摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-12页 |
文献综述 | 第12-22页 |
1 朱砂叶螨的研究现状 | 第12-15页 |
·防治治理 | 第12-13页 |
·日益突出的抗性问题 | 第13-14页 |
·阿维菌素抗性害虫、害螨适合度研究 | 第14-15页 |
2.阿维菌素及其抗药性研究进展 | 第15-16页 |
·阿维菌素的作用机制 | 第15页 |
·害虫对阿维菌素的抗药性 | 第15-16页 |
3.GABA与GABA受体研究进展 | 第16-20页 |
·γ-氨基丁酸生物学功能 | 第17页 |
·γ-氨基丁酸受体系统概述 | 第17-20页 |
4.高效液相色谱测定GABA含量 | 第20-22页 |
·氨基酸的HPLC测定 | 第20-21页 |
·异硫氰酸苯酯(衍生剂) | 第21-22页 |
前言 | 第22-24页 |
第一章 朱砂叶螨GABA含量测定与行为抗性观察 | 第24-38页 |
第一节 高效液相色谱法测定朱砂叶螨GABA含量 | 第24-32页 |
1 材料与方法 | 第24-26页 |
·供试朱砂叶螨 | 第24-25页 |
·仪器和试剂 | 第25页 |
·标准溶液及样品的制备 | 第25页 |
·GABA测定 | 第25-26页 |
·数据分析 | 第26页 |
2 结果 | 第26-30页 |
·色谱行为与GABA标准曲线 | 第26-28页 |
·朱砂叶螨抗性品系GABA含量检测与比较 | 第28-29页 |
·阿维菌素诱导后朱砂叶螨SS和AR品系GABA含量变化 | 第29-30页 |
·耐高温品系GABA含量检测 | 第30页 |
3 讨论 | 第30-32页 |
第二节 朱砂叶螨爬行速度测定 | 第32-36页 |
1 材料与方法 | 第32页 |
·供试朱砂叶螨 | 第32页 |
·测定方法 | 第32页 |
2 朱砂叶螨行为学观察结果 | 第32-34页 |
·不同品系爬行速度测定 | 第32-33页 |
·阿维菌素诱导朱砂叶螨敏感,抗性品系后爬行速度比较 | 第33页 |
·耐热品系爬行速度观察 | 第33-34页 |
3 讨论 | 第34-36页 |
第三节 GABA介导朱砂叶螨对阿维菌素和高温的抗性讨论 | 第36-38页 |
第二章 朱砂叶螨GABA受体基因cDNA全长克隆及分析 | 第38-64页 |
1 材料与方法 | 第38-48页 |
·供试朱砂叶螨 | 第38页 |
·主要试剂和仪器 | 第38-39页 |
·常用储备液及培养基的配制 | 第39页 |
·总RNA的提取 | 第39-40页 |
·GABAR cDNA片段扩增 | 第40-44页 |
·采用3'RACE技术扩增GABAR 3'端序列 | 第44-46页 |
·5'RACE扩增 | 第46-47页 |
·朱砂叶螨GABAR基因全序列测通验证 | 第47-48页 |
·朱砂叶螨GABA受体基因(目的基因)全长cDNA序列分析 | 第48页 |
2 结果与分析 | 第48-61页 |
·朱砂叶螨总RNA的提取 | 第48-49页 |
·GABA受体片段扩增结果 | 第49-50页 |
·GABAR基因cDNA 3'RACE结果 | 第50-51页 |
·5'RACE的扩增结果 | 第51-52页 |
·GABA受体全长cDNA序列 | 第52-54页 |
·朱砂叶螨GABA受体α亚基生物信息学分析 | 第54-61页 |
3 小结与讨论 | 第61-64页 |
第三章 朱砂叶螨体内GABA受体表达差异 | 第64-72页 |
1 材料与方法 | 第64-66页 |
·供试朱砂叶螨 | 第64页 |
·主要试剂及仪器 | 第64页 |
·引物设计及合成 | 第64页 |
·无DNA污染的总RNA提取及其单链cDNA的合成 | 第64-65页 |
·real-time PCR条件的优化 | 第65页 |
·熔解曲线分析 | 第65页 |
·标准品的制备及标准曲线的建立 | 第65-66页 |
·朱砂叶螨不同品系及阿维菌素,高温诱导后GABA受体mRNA定量检测 | 第66页 |
·数据分析 | 第66页 |
2 结果与分析 | 第66-70页 |
·朱砂叶螨无DNA污染的总RNA的抽提 | 第66-67页 |
·标准曲线制作 | 第67-69页 |
·朱砂叶螨阿维菌素抗性品系GABA受体表达量的差异 | 第69页 |
·朱砂叶螨耐高温品系GABA受体表达量的差异 | 第69-70页 |
3 小结与讨论 | 第70-72页 |
主要结论与展望 | 第72-74页 |
1 主要结论 | 第72-73页 |
2 创新点 | 第73页 |
3 展望 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-86页 |
附录 | 第86-88页 |
硕士研究生期间发表的论文 | 第88-90页 |
致谢 | 第90页 |