表达载体pet30-a 的双酶切 | 第36-37页 |
·BL21 感受态细胞制备 | 第37页 |
·目的基因及载体DNA 连接 | 第37页 |
·质粒的转化 | 第37-38页 |
·重组质粒的PCR 及双酶切鉴定 | 第38页 |
·重组子的诱导表达与鉴定 | 第38页 |
·重组蛋白的western blot 分析 | 第38-39页 |
·结果与分析 | 第39-41页 |
·重组表达载体pet30-a-zfp36 的构建及鉴定 | 第39页 |
·融合蛋白在原核细胞中的诱导表达 | 第39-41页 |
·融合蛋白的western blot 鉴定 | 第41页 |
·讨论 | 第41-42页 |
·小结 | 第42-43页 |
第四章 zfp36 基因在山羊中的组织表达谱 | 第43-49页 |
·材料与方法 | 第43-44页 |
·所用材料、试剂及仪器 | 第43页 |
·qRT-PCR 反应 | 第43-44页 |
·标准曲线的制备 | 第44页 |
·结果与分析 | 第44-47页 |
·qRT-PCR 提取 RNA 和PCR 结果 | 第44-45页 |
·qRT-PCR 结果融解曲线和标准曲线分析 | 第45-47页 |
·山羊zfp36 基因的组织表达谱 | 第47页 |
·讨论 | 第47-48页 |
·小结 | 第48-49页 |
第五章 综合讨论 | 第49-52页 |
·关于zfp36 基因的克隆及表达 | 第49页 |
·各因素对研究结果的影响 | 第49-51页 |
·样品的采集及处理 | 第49-50页 |
·实验材料的选择 | 第50页 |
·实验方法的选择 | 第50-51页 |
·有待进一步研究的问题 | 第51-52页 |
结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-57页 |
在读期间发表论文 | 第57页 |
附录 | 第57-58页 |
作者简历 | 第58-59页 |
致谢 | 第59-60页 |