| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 缩略语表 | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第10-24页 |
| ·微生物细胞表面展示技术研究进展 | 第10-18页 |
| ·微生物细胞表面展示技术简介 | 第10-11页 |
| ·运载蛋白 | 第11页 |
| ·乘客蛋白 | 第11页 |
| ·微生物细胞表面展示体系的种类 | 第11-16页 |
| ·微生物细胞表面展示技术的应用现状 | 第16-18页 |
| ·运载蛋白-ACMA(N-ACETYLMURAMINIDASE) | 第18-19页 |
| ·AcmA(N-Acetylmuraminidase)简介 | 第18-19页 |
| ·AcmA在细胞表面展示方面的应用 | 第19页 |
| ·乘客蛋白-B-1,3-1,4-葡聚糖酶 | 第19-23页 |
| ·β-1,3-1,4-葡聚糖酶简介 | 第19-20页 |
| ·来源 | 第20-21页 |
| ·应用现状及前景 | 第21-23页 |
| ·研究的目的和意义 | 第23-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-32页 |
| ·实验材料 | 第24-28页 |
| ·菌株 | 第24-25页 |
| ·质粒 | 第25-26页 |
| ·培养基 | 第26页 |
| ·聚合酶链式反应引物 | 第26-27页 |
| ·实验试剂及仪器 | 第27-28页 |
| ·实验方法 | 第28-32页 |
| ·DNA提取 | 第28页 |
| ·PCR扩增 | 第28-29页 |
| ·DNA电泳分析 | 第29页 |
| ·DNA片断的回收 | 第29页 |
| ·转化 | 第29页 |
| ·绿色荧光蛋白(GFP)荧光强度的检测 | 第29页 |
| ·SDS-PAGE电泳以及Western-blot分析 | 第29-30页 |
| ·蛋白酶敏感性实验 | 第30页 |
| ·SDS以及EDTA敏感性实验 | 第30页 |
| ·细胞免疫实验以及FACS分析 | 第30-31页 |
| ·细胞分级分离 | 第31页 |
| ·葡聚糖酶活性测定 | 第31页 |
| ·质粒稳定性分析 | 第31-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-48页 |
| ·ACMA在乳酸乳球菌中表面展示活性及性能研究 | 第32-38页 |
| ·acmA基因克隆及序列分析 | 第32-33页 |
| ·含融合基因acmA/gfp的乳酸乳球菌表面展示载体构建 | 第33-34页 |
| ·SDS-PAGE | 第34-35页 |
| ·荧光活性检测 | 第35页 |
| ·免疫流式细胞技术检测乳酸乳球菌表面展示GFP性能 | 第35-36页 |
| ·gls基因克隆及序列分析 | 第36-37页 |
| ·乳酸乳球菌表面展示GLS载体构建 | 第37-38页 |
| ·乳酸乳球菌表面展示GLS酶活测定 | 第38页 |
| ·ACMA及N末端在大肠杆菌中表面展示性能研究 | 第38-48页 |
| ·表面展示载体的构建及表达活性 | 第38-41页 |
| ·AcmA及AcmA-N在大肠杆菌中表面展示GFP | 第41-46页 |
| ·AcmA及AcmA-N在大肠杆菌中表面展示GLS | 第46-47页 |
| ·质粒稳定性分析 | 第47-48页 |
| 4 小结和讨论 | 第48-51页 |
| ·小结 | 第48-49页 |
| ·讨论 | 第49-51页 |
| ·基于AcmA的最优化表面展示体系 | 第49-50页 |
| ·开发工业酶类的微生物来源以及生物杀菌剂 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 附录 | 第60-63页 |
