| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 引言 | 第11-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-21页 |
| ·钾素营养研究概况 | 第12-14页 |
| ·钾离子的作用 | 第12-13页 |
| ·我国土壤的钾营养现状及钾肥供应情况 | 第13页 |
| ·植物钾营养研究进展 | 第13-14页 |
| ·钾转运蛋白研究概况 | 第14-16页 |
| ·植物高亲和K~+转运蛋白HAK/KUP/KT基因家族的表达调控 | 第16-17页 |
| ·植物启动子的研究概况 | 第17-19页 |
| ·盐角草简介 | 第19页 |
| ·研究目的及意义 | 第19-21页 |
| 2 SeHAK1实时定量方法的建立 | 第21-30页 |
| ·实验材料与仪器 | 第21页 |
| ·实验材料 | 第21页 |
| ·实验试剂 | 第21页 |
| ·主要仪器 | 第21页 |
| ·实验方法 | 第21-24页 |
| ·内参基因eEF和actin片段的克隆 | 第21-23页 |
| ·Real-time PCR引物设计 | 第23页 |
| ·盐角草总RNA提取及cDNA的获得 | 第23-24页 |
| ·标准品的制备及扩增效率评价 | 第24页 |
| ·稳定性评价 | 第24页 |
| ·结果与分析 | 第24-28页 |
| ·盐角草内参eEF片段的克隆 | 第24-25页 |
| ·盐角草内参actin片段的克隆 | 第25页 |
| ·盐角草总RNA提取 | 第25页 |
| ·标准曲线和熔解曲线的分析 | 第25-28页 |
| ·反应体系稳定性评价 | 第28页 |
| ·讨论 | 第28-29页 |
| ·小结 | 第29-30页 |
| 3 SeHAK1的表达调控分析 | 第30-42页 |
| ·实验材料和仪器 | 第30页 |
| ·实验材料 | 第30页 |
| ·实验试剂和仪器 | 第30页 |
| ·实验方法 | 第30-32页 |
| ·结果与分析 | 第32-38页 |
| ·SeHAK1在不同的组织和发育期的表达分析 | 第32-33页 |
| ·盐胁迫对SeHAK1表达的影响 | 第33-36页 |
| ·K~+饥饿对SeHAK1表达的影响 | 第36-37页 |
| ·NH_4~+对SeHAK1表达的影响 | 第37页 |
| ·植物激素对SeHAK1表达的影响 | 第37-38页 |
| ·其他非生物胁迫处理对SeHAK1表达的影响 | 第38页 |
| ·讨论 | 第38-41页 |
| ·小结 | 第41-42页 |
| 4 SeHAK1上游启动子的克隆及序列分析 | 第42-58页 |
| ·实验材料与仪器 | 第42-43页 |
| ·实验材料 | 第42页 |
| ·实验试剂 | 第42页 |
| ·主要仪器 | 第42-43页 |
| ·实验方法 | 第43-52页 |
| ·锚定PCR法克隆SeHAK1启动子序列 | 第43-51页 |
| ·SeHAK1启动子序列分析 | 第51-52页 |
| ·结果与分析 | 第52-56页 |
| ·SeHAK1上游启动子序列的克隆 | 第52-56页 |
| ·SeHAK1启动子序列分析 | 第56页 |
| ·讨论 | 第56-57页 |
| ·小结 | 第57-58页 |
| 5 SeHAK1::GUS启动子植物表达载体的构建及活性检测 | 第58-69页 |
| ·实验材料和试剂 | 第58页 |
| ·实验材料 | 第58页 |
| ·实验试剂 | 第58页 |
| ·实验方法 | 第58-63页 |
| ·含SeHAK1启动子植物表达载体的构建 | 第58-60页 |
| ·工程菌的构建 | 第60-61页 |
| ·含SeHAK1::GUS转基因烟草的获得 | 第61-62页 |
| ·转化烟草的分子检测 | 第62-63页 |
| ·转化烟草组织化学染色 | 第63页 |
| ·结果与分析 | 第63-68页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第63-64页 |
| ·SeHAK1::GUS转化烟草的获得 | 第64-67页 |
| ·转基因烟草的GUS组织化学染色 | 第67-68页 |
| ·讨论 | 第68页 |
| ·小结 | 第68-69页 |
| 结论 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-74页 |
| 附录A 缩略语及培养基配方 | 第74-76页 |
| 附录B 电泳用DNA Marker | 第76-77页 |
| 附录C 论文中所用的质粒图谱 | 第77-78页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |