| 摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-19页 |
| 縮略词表 | 第19-20页 |
| 第一章 绪论 | 第20-45页 |
| ·乳酸菌表达膜蛋白 | 第21-34页 |
| ·膜蛋白 | 第21-23页 |
| ·膜蛋白的异源表达 | 第23-26页 |
| ·膜蛋白在乳酸菌中的异源表达 | 第26-30页 |
| ·本论文几种待表达膜蛋白的背景与功能 | 第30-34页 |
| ·乳酸菌的自溶 | 第34-45页 |
| ·乳酸菌的自溶现象 | 第34-38页 |
| ·肽聚糖水解酶 | 第38-42页 |
| ·自溶的应用 | 第42-45页 |
| 第二章 绿色巴夫藻多不饱和脂肪酸合成相关功能基因的克隆与表达 | 第45-62页 |
| ·材料方法 | 第47-52页 |
| ·菌株和生长条件 | 第47页 |
| ·试剂 | 第47页 |
| ·主要仪器 | 第47-48页 |
| ·Δ4与Δ5去饱和酶全长基因的克隆 | 第48-52页 |
| ·结果 | 第52-59页 |
| ·Δ5去饱和酶(pkjDes5)全基因的克隆与序列分析 | 第52-54页 |
| ·Δ4去饱和酶基因全长的克隆 | 第54-55页 |
| ·pkjDes4的序列分析 | 第55-57页 |
| ·pkjDes4的过量表达 | 第57-59页 |
| ·讨论 | 第59-62页 |
| 第三章 乳酸乳球菌高效膜蛋白表达载体的构建与应用 | 第62-79页 |
| ·材料与方法 | 第63-66页 |
| ·菌株与培养条件 | 第63-64页 |
| ·试剂 | 第64页 |
| ·乳杆菌基因组DNA的提取 | 第64页 |
| ·质粒的构建 | 第64-65页 |
| ·膜蛋白pkjDes4与pkjLi在乳酸乳球菌中的过量表达与活性检测 | 第65-66页 |
| ·荧光蛋白检测 | 第66页 |
| ·结果 | 第66-76页 |
| ·pNM110载体的构建与Mistic在乳酸乳球菌中的功能 | 第66-69页 |
| ·pkjDes4在乳酸乳球菌中的过量表达 | 第69-71页 |
| ·嗜酸乳杆菌亚油酸异构酶编码基因的克隆与序列分析 | 第71-74页 |
| ·pkjLi在乳酸乳球菌中的过量表达与功能测定 | 第74-76页 |
| ·讨论 | 第76-79页 |
| 第四章 乳酸菌自溶性质的测定 | 第79-92页 |
| ·材料与方法 | 第80-82页 |
| ·菌株与生长条件 | 第80页 |
| ·全细胞在缓冲液中的自溶 | 第80页 |
| ·蛋白提取与复性SDS-PAGE电泳 | 第80-81页 |
| ·还原糖含量的测定 | 第81页 |
| ·生长抑制剂诱导乳酸乳球菌自溶的测定 | 第81-82页 |
| ·结果 | 第82-90页 |
| ·乳酸菌的筛选 | 第82-83页 |
| ·乳酸菌自溶能力的测定 | 第83-85页 |
| ·生长抑制剂对乳酸乳球菌自溶的诱导 | 第85-90页 |
| ·讨论 | 第90-92页 |
| 第五章 干酪乳杆菌的肽聚糖水解酶体系：AclB的鉴别与生物特征 | 第92-111页 |
| ·材料与方法 | 第93-97页 |
| ·菌株、质粒与生长条件 | 第93页 |
| ·载体构建与遗传操作 | 第93-95页 |
| ·荧光定量PCR | 第95页 |
| ·His标签蛋白的表达纯化 | 第95-96页 |
| ·AclB基因的敲除和重组菌的性质测定 | 第96-97页 |
| ·AclB的酶活性测定 | 第97页 |
| ·结果 | 第97-108页 |
| ·干酪乳杆菌的自溶 | 第97-99页 |
| ·肽聚糖水解酶基因的克隆与表达量分析 | 第99-101页 |
| ·AclA、AclB的过表达与纯化 | 第101-103页 |
| ·AclB的酶活 | 第103-105页 |
| ·AclB敲除菌的生理变化 | 第105-108页 |
| ·讨论 | 第108-111页 |
| 第六章 干酪乳杆菌可控裂解体系的建立及在奶酪生产中的潜在应用 | 第111-126页 |
| ·材料与方法 | 第112-115页 |
| ·菌株与培养条件 | 第112-113页 |
| ·干酪乳杆菌的转化 | 第113页 |
| ·重组载体的构建 | 第113-114页 |
| ·nisin的诱导、样品准备与酶谱分析 | 第114-115页 |
| ·实验室规模的奶酪模拟实验 | 第115页 |
| ·结果 | 第115-124页 |
| ·干酪乳杆菌中nisin控制的自溶体系的构建 | 第115-117页 |
| ·AcmA的诱导表达与干酪乳杆菌的裂解 | 第117-119页 |
| ·AtlA的诱导表达与干酪乳杆菌的裂解 | 第119-121页 |
| ·AtlA对模型奶酪系统的定向裂解 | 第121-124页 |
| ·讨论 | 第124-126页 |
| 参考文献 | 第126-136页 |
| 致谢 | 第136-137页 |
| 攻读博士论文期间发表论文 | 第137-138页 |
| 外文写作一 | 第138-153页 |
| 外文写作二 | 第153-170页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第170页 |
