中文摘要 | 第1-6页 |
1 前言 | 第6-13页 |
1.1 植物雌雄蕊特异表达的基因 | 第6-7页 |
1.1.1 雌蕊特异基因的表达 | 第6页 |
1.1.2 雄蕊特异基因的表达 | 第6-7页 |
1.2 雄性不育系产生的途径 | 第7-9页 |
1.3 植物细胞核雄性不育基因的研究进展 | 第9-11页 |
1.3.1 雄性不育基因的定位研究 | 第9-10页 |
1.3.2 雄性不育基因的克隆研究 | 第10页 |
1.3.3 光敏核不育基因的研究 | 第10-11页 |
1.4 差异显示技术及其进展 | 第11-12页 |
1.4.1 差别显示技术进展 | 第11-12页 |
1.4.2 差异显示技术的应用 | 第12页 |
1.4.2.1 分析特异表达基因 | 第12页 |
1.4.2.2 分离特异表达基因 | 第12页 |
1.5 本研究的目的及意义 | 第12-13页 |
2 材料与方法 | 第13-16页 |
2.1 试验材料 | 第13页 |
2.1.1 供试材料 | 第13页 |
2.1.2 所用试剂 | 第13页 |
2.2 试验方法 | 第13-16页 |
2.2.1 材料的种植与取材 | 第13页 |
2.2.2 总RNA的提取和纯化 | 第13-14页 |
2.2.2.1 RNA的提取 | 第14页 |
2.2.2.2 RNA中DNA的去除 | 第14页 |
2.2.3 引物设计 | 第14-15页 |
2.2.4 RNA反转录合成cDNA第一链 | 第15页 |
2.2.5 PCR体系 | 第15页 |
2.2.6 PCR反应条件 | 第15页 |
2.2.7 差异展示 | 第15-16页 |
2.2.7.1 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第15-16页 |
2.2.7.2 硝酸银染色 | 第16页 |
2.2.8 差异带的回收及再扩增 | 第16页 |
2.2.9 反向Northern Blot鉴定阳性差异片段 | 第16页 |
3 结果与分析 | 第16-24页 |
3.1 总RNA的提取 | 第17页 |
3.2 cDNA的合成与PCR系统的优化 | 第17-18页 |
3.3 不同引物组合的比较 | 第18-19页 |
3.4 mRNA差异显示的电泳检测系统 | 第19-21页 |
3.4.1 不同电泳检测系统的比较 | 第19-20页 |
3.4.2 两种银染方法的比较 | 第20-21页 |
3.5 差异片段的筛选与提纯 | 第21-23页 |
3.5.1 差异片段的筛选 | 第21-22页 |
3.5.2 差异片段的提纯与再扩增 | 第22-23页 |
3.6 反Northern Blot检测阳性差异带 | 第23-24页 |
4 讨论 | 第24-29页 |
4.1 材料体系 | 第24-25页 |
4.2 差异展示体系 | 第25-27页 |
4.3 差异分析 | 第27页 |
4.4 特异表达cDNA片段少的原因 | 第27-28页 |
4.5 进一步研究设想 | 第28-29页 |
5 结论 | 第29-30页 |
参考文献 | 第30-35页 |
英文摘要 | 第35-36页 |
致谢 | 第36页 |