摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-8页 |
第一章 引言 | 第8-32页 |
·心脏发育过程的研究 | 第8-9页 |
·心脏发育的基因调控 | 第9-20页 |
·心脏发育的重要调控因子 | 第9-11页 |
·NKX2.5基因 | 第11-12页 |
·MEF-2家族 | 第12-13页 |
·SRF基因 | 第13-14页 |
·HAND基因 | 第14-15页 |
·锌指蛋白(ZFP)基因家族 | 第15-20页 |
·BTB转录因子的结构与功能 | 第20-23页 |
·MAPK信号途径与心脏发育 | 第23-30页 |
·MAPK家族 | 第24-27页 |
·MAPK的特异性激活机制 | 第27-28页 |
·MAPK信号途径的功能 | 第28-30页 |
·本课题的研究意义 | 第30-32页 |
第二章 材料与方法 | 第32-50页 |
·材料 | 第32-36页 |
·生物信息学软件 | 第32-33页 |
·主要试剂 | 第33-34页 |
·细胞、菌株和质粒 | 第34-35页 |
·主要实验仪器和耗材 | 第35-36页 |
·方法 | 第36-50页 |
·人类心脏cDNA文库中分离KTBTD7 | 第36-38页 |
·连接T载体 | 第38-39页 |
·感受态细胞的制备 | 第39页 |
·连接产物的转化 | 第39-40页 |
·质粒的小量制备 | 第40-41页 |
·阳性克隆的筛选与鉴定 | 第41页 |
·测序 | 第41页 |
·原核表达重组质粒的制备 | 第41-42页 |
·真核表达重组质粒的大量制备 | 第42-43页 |
·原核细胞诱导蛋白质表达及纯化 | 第43-44页 |
·多克隆抗体的制备与纯化 | 第44-46页 |
·胚胎各组织蛋白的提取与检测 | 第46页 |
·常规细胞培养及转染 | 第46-48页 |
·亚细胞定位观察 | 第48页 |
·基因转录活性的报告分析 | 第48-50页 |
第三章 人类KBTBD7基因的克隆与表达研究 | 第50-66页 |
·人类KBTBD7基因计算机克隆及生物信息学分析 | 第50-55页 |
·KBTBD7基因计算机克隆 | 第50页 |
·KBTBD7的蛋白质产物 | 第50-53页 |
·KBTBD7与同源基因的编码蛋白的同源性比较及进化分析 | 第53-55页 |
·KBTBD7基因ORF克隆 | 第55-56页 |
·KBTBD7蛋白表达及抗体制备 | 第56-58页 |
·原核蛋白表达质粒构建 | 第56-58页 |
·KBTBD7基因在人体胚胎中的表达 | 第58-59页 |
·亚细胞定位分析 | 第59-60页 |
·KBTBD7的转录活性分析 | 第60-61页 |
·KBTBD7在MAPK信号途径中抑制AP-1和SRE的转录活性 | 第61-66页 |
第四章 讨论 | 第66-67页 |
结语 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-77页 |
附录1:中英文缩写词简表 | 第77-79页 |
附录2:攻读学位期间的学术论文和综述 | 第79-80页 |
后记 | 第80-81页 |