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蜱唾液腺中二个免疫抑制蛋白的基因克隆、表达和RNA干扰研究

摘要第1-7页
Abstract第7-14页
第1章 引言第14-19页
   ·概述第14-15页
   ·蜱对宿主免疫的调节第15-17页
   ·免疫抑制蛋白 P36 的研究进展第17-18页
   ·本研究的基础第18-19页
第2章 材料第19-29页
   ·主要仪器第19-20页
   ·实验材料第20页
   ·主要试剂第20页
   ·主要试剂配置第20-29页
第3章 镰形扇头蜱免疫抑制蛋白 RH36 的克隆、表达和 RNA 干扰研究第29-66页
   ·方法第29-46页
     ·镰形扇头蜱的实验室饲养第29页
     ·镰形扇头蜱唾液腺总 RNA 的提取及鉴定第29-30页
     ·目的基因 EST 序列的获取第30页
     ·目的基因5’端序列的克隆第30-33页
     ·目的基因全长序列的克隆第33-36页
     ·目的蛋白的原核表达第36-38页
     ·融合蛋白的纯化第38-40页
     ·Western blot第40-42页
     ·RNA 干扰第42-46页
   ·结果和分析第46-63页
     ·总 RNA 的提取第46页
     ·EST 序列获取及序列分析第46-47页
     ·目的基因5`端的克隆第47-49页
     ·目的基因全长序列的克隆及其分析第49-53页
     ·重组蛋白的原核表达第53-56页
     ·重组蛋白浓度的测定第56页
     ·Western blot 结果第56页
     ·RNA 干扰第56-63页
   ·讨论第63-66页
     ·目的基因全长序列的分析第63页
     ·蛋白原核表达第63页
     ·蛋白免疫原性分析第63-64页
     ·RNAi 对蜱唾液腺内 P36 编码基因表达的影响第64页
     ·免疫抑制蛋白对蜱上体、饱血、产卵等的影响第64-66页
第4章 亚洲璃眼蜱免疫抑制蛋白 HA36 的克隆与表达第66-89页
   ·方法第66-76页
     ·亚洲璃眼蜱的实验室饲养第66页
     ·亚洲璃眼蜱唾液腺总 RNA 的提取及鉴定第66页
     ·目的基因 EST 序列的获取第66页
     ·目的基因5’端序列的克隆第66-70页
     ·目的基因全长序列的克隆第70-71页
     ·RT-PCR 分析 P36 基因的表达特点及分布情况第71-72页
     ·目的蛋白的原核表达第72-74页
     ·可溶性标签蛋白 GST 的纯化第74页
     ·Western blot第74-76页
   ·结果和分析第76-88页
     ·总 RNA 的提取第76页
     ·EST 序列获取及序列分析第76页
     ·目的基因5`端的克隆第76-78页
     ·目的基因3`端的克隆第78-79页
     ·目的基因全长序列的克隆及其分析第79-84页
     ·RT-PCR 分析该基因在成蜱饱血前后唾液腺中的表达情况..第84-85页
     ·重组质粒的原核表达第85-87页
     ·Western blot 结果第87-88页
   ·讨论第88-89页
     ·目的基因全长序列的分析第88页
     ·P36 编码基因在成蜱饱血前后唾液腺中的表达情况第88页
     ·蛋白原核表达第88-89页
第5章 全文结论第89-90页
参考文献第90-94页
致谢第94-95页
作者简历第95页

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