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家蚕核型多角体病毒(BmNPV)ORF67、ORF101基因分析

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-15页
第1章 绪论第15-31页
   ·杆状病毒及其应用第15-17页
   ·杆状病毒的生活周期第17-18页
   ·杆状病毒的结构第18-19页
   ·杆状病毒的基因组成第19-23页
     ·杆状病毒基因组序列第19-20页
     ·已经鉴定的杆状病毒基因第20-23页
   ·病毒入侵过程中ODV囊膜蛋白所起的作用第23-26页
     ·ODV-E66第23-24页
     ·ODV-E25(P25)第24页
     ·ODV-EC27第24-25页
     ·P74第25-26页
   ·病毒入侵过程中BV囊膜蛋白所起的作用第26-27页
   ·与病毒基因表达调节有关的基因第27页
   ·肌动蛋白与杆状病毒第27-31页
     ·肌动蛋白在细胞内生理功能的多样性第27-28页
     ·杆状病毒与宿主细胞肌动蛋白相互作用的研究第28页
     ·宿主细胞激动蛋白在杆状病毒入侵过程中的变化第28-29页
     ·杆状病毒可能参与肌动蛋白相互作用的蛋白第29-31页
第2章 杆状病毒BmORF67和BmORF101基因的序列分析第31-39页
   ·基因序列及分析方法第31页
     ·BmORF67和BmORF101基因序列第31页
     ·计算机软件及分析方法第31页
   ·结果第31-38页
     ·BmORF67基因阅读框分析第31-32页
     ·BmORF101基因阅读框分析第32-34页
     ·BmORF67和BmORF101蛋白二级结构分析第34页
     ·BmORF67蛋白同源性比较第34-36页
     ·BmORF101蛋白同源性比较第36-38页
   ·讨论第38-39页
第3章 杆状病毒BmORF67克隆及其在原核细胞中的表达与抗体制备第39-53页
   ·材料与方法第39-47页
     ·材料第39-43页
     ·方法第43-47页
   ·结果第47-52页
     ·BmORF67基因的克隆第47-49页
     ·BmORF67基因的原核表达第49-50页
     ·融合蛋白6×His接头的鉴定第50-51页
     ·目的蛋白的纯化第51页
     ·BmORF67蛋白抗体的制备与检测第51页
     ·BmORF67蛋白抗体在真核细胞中的检测第51-52页
   ·讨论第52页
   ·小结第52-53页
第四章 杆状病毒BmORF67基因的转录、表达研究第53-63页
   ·材料与方法第53-57页
     ·材料第53-54页
     ·方法第54-57页
   ·结果第57-61页
     ·BmORF67的转录时相第57-58页
     ·BmORF67的表达时相第58-59页
     ·BmORF67蛋白在病毒结构中的定位第59-60页
     ·BmORF67的亚细胞定位第60-61页
   ·讨论第61页
   ·小结第61-63页
第五章 与BmORF67互作蛋白的分析第63-73页
   ·材料与方法第63-67页
     ·材料第63-64页
     ·方法第64-67页
   ·结果第67-70页
     ·Pull-down分析第67-68页
     ·免疫共沉淀分析第68-69页
     ·质谱鉴定Pull-down和免疫共沉淀产物第69-70页
   ·讨论第70-71页
   ·小结第71-73页
第六章 BmORF101基因缺失和拯救的重组Bacmid的构建第73-87页
   ·材料与方法第73-81页
     ·材料第73-75页
     ·方法第75-81页
   ·结果第81-85页
     ·U、Cm、D片段的PCR扩增结果第81-82页
     ·重组质粒pUC-UCmD的酶切鉴定第82-83页
     ·重组质粒pBm~(KO)的PCR鉴定第83-84页
     ·供体质粒pFPG和pFPG-101repair的PCR鉴定第84-85页
     ·重组BacmidpBm~(KO-PG)、pBm~(WT-PG)和pBm~(KO-PG-101repair)的PCR鉴定第85页
   ·讨论第85-86页
   ·小结第86-87页
第七章 BmORF101基因的研究第87-97页
   ·材料与方法第87-90页
     ·质粒载体第87页
     ·方法第87-90页
   ·结果第90-96页
     ·BmORF101基因的转录时相第90-91页
     ·pBm~(KO-PG)、pBm~(WT-PG)和pBm~(KO-PG-101repair)转染BmN细胞不同时间的荧光显微观察第91-92页
     ·pBm~(KO-PG)、pBm~(WT-PG)和pBm~(KO-PG-101repair)转染BmN细胞BV增长曲线测定第92页
     ·vBm~(KO)及vBm~(WT)感染性的检测结果第92-93页
     ·vBm~(KO)和vBm~(WT)基因组的检测第93-94页
     ·vBm~(WT)和vBm~(repair)感染BmN细胞BV增长曲线测定第94页
     ·BmORF101的亚细胞定位第94-96页
   ·讨论第96页
   ·小结第96-97页
总结和展望第97-99页
 总结第97页
 对下一步工作的思考第97-99页
本研究创新点第99-101页
参考文献第101-113页
致谢第113-114页
读博期间发表的研究论文和参加的课题第114页

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