| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 文献综述 | 第12-30页 |
| 第一章 脂肪间充质干细胞的研究进展 | 第12-24页 |
| ·间充质干细胞的研究进展 | 第13-16页 |
| ·干细胞的定义与分类 | 第13页 |
| ·间充质干细胞 | 第13-16页 |
| ·脂肪间充质干细胞的研究进展 | 第16-24页 |
| ·ASCs 的发现及命名 | 第16页 |
| ·ASCs 的优势及分子标记 | 第16-18页 |
| ·ASCs 的多向分化潜能 | 第18-22页 |
| ·应用前景 | 第22-24页 |
| 第二章 心肌特异性基因NKX2.5 在心脏发育中的作用 | 第24-30页 |
| ·NKX2.5 的发现 | 第24页 |
| ·NKX2.5 基因的结构 | 第24-25页 |
| ·NKX2.5 基因的表达 | 第25-26页 |
| ·NKX2.5 和其他转录因子的相互作用 | 第26-27页 |
| ·Nkx2.5 和GATA-4 在蛋白质水平的相互作用 | 第26页 |
| ·Nkx2.5 和SRF 的相互作用 | 第26-27页 |
| ·Nkx2.5 和Tbx-5 相互作用 | 第27页 |
| ·Nkx2.5 与MEF-2C 间的相互作用 | 第27页 |
| ·与Nkx2.5 有关的其它作用因素 | 第27页 |
| ·NKX2.5 转录调控的下游基因 | 第27-28页 |
| ·NKX2.5 基因在心脏发育中的作用 | 第28-30页 |
| 试验研究 | 第30-71页 |
| 前言 | 第30-31页 |
| 第三章 大鼠脂肪间充质干细胞的分离与培养 | 第31-38页 |
| ·材料和方法 | 第31-33页 |
| ·材料 | 第31-32页 |
| ·方法 | 第32-33页 |
| ·结果与分析 | 第33-36页 |
| ·大鼠SVF 细胞的分离与培养 | 第33-34页 |
| ·大鼠ASCs 的培养 | 第34页 |
| ·大鼠ASCs 表面标志的检测 | 第34-36页 |
| ·讨论 | 第36-37页 |
| ·小结 | 第37-38页 |
| 第四章 脂肪间充质干细胞体外分化成心肌细胞 | 第38-49页 |
| ·材料和方法 | 第38-44页 |
| ·材料 | 第38页 |
| ·方法 | 第38-44页 |
| ·结果 | 第44-47页 |
| ·形态学观察 | 第44-45页 |
| ·大鼠ASCs 表面标记的检测 | 第45页 |
| ·心肌特异性基因的表达 | 第45-46页 |
| ·心肌特异蛋白表达 | 第46-47页 |
| ·讨论 | 第47-48页 |
| ·结论 | 第48-49页 |
| 第五章 pcDNA3.1-Nkx2.5 表达质粒载体的构建 | 第49-57页 |
| ·材料 | 第49-50页 |
| ·仪器 | 第49页 |
| ·试剂 | 第49页 |
| ·溶液配制 | 第49-50页 |
| ·方法 | 第50-53页 |
| ·PCR 扩增Nkx2-5 基因编码框、回收 | 第50-51页 |
| ·酶切Nkx2-5 基因编码框和克隆用载体pcDNA3.1，回收 | 第51-52页 |
| ·连接 | 第52页 |
| ·阳性克隆pcDNA3.1-Nkx2.5 的鉴定 | 第52-53页 |
| ·脂质体转染ASCs 细胞 | 第53页 |
| ·结果 | 第53-56页 |
| ·Nkx2-5 编码框(Coding sequence,ORF)的扩增、回收 | 第53页 |
| ·酶切Nkx2-5 基因的ORF 及克隆用载体pcDNA3.1 | 第53-54页 |
| ·重组质粒及菌落PCR 结果 | 第54页 |
| ·酶切鉴定 | 第54-55页 |
| ·测序鉴定 | 第55页 |
| ·pcDNA3.1-Nkx2-5 在ASCs 细胞中的表达 | 第55-56页 |
| ·讨论 | 第56页 |
| ·小结 | 第56-57页 |
| 第六章 心肌特异性基因重组腺病毒的构建 | 第57-71页 |
| ·试验材料 | 第57页 |
| ·质粒、菌株及细胞株 | 第57页 |
| ·工具酶及试剂 | 第57页 |
| ·方法 | 第57-64页 |
| ·主要试剂的配制 | 第57页 |
| ·重组腺病毒载体pAdTrack-actin 和pAdTrack-CMV-actin 构建 | 第57-60页 |
| ·重组腺病毒骨架载体的构建 | 第60-62页 |
| ·重组腺病毒pAd-CMV- Nkx2.5 的产生 | 第62-64页 |
| ·结果 | 第64-68页 |
| ·重组穿梭转移质粒的构建 | 第64-67页 |
| ·重组腺病毒骨架载体的构建及鉴定 | 第67-68页 |
| ·讨论 | 第68-70页 |
| ·小结 | 第70-71页 |
| 结论 | 第71-72页 |
| 创新点 | 第72页 |
| 进一步研究的内容 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-80页 |
| 附件:Nkx2.5 测序图谱 | 第80-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
| 作者简介 | 第83页 |
