| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-29页 |
| ·淀粉酒精的研究现状 | 第13-17页 |
| ·淀粉的预处理 | 第14-15页 |
| ·淀粉酒精发酵研究现状 | 第15-16页 |
| ·淀粉酒精目前存在的问题 | 第16-17页 |
| ·固定化酶 | 第17-24页 |
| ·固定化酶的研究方法概述 | 第17页 |
| ·固定化酶的传统方法 | 第17-19页 |
| ·组合固定化 | 第19-20页 |
| ·无载体固定化 | 第20-22页 |
| ·固定化酶的性质 | 第22-24页 |
| ·保护剂在固定化酶上的应用 | 第24页 |
| ·糖化酶和α-淀粉酶的固定 | 第24-25页 |
| ·糖化酶的固定化 | 第24-25页 |
| ·α-淀粉酶的固定研究 | 第25页 |
| ·酵母表面展示 | 第25-27页 |
| ·酿酒酵母的展示系统及应用 | 第25-26页 |
| ·展示技术与乙醇的生产 | 第26-27页 |
| ·本论文研究目的和内容 | 第27-29页 |
| 第二章 交联α-淀粉酶聚集体的制备 | 第29-48页 |
| ·引言 | 第29页 |
| ·材料与方法 | 第29-35页 |
| ·实验材料 | 第29-30页 |
| ·α-淀粉酶的纯化 | 第30-33页 |
| ·麦芽糖标准曲线制作 | 第33页 |
| ·α-淀粉酶的固定化 | 第33页 |
| ·α-淀粉酶的活力测定 | 第33-34页 |
| ·交联α-淀粉酶的活力测定 | 第34页 |
| ·固定化α-淀粉酶的数据分析及计算 | 第34-35页 |
| ·结果与讨论 | 第35-47页 |
| ·标准曲线 | 第35页 |
| ·α -淀粉酶的纯化 | 第35-37页 |
| ·用于固定化的α-淀粉酶的粗纯化 | 第37页 |
| ·沉淀剂种类及饱和度对酶活的影响 | 第37-38页 |
| ·最适固定化条件研究 | 第38-43页 |
| ·保护剂对CLEA的影响 | 第43-46页 |
| ·交联剂与保护剂在交联过程中对酶分子的影响 | 第46-47页 |
| ·小结 | 第47-48页 |
| 第三章 交联α-淀粉酶聚集体性质研究 | 第48-69页 |
| ·引言 | 第48-49页 |
| ·材料与方法 | 第49-51页 |
| ·实验材料 | 第49页 |
| ·温度对CLEA-S、CLEA-BSA、CLEA和游离酶的活性影响 | 第49页 |
| ·pH值对CLEA-S、CLEA-BSA、CLEA和游离酶的活性影响 | 第49-50页 |
| ·金属离子对CLEA-S、CLEA-BSA、CLEA和游离酶的活性影响 | 第50页 |
| ·固定化酶和原酶液的动力学 | 第50-51页 |
| ·CLEA-S、CLEA-BSA、CLEA的热稳定性研究 | 第51页 |
| ·CLEA-S、CLEA-BSA、CLEA的SEM研究 | 第51页 |
| ·试验结果与讨论 | 第51-68页 |
| ·温度对酶活的影响 | 第51-52页 |
| ·pH对酶活和稳定性的影响 | 第52-54页 |
| ·金属离子对酶活的影响 | 第54-55页 |
| ·固定化酶及游离酶动力学分析 | 第55-60页 |
| ·固定化的α-淀粉酶和游离酶的热稳定性 | 第60-64页 |
| ·储存稳定性 | 第64页 |
| ·交联酶聚集体的重复使用性 | 第64-66页 |
| ·固定化酶的SEM结果分析 | 第66-68页 |
| ·小结 | 第68-69页 |
| 第四章 交联糖化酶聚集体的制备 | 第69-84页 |
| ·引言 | 第69页 |
| ·材料与方法 | 第69-73页 |
| ·实验材料 | 第69-70页 |
| ·糖化酶的初纯化 | 第70页 |
| ·葡萄糖标准曲线制作 | 第70-71页 |
| ·糖化酶的固定化 | 第71页 |
| ·添加保护剂是糖化酶的固定化 | 第71-72页 |
| ·糖化酶的活力测定 | 第72页 |
| ·交联糖化酶的活力测定 | 第72页 |
| ·蛋白质含量测定 | 第72页 |
| ·固定化糖化酶的数据分析及计算 | 第72-73页 |
| ·实验结果与讨论 | 第73-82页 |
| ·葡萄糖标准曲线 | 第73-74页 |
| ·糖化酶的初纯化 | 第74页 |
