中文摘要 | 第1-6页 |
英文摘要 | 第6-8页 |
目录 | 第8-11页 |
缩略语表 | 第11-12页 |
前言 | 第12-16页 |
第一章:离体人皮肤成纤维细胞热损伤后转归的形态学观察 | 第16-32页 |
·材料与方法 | 第16-19页 |
·主要试剂与配制 | 第16页 |
·主要仪器 | 第16页 |
·细胞培养 | 第16-17页 |
·正常FB生长曲线测定 | 第17页 |
·细胞生存率测定 | 第17-18页 |
·透射电镜 | 第18页 |
·流式细胞仪 | 第18-19页 |
·统计学处理 | 第19页 |
·结果 | 第19-27页 |
·正常培养的成纤维细胞观察 | 第19页 |
·不同温度条件下FB细胞生存率比较 | 第19-20页 |
·同一温度不同时间FB生存率 | 第20-21页 |
·实验组FB观察 | 第21页 |
·实验组FB转归生长曲线 | 第21-22页 |
·电镜下观察实验组FB的转归 | 第22-26页 |
·实验组FB周期中的S期的变化 | 第26-27页 |
·讨论 | 第27-29页 |
结论 | 第29页 |
参考文献 | 第29-32页 |
第二章 离体人真皮成纤维细胞热损伤后部分功能变化 | 第32-50页 |
·材料与方法 | 第32-41页 |
·主要试剂和仪器 | 第32页 |
·反相高效液相色谱仪对热损伤后FB线粒体ATP测定 | 第32-33页 |
·细胞膜Na~+—K~+—ATP酶测定 | 第33-35页 |
·细胞外乳酸脱氢酶测定 | 第35-36页 |
·细胞Ⅰ型胶原酶联免疫吸附试验 | 第36页 |
·FGF2酶联免疫吸附试验 | 第36-37页 |
·Ⅰ型胶原逆转录聚合酶链反应 | 第37-41页 |
·统计学处理 | 第41页 |
·结果 | 第41-45页 |
·细胞线粒体ATP影响 | 第41-42页 |
·细胞膜损伤情况 | 第42页 |
·FB热损伤后胞膜Na~+—K~+—ATP酶变化 | 第42-43页 |
·FB热损伤FGF_2的影响 | 第43-44页 |
·FB热损伤后Ⅰ型胶原分泌变化 | 第44页 |
·热损伤对FBⅠ型胶原mRNA表达影响 | 第44-45页 |
·讨论 | 第45-47页 |
结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-50页 |
第三章 HSP90在离体人真皮成纤维细胞热损伤中的保护作用 | 第50-61页 |
·材料与方法 | 第50-56页 |
·主要试剂 | 第50页 |
·主要仪器 | 第50-51页 |
·热损伤后FB中HSP90表达的免疫荧光检测 | 第51页 |
·热损伤FB转归过程中HSP90在不同时相点的表达-western Blot | 第51-56页 |
·蛋白质的提取和制备 | 第51-52页 |
·蛋白样品的测量 | 第52页 |
·凝胶电泳 | 第52-54页 |
·电转移 | 第54页 |
·封闭膜上非特异性蛋白结合部位 | 第54-55页 |
·加入一抗 | 第55页 |
·加入二抗 | 第55页 |
·洗膜 | 第55页 |
·显影 | 第55-56页 |
·结果 | 第56-57页 |
·FB热损伤后HSP90免疫荧光检测 | 第56页 |
·FB热损伤后HSP90 Western Blot结果 | 第56-57页 |
·讨论 | 第57-59页 |
结论 | 第59页 |
参考文献 | 第59-61页 |
全文总结 | 第61-62页 |
展望 | 第62-63页 |
综述 | 第63-84页 |
参考文献 | 第84-88页 |
致谢 | 第88-89页 |
攻读博士学位期间主要的研究成果 | 第89页 |