| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-15页 |
| 第1章 绪论 | 第15-31页 |
| ·杆状病毒及其应用 | 第15-17页 |
| ·杆状病毒的生活周期 | 第17-18页 |
| ·杆状病毒的结构 | 第18-19页 |
| ·杆状病毒的基因组成 | 第19-23页 |
| ·杆状病毒基因组序列 | 第19-20页 |
| ·已经鉴定的杆状病毒基因 | 第20-23页 |
| ·病毒入侵过程中ODV囊膜蛋白所起的作用 | 第23-26页 |
| ·ODV-E66 | 第23-24页 |
| ·ODV-E25(P25) | 第24页 |
| ·ODV-EC27 | 第24-25页 |
| ·P74 | 第25-26页 |
| ·病毒入侵过程中BV囊膜蛋白所起的作用 | 第26-27页 |
| ·与病毒基因表达调节有关的基因 | 第27页 |
| ·肌动蛋白与杆状病毒 | 第27-31页 |
| ·肌动蛋白在细胞内生理功能的多样性 | 第27-28页 |
| ·杆状病毒与宿主细胞肌动蛋白相互作用的研究 | 第28页 |
| ·宿主细胞激动蛋白在杆状病毒入侵过程中的变化 | 第28-29页 |
| ·杆状病毒可能参与肌动蛋白相互作用的蛋白 | 第29-31页 |
| 第2章 杆状病毒BmORF67和BmORF101基因的序列分析 | 第31-39页 |
| ·基因序列及分析方法 | 第31页 |
| ·BmORF67和BmORF101基因序列 | 第31页 |
| ·计算机软件及分析方法 | 第31页 |
| ·结果 | 第31-38页 |
| ·BmORF67基因阅读框分析 | 第31-32页 |
| ·BmORF101基因阅读框分析 | 第32-34页 |
| ·BmORF67和BmORF101蛋白二级结构分析 | 第34页 |
| ·BmORF67蛋白同源性比较 | 第34-36页 |
| ·BmORF101蛋白同源性比较 | 第36-38页 |
| ·讨论 | 第38-39页 |
| 第3章 杆状病毒BmORF67克隆及其在原核细胞中的表达与抗体制备 | 第39-53页 |
| ·材料与方法 | 第39-47页 |
| ·材料 | 第39-43页 |
| ·方法 | 第43-47页 |
| ·结果 | 第47-52页 |
| ·BmORF67基因的克隆 | 第47-49页 |
| ·BmORF67基因的原核表达 | 第49-50页 |
| ·融合蛋白6×His接头的鉴定 | 第50-51页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第51页 |
| ·BmORF67蛋白抗体的制备与检测 | 第51页 |
| ·BmORF67蛋白抗体在真核细胞中的检测 | 第51-52页 |
| ·讨论 | 第52页 |
| ·小结 | 第52-53页 |
| 第四章 杆状病毒BmORF67基因的转录、表达研究 | 第53-63页 |
| ·材料与方法 | 第53-57页 |
| ·材料 | 第53-54页 |
| ·方法 | 第54-57页 |
| ·结果 | 第57-61页 |
| ·BmORF67的转录时相 | 第57-58页 |
| ·BmORF67的表达时相 | 第58-59页 |
| ·BmORF67蛋白在病毒结构中的定位 | 第59-60页 |
| ·BmORF67的亚细胞定位 | 第60-61页 |
| ·讨论 | 第61页 |
| ·小结 | 第61-63页 |
| 第五章 与BmORF67互作蛋白的分析 | 第63-73页 |
| ·材料与方法 | 第63-67页 |
| ·材料 | 第63-64页 |
| ·方法 | 第64-67页 |
| ·结果 | 第67-70页 |
| ·Pull-down分析 | 第67-68页 |
| ·免疫共沉淀分析 | 第68-69页 |
| ·质谱鉴定Pull-down和免疫共沉淀产物 | 第69-70页 |
| ·讨论 | 第70-71页 |
| ·小结 | 第71-73页 |
| 第六章 BmORF101基因缺失和拯救的重组Bacmid的构建 | 第73-87页 |
| ·材料与方法 | 第73-81页 |
| ·材料 | 第73-75页 |
| ·方法 | 第75-81页 |
| ·结果 | 第81-85页 |
| ·U、Cm、D片段的PCR扩增结果 | 第81-82页 |
| ·重组质粒pUC-UCmD的酶切鉴定 | 第82-83页 |
| ·重组质粒pBm~(KO)的PCR鉴定 | 第83-84页 |
| ·供体质粒pFPG和pFPG-101repair的PCR鉴定 | 第84-85页 |
| ·重组BacmidpBm~(KO-PG)、pBm~(WT-PG)和pBm~(KO-PG-101repair)的PCR鉴定 | 第85页 |
| ·讨论 | 第85-86页 |
| ·小结 | 第86-87页 |
| 第七章 BmORF101基因的研究 | 第87-97页 |
| ·材料与方法 | 第87-90页 |
| ·质粒载体 | 第87页 |
| ·方法 | 第87-90页 |
| ·结果 | 第90-96页 |
| ·BmORF101基因的转录时相 | 第90-91页 |
| ·pBm~(KO-PG)、pBm~(WT-PG)和pBm~(KO-PG-101repair)转染BmN细胞不同时间的荧光显微观察 | 第91-92页 |
| ·pBm~(KO-PG)、pBm~(WT-PG)和pBm~(KO-PG-101repair)转染BmN细胞BV增长曲线测定 | 第92页 |
| ·vBm~(KO)及vBm~(WT)感染性的检测结果 | 第92-93页 |
| ·vBm~(KO)和vBm~(WT)基因组的检测 | 第93-94页 |
| ·vBm~(WT)和vBm~(repair)感染BmN细胞BV增长曲线测定 | 第94页 |
| ·BmORF101的亚细胞定位 | 第94-96页 |
| ·讨论 | 第96页 |
| ·小结 | 第96-97页 |
| 总结和展望 | 第97-99页 |
| 总结 | 第97页 |
| 对下一步工作的思考 | 第97-99页 |
| 本研究创新点 | 第99-101页 |
| 参考文献 | 第101-113页 |
| 致谢 | 第113-114页 |
| 读博期间发表的研究论文和参加的课题 | 第114页 |