中文摘要 | 第1-6页 |
英文摘要 | 第6-9页 |
目录 | 第9-13页 |
英文缩写注解 | 第13-14页 |
第一部分 pcDNA3.1(+)-p53质粒的提取及鉴定 | 第14-30页 |
一、前言 | 第14-15页 |
二、材料与方法 | 第15-21页 |
三、实验结果 | 第21-26页 |
1.质粒pcDNA3.1(+)-p53的酶切鉴定 | 第22页 |
2.质粒pcDNA3.1(+)-p53基因序列测定 | 第22-25页 |
3.质粒pEGFP-C1的酶切鉴定 | 第25页 |
4.紫外分光光度计测定质粒的纯度和含量 | 第25-26页 |
四、讨论 | 第26-29页 |
五、结论 | 第29-30页 |
第二部分 超顺磁性Fe_3O_4磁性纳米粒的制备及表征 | 第30-38页 |
一、前言 | 第30页 |
二、材料与方法 | 第30-32页 |
三、实验结果 | 第32-36页 |
1.制备产物Fe_3O_4纳米粒子形貌表征 | 第32-33页 |
2.制备产物Fe_3O_4纳米粒子透射电镜TEM分析 | 第33页 |
3.制备产物Fe_3O_4纳米粒子晶体分析 | 第33-34页 |
4.制备产物Fe_3O_4纳米粒子Zeta电位分析 | 第34-35页 |
5.不同干燥温度对产物结构和性能的影响 | 第35-36页 |
四、讨论 | 第36-37页 |
五、结论 | 第37-38页 |
第三部分 Fe_3O_4磁性纳米粒的氨基硅烷化修饰及与质粒DNA的连接 | 第38-53页 |
一、前言 | 第38页 |
二、材料与方法 | 第38-41页 |
三、实验结果 | 第41-50页 |
1.氨基硅烷化Fe_3O_4纳米粒子的表征结果 | 第41-47页 |
2.氨基硅烷化Fe_3O_4纳米粒子与DNA的结合效率测定结果 | 第47-48页 |
3.氨基硅烷化Fe_3O_4纳米粒子对DNA的保护实验结果 | 第48-49页 |
4.氨基硅烷化Fe_3O_4纳米粒基因转运体系的细胞毒性实验(MTT) | 第49-50页 |
四、讨论 | 第50-51页 |
五、结论 | 第51-53页 |
第四部分 氨基硅烷化Fe_3O_4磁性纳米介导的pcDNA3.1(+)-p53对人肝癌HepG2细胞的体外转染实验 | 第53-69页 |
一、前言 | 第53-54页 |
二、材料与方法 | 第54-61页 |
三、实验结果 | 第61-66页 |
1.氨基硅烷化Fe_3O_4磁性纳米粒介导pEGFP-C1质粒体外转染HepG2细胞实验 | 第61-62页 |
2.外加磁场对氨基硅烷化Fe_3O_4磁性纳米粒基因转导的影响 | 第62-63页 |
3.HepG2细胞体外转染目的治疗基因pcDNA3.1(+)-p53后RT-PCR检测结果 | 第63页 |
4.Western blot法检测各组细胞中p53蛋白的表达情况 | 第63-64页 |
5.p53基因对HepG2细胞生长速度的影响 | 第64-65页 |
6.p53基因对HepG2细胞集落形成的影响 | 第65页 |
7.流式细胞仪检测凋亡 | 第65-66页 |
四、讨论 | 第66-68页 |
五、结论 | 第68-69页 |
第五部分 氨基硅烷化Fe_3O_4磁性纳米介导的pcDNA3.1(+)-p53基因体内转染实验及结合热疗对裸鼠肝癌模型治疗的观测 | 第69-83页 |
一、前言 | 第69页 |
二、材料与方法 | 第69-74页 |
三、实验结果 | 第74-81页 |
1.裸鼠肝癌HepG2移植瘤模型的建立 | 第74页 |
2.局部热疗联合瘤内注射氨基硅烷化Fe_3O_4纳米粒-p53基因复合物治疗裸鼠肝癌HepG2移植瘤的疗效观察 | 第74-77页 |
3.肿瘤组织HE染色 | 第77-78页 |
4.氨基硅烷化Fe_3O_4纳米粒介导p53基因治疗组透射电镜观察图 | 第78页 |
5.各实验组VEGF表达的比较 | 第78-79页 |
6.各实验组CD34的表达及MVD的结果比较 | 第79-80页 |
7.VEGF与MVD的相关性分析 | 第80-81页 |
四、讨论 | 第81-82页 |
五、结论 | 第82-83页 |
参考文献 | 第83-90页 |
综述 | 第90-108页 |
致谢 | 第108-109页 |
攻读学位期间主要的研究成果 | 第109页 |