摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-15页 |
第1章 绪论 | 第15-31页 |
·杆状病毒及其应用 | 第15-17页 |
·杆状病毒的生活周期 | 第17-18页 |
·杆状病毒的结构 | 第18-19页 |
·杆状病毒的基因组成 | 第19-23页 |
·杆状病毒基因组序列 | 第19-20页 |
·已经鉴定的杆状病毒基因 | 第20-23页 |
·病毒入侵过程中ODV囊膜蛋白所起的作用 | 第23-26页 |
·ODV-E66 | 第23-24页 |
·ODV-E25(P25) | 第24页 |
·ODV-EC27 | 第24-25页 |
·P74 | 第25-26页 |
·病毒入侵过程中BV囊膜蛋白所起的作用 | 第26-27页 |
·与病毒基因表达调节有关的基因 | 第27页 |
·肌动蛋白与杆状病毒 | 第27-31页 |
·肌动蛋白在细胞内生理功能的多样性 | 第27-28页 |
·杆状病毒与宿主细胞肌动蛋白相互作用的研究 | 第28页 |
·宿主细胞激动蛋白在杆状病毒入侵过程中的变化 | 第28-29页 |
·杆状病毒可能参与肌动蛋白相互作用的蛋白 | 第29-31页 |
第2章 杆状病毒BmORF67和BmORF101基因的序列分析 | 第31-39页 |
·基因序列及分析方法 | 第31页 |
·BmORF67和BmORF101基因序列 | 第31页 |
·计算机软件及分析方法 | 第31页 |
·结果 | 第31-38页 |
·BmORF67基因阅读框分析 | 第31-32页 |
·BmORF101基因阅读框分析 | 第32-34页 |
·BmORF67和BmORF101蛋白二级结构分析 | 第34页 |
·BmORF67蛋白同源性比较 | 第34-36页 |
·BmORF101蛋白同源性比较 | 第36-38页 |
·讨论 | 第38-39页 |
第3章 杆状病毒BmORF67克隆及其在原核细胞中的表达与抗体制备 | 第39-53页 |
·材料与方法 | 第39-47页 |
·材料 | 第39-43页 |
·方法 | 第43-47页 |
·结果 | 第47-52页 |
·BmORF67基因的克隆 | 第47-49页 |
·BmORF67基因的原核表达 | 第49-50页 |
·融合蛋白6×His接头的鉴定 | 第50-51页 |
·目的蛋白的纯化 | 第51页 |
·BmORF67蛋白抗体的制备与检测 | 第51页 |
·BmORF67蛋白抗体在真核细胞中的检测 | 第51-52页 |
·讨论 | 第52页 |
·小结 | 第52-53页 |
第四章 杆状病毒BmORF67基因的转录、表达研究 | 第53-63页 |
·材料与方法 | 第53-57页 |
·材料 | 第53-54页 |
·方法 | 第54-57页 |
·结果 | 第57-61页 |
·BmORF67的转录时相 | 第57-58页 |
·BmORF67的表达时相 | 第58-59页 |
·BmORF67蛋白在病毒结构中的定位 | 第59-60页 |
·BmORF67的亚细胞定位 | 第60-61页 |
·讨论 | 第61页 |
·小结 | 第61-63页 |
第五章 与BmORF67互作蛋白的分析 | 第63-73页 |
·材料与方法 | 第63-67页 |
·材料 | 第63-64页 |
·方法 | 第64-67页 |
·结果 | 第67-70页 |
·Pull-down分析 | 第67-68页 |
·免疫共沉淀分析 | 第68-69页 |
·质谱鉴定Pull-down和免疫共沉淀产物 | 第69-70页 |
·讨论 | 第70-71页 |
·小结 | 第71-73页 |
第六章 BmORF101基因缺失和拯救的重组Bacmid的构建 | 第73-87页 |
·材料与方法 | 第73-81页 |
·材料 | 第73-75页 |
·方法 | 第75-81页 |
·结果 | 第81-85页 |
·U、Cm、D片段的PCR扩增结果 | 第81-82页 |
·重组质粒pUC-UCmD的酶切鉴定 | 第82-83页 |
·重组质粒pBm~(KO)的PCR鉴定 | 第83-84页 |
·供体质粒pFPG和pFPG-101repair的PCR鉴定 | 第84-85页 |
·重组BacmidpBm~(KO-PG)、pBm~(WT-PG)和pBm~(KO-PG-101repair)的PCR鉴定 | 第85页 |
·讨论 | 第85-86页 |
·小结 | 第86-87页 |
第七章 BmORF101基因的研究 | 第87-97页 |
·材料与方法 | 第87-90页 |
·质粒载体 | 第87页 |
·方法 | 第87-90页 |
·结果 | 第90-96页 |
·BmORF101基因的转录时相 | 第90-91页 |
·pBm~(KO-PG)、pBm~(WT-PG)和pBm~(KO-PG-101repair)转染BmN细胞不同时间的荧光显微观察 | 第91-92页 |
·pBm~(KO-PG)、pBm~(WT-PG)和pBm~(KO-PG-101repair)转染BmN细胞BV增长曲线测定 | 第92页 |
·vBm~(KO)及vBm~(WT)感染性的检测结果 | 第92-93页 |
·vBm~(KO)和vBm~(WT)基因组的检测 | 第93-94页 |
·vBm~(WT)和vBm~(repair)感染BmN细胞BV增长曲线测定 | 第94页 |
·BmORF101的亚细胞定位 | 第94-96页 |
·讨论 | 第96页 |
·小结 | 第96-97页 |
总结和展望 | 第97-99页 |
总结 | 第97页 |
对下一步工作的思考 | 第97-99页 |
本研究创新点 | 第99-101页 |
参考文献 | 第101-113页 |
致谢 | 第113-114页 |
读博期间发表的研究论文和参加的课题 | 第114页 |