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高效水解大豆异黄酮β-葡萄糖苷酶及其对肉公鸡生产性能的影响研究

致谢第1-14页
引言第14-16页
中文摘要第16-19页
Abstract第19-23页
主要英文缩写第23-24页
第一篇 文献综述第24-55页
   ·β-葡萄糖苷酶研究进展第24-38页
     ·自然界中的β-葡萄糖苷酶第24页
     ·β-葡萄糖苷酶的活性测定第24-25页
     ·β-葡萄糖苷酶的提取与纯化第25-26页
     ·β-葡萄糖苷酶的理化特性第26-28页
       ·分子量第26-27页
       ·最适反应温度和热稳定性第27页
       ·等电点(pI)、最适pH和pH稳定性第27-28页
     ·β-葡萄糖苷酶的催化反应机制第28-30页
       ·反应机制第28-29页
       ·活性中心结构第29页
       ·底物特异性第29页
       ·催化反应影响因素第29-30页
     ·β-葡萄糖苷酶的最优培养条件第30-31页
     ·β-葡萄糖苷酶基因克隆和表达第31-34页
     ·β-葡萄糖苷酶的应用第34-38页
       ·生产低聚龙胆糖第34页
       ·改善果汁风味第34-35页
       ·果酒增香作用第35页
       ·茶叶增香作用第35-36页
       ·烟草增香作用第36-37页
       ·生产大豆异黄酮苷元第37页
       ·在纤维素降解中的应用第37-38页
   ·大豆异黄酮的研究进展第38-53页
     ·大豆异黄酮的种类与结构第38-39页
     ·大豆异黄酮含量分析方法第39-40页
     ·大豆异黄酮含量与分布第40-41页
     ·大豆异黄酮的吸收与代谢机制第41-44页
       ·大豆异黄酮的吸收部位和时间第41页
       ·大豆异黄酮在肠道中的代谢第41-43页
       ·影响大豆异黄酮代谢的因素第43-44页
     ·大豆异黄酮的生理功能第44-49页
       ·类雌激素与抗雌激素作用第44页
       ·抗氧化活性第44-45页
       ·提高机体免疫力第45页
       ·调节血脂及预防心血管疾病第45-47页
       ·抗癌作用第47页
       ·改善骨质疏松的作用第47-48页
       ·影响物质代谢第48-49页
     ·大豆异黄酮的毒性第49-50页
     ·大豆异黄酮的水解第50-52页
     ·大豆异黄酮在动物生产中的应用第52-53页
       ·提高动物生产性能第52页
       ·改善动物的繁殖性能第52-53页
       ·对动物其它方面的影响第53页
   ·研究目的和意义第53-55页
第二篇 研究报告第55-152页
 第一章 菌种筛选和鉴定第55-67页
  摘要第55-56页
   ·材料与方法第56-60页
     ·材料第56页
       ·菌种第56页
       ·主要试剂第56页
       ·菌种鉴定培养基第56页
     ·方法第56-60页
       ·种子培养第56-57页
       ·液体发酵培养第57页
       ·固态发酵培养第57页
       ·粗酶液浸提第57页
       ·β-葡萄糖苷酶活性测定第57-59页
       ·菌种的分离筛选第59页
       ·真菌基因组DNA的制备第59页
       ·18S rDNA基因的PCR扩增第59页
       ·PCR产物克隆第59-60页
       ·序列分析第60页
   ·结果与分析第60-65页
     ·不同菌种液体发酵产β-葡萄糖苷酶活性第60页
     ·不同菌种固体发酵产β-葡萄糖苷酶活性第60-61页
     ·菌株的形态特征第61页
     ·目的基因PCR扩增第61-62页
     ·PCR产物克隆第62页
     ·序列分析第62-65页
   ·讨论第65-66页
   ·结论第66-67页
 第二章 黑曲霉产β-葡萄糖苷酶发酵特性研究第67-82页
  摘要第67-68页
   ·材料与方法第68-71页
     ·材料第68页
       ·微生物第68页
       ·试剂及其它原料第68页
     ·方法第68-71页
       ·种子培养第68页
       ·β-葡萄糖苷酶固体培养基的优化第68-69页
