中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-25页 |
1 轮状病毒病原学 | 第11-15页 |
·轮状病毒的分类及形态 | 第11-12页 |
·轮状病毒的理化性质 | 第12-13页 |
·轮状病毒基因编码的蛋白质 | 第13-15页 |
2 A组轮状病毒的危害 | 第15-16页 |
3 轮状病毒的血清型与基因型 | 第16-17页 |
4 轮状病毒疫苗的研制现状 | 第17-20页 |
·单价疫苗的研制 | 第17-18页 |
·多价疫苗的研制 | 第18页 |
·口服天然轮状病毒弱毒株和自然发生的人-动物重配毒株的应用 | 第18-19页 |
·其它疫苗的研究进展 | 第19-20页 |
5 轮状病毒的反向遗传学研究 | 第20-22页 |
·反向遗传学系统的建立 | 第20-21页 |
·呼肠孤病毒(Reovirus)反向遗传学操作技术的研究现状 | 第21-22页 |
6 本实验室的研究思路 | 第22-23页 |
7 本研究的目的和意义 | 第23-25页 |
第二章 羊轮状病毒LLR增殖和纯化 | 第25-33页 |
1 实验材料 | 第25页 |
·细胞 | 第25页 |
·病毒 | 第25页 |
·主要试剂 | 第25页 |
·主要仪器 | 第25页 |
2 方法 | 第25-28页 |
·羊轮状病毒LLR培养及增殖 | 第25-26页 |
·羊轮状病毒LLR免疫胶体金检测 | 第26页 |
·羊轮状病毒LLR聚丙烯酰胺电泳(PAGE)检测 | 第26-27页 |
·羊轮状病毒LLR效价测定 | 第27页 |
·羊轮状病毒LLR纯化 | 第27页 |
·羊轮状病毒LLR蛋白SDS-PAGE电泳 | 第27-28页 |
3 结果 | 第28-32页 |
·羊轮状病毒LLR在MA104细胞上的CPE | 第28页 |
·羊轮状病毒LLR免疫胶体金检测 | 第28-29页 |
·羊轮状病毒LLR dsRNA的PAGE图谱 | 第29页 |
·羊轮状病毒LLR效价 | 第29-30页 |
·羊轮状病毒LLR梯度离心及负染电镜 | 第30-31页 |
·羊轮状病毒LLR蛋白SDS-PAGE图谱 | 第31-32页 |
4 讨论 | 第32-33页 |
第三章 羊轮状病毒LLR VP4单克隆抗体的制备 | 第33-48页 |
1 实验材料 | 第33-34页 |
·细胞 | 第33页 |
·实验动物 | 第33页 |
·主要试剂 | 第33页 |
·主要仪器 | 第33-34页 |
2 方法 | 第34-39页 |
·兔抗LLR血清的制备 | 第34页 |
·Balb/c鼠免疫 | 第34页 |
·Balb/c鼠背瘤 | 第34页 |
·饲养细胞 | 第34页 |
·骨髓瘤细胞制备 | 第34-35页 |
·免疫脾细胞制备 | 第35页 |
·细胞融合 | 第35页 |
·抗体筛选方法 | 第35-36页 |
·杂交瘤细胞克隆 | 第36页 |
·单克隆抗体制备 | 第36-37页 |
·单克隆抗体染色体分析 | 第37页 |
·单克隆抗体亚类鉴定 | 第37-38页 |
·Dot-ELISA | 第38页 |
·Western-blot | 第38-39页 |
·中和实验(细胞微量板法) | 第39页 |
3 结果 | 第39-45页 |
·抗原最适包被浓度的测定 | 第39-40页 |
·细胞融合及杂交瘤细胞建株 | 第40-41页 |
·杂交瘤细胞染色体特征 | 第41-42页 |
·单克隆抗体亚类及腹水效价 | 第42-43页 |
·Dot-ELISA结果 | 第43页 |
·Western-blot鉴定 | 第43-44页 |
·中和实验结果 | 第44-45页 |
4 讨论 | 第45-48页 |
·抗体筛选方法的建立 | 第46页 |
·融合时脾细胞与骨髓瘤细胞的比例 | 第46页 |
·每孔接种细胞数 | 第46-47页 |
·本研究的意义 | 第47-48页 |
结论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-56页 |
在校期间发表的和待发的论文、科研成果等 | 第56-57页 |
致谢 | 第57页 |