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高效转化生产γ-氨基丁酸重组大肠杆菌构建及其条件优化

摘要第1-4页
Abstract第4-7页
第一章 绪论第7-14页
   ·非蛋白质氨基酸第7页
   ·γ-氨基丁酸的化学结构及其理化性质第7页
   ·γ-氨基丁酸的生理功能及其应用第7-9页
     ·γ-氨基丁酸的生理功能第7-8页
     ·γ-氨基丁酸的应用第8-9页
   ·γ-氨基丁酸在生物体内的代谢途径第9-10页
   ·γ-氨基丁酸的制备方法第10页
     ·化学合成法第10页
     ·植物富集法第10页
     ·微生物合成法第10页
   ·国内外研究进展第10-12页
     ·微生物法制备γ-氨基丁酸第10-12页
     ·谷氨酸脱羧酶基因的克隆表达第12页
     ·乳酸菌谷氨酸脱羧酶酶学性质研究第12页
   ·本论文的立题意义及主要研究内容第12-14页
第二章 材料与方法第14-22页
   ·实验材料第14-15页
     ·菌株与质粒第14页
     ·主要试剂第14页
     ·实验仪器第14-15页
     ·培养基及全细胞转化体系第15页
   ·实验方法第15-22页
     ·重组质粒pET28a-lpgad 的构建第15-16页
     ·重组大肠杆菌E.coli BL21/pET28a-lpgad 的构建及其诱导表达第16-17页
     ·重组大肠杆菌E.coli BL21/pET28a-lpgad 转化产GABA 初步研究第17页
     ·重组大肠杆菌E.coli BL21/pET28a-lpgad 产酶培养基的优化第17-19页
     ·重组大肠杆菌E.coli BL21/pET28a-lpgad 培养条件的优化第19页
     ·GAD 酶学性质及全细胞转化条件建立第19-20页
     ·5 L 发酵罐中重组大肠杆菌E.coli BL21/pET28a-lpgad 发酵研究第20页
     ·5 L 发酵罐中全细胞转化L-谷氨酸产GABA 研究第20-21页
     ·分析方法第21-22页
第三章 结果与讨论第22-49页
   ·重组大肠杆菌 BL21/pET28a-lpgad 的构建及其诱导表达研究第22-27页
     ·植物乳杆菌谷氨酸脱羧酶基因lpgad 克隆与分析第22-23页
     ·重组大肠杆菌 BL21/pET28a-lpgad 的构建第23-24页
     ·重组谷氨酸脱羧酶诱导表达情况研究第24-27页
     ·摇瓶水平重组大肠杆菌产GABA 初步研究第27页
   ·重组大肠杆菌产酶培养基及培养条件的建立与优化第27-36页
     ·摇瓶水平重组大肠杆菌产酶培养基的优化研究第27-33页
     ·摇瓶水平重组大肠杆菌产酶条件的优化研究第33-36页
     ·摇瓶培养菌体及产酶过程分析第36页
   ·酶学性质及全细胞转化条件优化第36-40页
     ·重组谷氨酸脱羧酶(GAD)的纯化第36-37页
     ·重组谷氨酸脱羧酶(GAD) 酶学性质研究第37-39页
     ·重组菌摇瓶转化实验第39-40页
   ·5 L 发酵罐培养菌体及产酶研究第40-44页
     ·5 L 发酵罐分批培养条件优化第40-43页
     ·5 L 发酵罐中补料分批培养对重组菌生长及其产GAD 酶的影响第43-44页
   ·5 L 发酵罐中全细胞转化L-谷氨酸产GABA 研究第44-49页
     ·菌体浓度对重组菌转化L-谷氨酸产GABA 效率的影响第44-45页
     ·搅拌转速对重组菌转化L-谷氨酸产GABA 的影响第45页
     ·底物L-谷氨酸添加量对重组菌转化产GABA 效率的影响第45-46页
     ·底物批次流加对重组菌转化L-谷氨酸产GABA 的影响第46-47页
     ·5 L 发酵罐全细胞转化L-谷氨酸产GABA 研究第47-48页
     ·菌体重复利用次数对重组菌转化L-谷氨酸产GABA 的影响第48-49页
主要结论与展望第49-51页
 主要结论第49-50页
 展望第50-51页
致谢第51-52页
参考文献第52-58页
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第58页

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