       ·β-葡萄糖苷酶的发酵条件优化第69-70页
       ·β-葡萄糖苷酶活性测定第70页
       ·含水量的分析与计算第70页
       ·干物质失重率和发酵产率计算第70-71页
       ·培养基pH值测定第71页
       ·统计分析第71页
   ·结果与讨论第71-80页
     ·黑曲霉产β-葡萄糖苷酶的固体培养基优化第71-75页
       ·麦麸和玉米芯粉对微生物产β-葡萄糖苷酶水平的影响第71-72页
       ·麦麸和米糠对微生物产β-葡萄糖苷酶水平的影响第72-73页
       ·不同碳源对微生物产β-葡萄糖苷酶水平的影响第73-74页
       ·不同氮源对微生物产β-葡萄糖苷酶水平的影响第74-75页
     ·黑曲霉产β-葡萄糖苷酶的培养条件优化第75-80页
       ·培养基含水量对微生物产β-葡萄糖苷酶水平的影响第75-76页
       ·菌种接种量对微生物产β-葡萄糖苷酶水平的影响第76-77页
       ·培养基pH对微生物产β-葡萄糖苷酶水平的影响第77-78页
       ·温度对微生物产β-葡萄糖苷酶水平的影响第78-79页
       ·发酵时间对微生物产β-葡萄糖苷酶水平的影响第79-80页
   ·结论第80-82页
 第三章 黑曲霉β-葡萄糖苷酶的酶学特性研究第82-95页
  摘要第82-83页
   ·材料与方法第83-87页
     ·材料第83页
       ·β-葡萄糖苷酶第83页
       ·仪器与试剂第83页
     ·试验方法第83-87页
       ·粗酶液的提取及活性测定第83页
       ·硫酸铵分级沉淀第83-84页
       ·Sephadex G-25脱盐第84页
       ·Sephadex G-100凝胶层析第84页
       ·蛋白凝胶电泳法测定分子量第84-86页
       ·酶最适反应温度第86页
       ·酶最适反应pH第86页
       ·酶热稳定性第86-87页
       ·酶pH稳定性第87页
       ·米氏常数测定第87页
   ·结果与分析第87-94页
     ·酶的提取纯化及其分子量第87-90页
       ·粗提酶液活性第87页
       ·硫酸铵分级沉淀后活性第87-88页
       ·硫酸铵盐沉淀后β-葡萄糖苷酶脱盐第88页
       ·β-葡萄糖苷酶纯化第88-89页
       ·SDS-PAGE凝胶电泳第89-90页
     ·β-葡萄糖苷酶的酶学特性第90-94页
       ·酶的最适反应温度第90-91页
       ·酶的最适反应pH第91-92页
       ·酶的热稳定性第92-93页
       ·酶pH稳定性第93-94页
       ·酶的米氏常数第94页
   ·结论第94-95页
 第四章 黑曲霉β-葡萄糖苷酶水解结合型大豆异黄酮效率研究第95-103页
  摘要第95-96页
   ·材料与方法第96-98页
     ·试验材料第96页
     ·仪器第96页
     ·试验方法第96-98页
       ·大豆异黄酮的酶解第96页
       ·β-葡萄糖苷酶活测定第96页
       ·大豆异黄酮的检测第96-97页
       ·水解条件优化第97-98页
       ·数据统计及分析第98页
   ·结果与分析第98-101页
     ·水解效率与模型的建立第98-101页
     ·各因素对水解后游离型苷元含量的影响第101页
     ·模型的优化第101页
   ·讨论第101-102页
   ·结论第102-103页
 第五章 黑曲霉β-葡萄糖苷酶基因克隆及序列分析第103-123页
  摘要第103-104页
   ·材料与方法第104-111页
     ·试验材料第104-106页
       ·供试菌株第104页
       ·主要试剂第104页
       ·引物设计第104页
       ·培养基及主要化学试剂的配制第104-106页
       ·主要试验仪器第106页
     ·试验方法第106-111页
       ·菌种培养第106页
       ·总RNA抽提(TRIzol法)第106页
       ·反转录第106-107页
       ·PCR扩增黑曲霉β-葡萄糖苷酶基因序列第107页
       ·PCR产物电泳检测及割胶回收第107-108页
       ·DNA回收产物与质粒载体连接第108-109页
