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人类心脏发育候选基因KBTBD7的表达与功能研究

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-8页
第一章 引言第8-32页
   ·心脏发育过程的研究第8-9页
   ·心脏发育的基因调控第9-20页
     ·心脏发育的重要调控因子第9-11页
     ·NKX2.5基因第11-12页
     ·MEF-2家族第12-13页
     ·SRF基因第13-14页
     ·HAND基因第14-15页
     ·锌指蛋白(ZFP)基因家族第15-20页
   ·BTB转录因子的结构与功能第20-23页
   ·MAPK信号途径与心脏发育第23-30页
     ·MAPK家族第24-27页
     ·MAPK的特异性激活机制第27-28页
     ·MAPK信号途径的功能第28-30页
   ·本课题的研究意义第30-32页
第二章 材料与方法第32-50页
   ·材料第32-36页
     ·生物信息学软件第32-33页
     ·主要试剂第33-34页
     ·细胞、菌株和质粒第34-35页
     ·主要实验仪器和耗材第35-36页
   ·方法第36-50页
     ·人类心脏cDNA文库中分离KTBTD7第36-38页
     ·连接T载体第38-39页
     ·感受态细胞的制备第39页
     ·连接产物的转化第39-40页
     ·质粒的小量制备第40-41页
     ·阳性克隆的筛选与鉴定第41页
     ·测序第41页
     ·原核表达重组质粒的制备第41-42页
     ·真核表达重组质粒的大量制备第42-43页
     ·原核细胞诱导蛋白质表达及纯化第43-44页
     ·多克隆抗体的制备与纯化第44-46页
     ·胚胎各组织蛋白的提取与检测第46页
     ·常规细胞培养及转染第46-48页
     ·亚细胞定位观察第48页
     ·基因转录活性的报告分析第48-50页
第三章 人类KBTBD7基因的克隆与表达研究第50-66页
   ·人类KBTBD7基因计算机克隆及生物信息学分析第50-55页
     ·KBTBD7基因计算机克隆第50页
     ·KBTBD7的蛋白质产物第50-53页
     ·KBTBD7与同源基因的编码蛋白的同源性比较及进化分析第53-55页
   ·KBTBD7基因ORF克隆第55-56页
   ·KBTBD7蛋白表达及抗体制备第56-58页
     ·原核蛋白表达质粒构建第56-58页
   ·KBTBD7基因在人体胚胎中的表达第58-59页
   ·亚细胞定位分析第59-60页
   ·KBTBD7的转录活性分析第60-61页
   ·KBTBD7在MAPK信号途径中抑制AP-1和SRE的转录活性第61-66页
第四章 讨论第66-67页
结语第67-68页
参考文献第68-77页
附录1:中英文缩写词简表第77-79页
附录2:攻读学位期间的学术论文和综述第79-80页
后记第80-81页

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