| ·聚集体条件的优化 | 第74-80页 |
| ·保护剂对交联糖化酶聚集体的影响 | 第80-82页 |
| ·小结 | 第82-84页 |
| 第五章 交联糖化酶聚集体的酶学性质研究 | 第84-98页 |
| ·引言 | 第84页 |
| ·材料与方法 | 第84-87页 |
| ·实验材料 | 第84-85页 |
| ·温度对交联糖化酶聚集体的影响 | 第85页 |
| ·pH值对交联糖化酶聚集体和游离酶的活性影响 | 第85页 |
| ·金属离子对CLGA-D、CLGA-BSA、CLGA和游离酶的活性影响 | 第85-86页 |
| ·固定化酶和原酶液的动力学 | 第86页 |
| ·CLGA-D、CLGA-BSA、CLGA的热稳定性研究 | 第86-87页 |
| ·结果与讨论 | 第87-97页 |
| ·温度对酶活的影响 | 第87-88页 |
| ·最适pH值 | 第88-89页 |
| ·金属离子对交联糖化酶聚集体和游离糖化酶的影响 | 第89-90页 |
| ·固定化和游离糖化酶的动力学分析 | 第90-93页 |
| ·固定化及游离糖化酶的热稳定性 | 第93-95页 |
| ·固定化酶的储存稳定性 | 第95-96页 |
| ·固定化酶的重复使用性 | 第96-97页 |
| ·小结 | 第97-98页 |
| 第六章 CLEA-S和CLGA-D的同步糖化发酵研究 | 第98-115页 |
| ·引言 | 第98-99页 |
| ·材料与方法 | 第99-104页 |
| ·实验材料 | 第99页 |
| ·实验方法 | 第99-100页 |
| ·酒精浓度测定 | 第100-101页 |
| ·酿酒酵母1912菌株生长曲线的测定 | 第101页 |
| ·总糖含量测定 | 第101页 |
| ·菌体量测定 | 第101-102页 |
| ·酸碱度 | 第102页 |
| ·20%淀粉溶液的双酶解实验 | 第102页 |
| ·15%淀粉溶液同步糖化实验 | 第102页 |
| ·淀粉溶液的间歇(JX)加酶同步发酵 | 第102-103页 |
| ·淀粉溶液的同时(TS)加酶同步发酵 | 第103页 |
| ·TLC检测实验 | 第103页 |
| ·计算方法 | 第103-104页 |
| ·结果与讨论 | 第104-113页 |
| ·葡萄糖标准曲线 | 第104-105页 |
| ·酒精标准曲线 | 第105页 |
| ·15%的淀粉的酶解 | 第105-107页 |
| ·20%淀粉分步水解 | 第107-108页 |
| ·Saccharomyces cerevisiae 1912 37℃生长曲线 | 第108-109页 |
| ·分步(J)水解发酵 | 第109-111页 |
| ·同步（TS)水解发酵 | 第111-113页 |
| ·本章小结 | 第113-115页 |
| 第七章 糖化酶的酵母表面展示系统初步构建 | 第115-131页 |
| ·引言 | 第115-116页 |
| ·材料与方法 | 第116-118页 |
| ·质粒与菌株 | 第116页 |
| ·实验仪器与设备 | 第116-117页 |
| ·主要试剂及药品 | 第117页 |
| ·培养基与溶液的配制 | 第117-118页 |
| ·实验的基本流程 | 第118页 |
| ·实验方法 | 第118-125页 |
| ·酵母全基因组提取 | 第118-119页 |
| ·黑曲霉全基因组提取 | 第119-120页 |
| ·pET28a质粒的构建 | 第120-125页 |
| ·结果与讨论 | 第125-130页 |
| ·目的片段的扩增结果 | 第125-126页 |
| ·T载体连接转化及测序 | 第126页 |
| ·pET28a(+)的质粒构建 | 第126-128页 |
| ·pPIC9K的糖化酶展示载体的初步构建 | 第128-129页 |
| ·NS和GLA的展示系统的初步构建 | 第129-130页 |
| ·本章小结 | 第130-131页 |
| 结论 | 第131-133页 |
| 附录 | 第133-134页 |
| 附录1 论文中使用的缩写及中英文对照 | 第133-134页 |
| 参考文献 | 第134-141页 |
| 硕士期间发表的文章和参加的学术活动 | 第141-142页 |
| 致谢 | 第142-143页 |
| 附件 | 第143-149页 |