       ·感受态细胞的制备与目的DNA的转化第109页
       ·阳性克隆子的筛选第109-110页
       ·重组DNA核苷酸序列分析第110-111页
   ·结果与分析第111-120页
     ·RNA提取与质控第111页
     ·RT-PCR扩增第111-112页
     ·阳性克隆子的筛选与鉴定第112页
     ·序列分析第112-117页
     ·结构预测第117-120页
       ·黑曲霉β-葡萄糖苷酶基因信号肽切割位点预测第117-118页
       ·黑曲霉β-葡萄糖苷酶成熟肽N-糖基化位点预测第118-119页
       ·黑曲霉β-葡萄糖苷酶成熟肽二级结构预测第119-120页
       ·黑曲霉β-葡萄糖苷酶成熟肽三维结构预测第120页
   ·讨论第120-122页
   ·结论第122-123页
 第六章 β-葡萄糖苷酶对肉公鸡生产性能的影响及机理研究第123-152页
  摘要第123-125页
   ·材料与方法第125-130页
     ·试验材料第125页
     ·试验方法第125-130页
       ·饲养试验第125页
       ·消化试验第125-127页
       ·屠宰试验第127-128页
       ·血清中生化指标测定第128-129页
       ·肝脏中GSH-PX、GR指标和粗脂肪测定测定第129页
       ·腹脂中LPL和HSL指标测定第129页
       ·十二指肠内容物中胰蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶活性测定第129-130页
       ·豆粕和血清中大豆异黄酮含量测定第130页
       ·饲料、肠内容物和粪中β-葡萄糖苷酶活性及水分测定第130页
       ·切片制作第130页
     ·数据分析与统计第130页
   ·研究结果第130-139页
     ·β-葡萄糖苷酶对肉公鸡生产性能的影响第130-131页
     ·β-葡萄糖苷酶活性在肠道中的变化规律第131-132页
     ·β-葡萄糖苷酶对肉公鸡血清中大豆异黄酮含量的影响第132-133页
     ·β-葡萄糖苷酶对肉公鸡机体组成和肉质的影响第133-134页
     ·β-葡萄糖苷酶对肉公鸡消化机能的影响第134-136页
       ·β-葡萄糖苷酶对肉公鸡消化器官重量的影响第134页
       ·β-葡萄糖苷酶对肉公鸡十二指肠绒毛的影响第134-136页
       ·β-葡萄糖苷酶对肉公鸡十二指肠消化酶活性的影响第136页
       ·β-葡萄糖苷酶对肉公鸡营养物质表观消化率的影响第136页
     ·β-葡萄糖苷酶对肉公鸡骨骼生长发育的影响第136-137页
     ·β-葡萄糖苷酶对肉公鸡脂肪代谢的影响第137-138页
       ·β-葡萄糖苷酶对肉公鸡脂肪沉积的影响第137页
       ·β-葡萄糖苷酶对肉公鸡脂肪组织中激素的影响第137-138页
       ·β-葡萄糖苷酶对肉公鸡血清中脂肪代谢相关指标的影响第138页
     ·β-葡萄糖苷酶对肉公鸡抗氧化的影响第138-139页
     ·β-葡萄糖苷酶对肉公鸡血清生长激素的影响第139页
   ·讨论第139-151页
     ·β-葡萄糖苷酶对肉公鸡生产性能的影响第139-141页
     ·饲粮中的β-葡萄糖苷酶活性及其在肉公鸡肠道中的变化第141-142页
     ·β-葡萄糖苷酶对肉公鸡大豆异黄酮吸收和代谢的影响第142-143页
     ·β-葡萄糖苷酶对肉公鸡机体组成和肉质的影响第143-145页
     ·β-葡萄糖苷酶对肉公鸡消化机能的影响第145-146页
     ·β-葡萄糖苷酶对肉公鸡骨骼生长发育的影响第146-147页
     ·β-葡萄糖苷酶对肉公鸡脂肪代谢的影响第147-149页
     ·β-葡萄糖苷酶对肉公鸡抗氧化能力的影响第149-150页
     ·β-葡萄糖苷酶对肉公鸡体内激素水平的影响第150-151页
   ·小结第151-152页
第三篇 结论第152-154页
   ·小结第152-153页
   ·创新点第153页
   ·后续研究展望第153-154页
参考文献第154-169页
附录第169-170页
个人简历和主要发表及录用的论文第170-171页

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