| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 第1章 引言 | 第9-25页 |
| ·细胞色素C 的基本知识 | 第9-15页 |
| ·细胞色素C | 第9页 |
| ·细胞色素C 的功能 | 第9-12页 |
| ·细胞色素C 的保守性 | 第12-13页 |
| ·细胞色素C 轴向配位键 | 第13-14页 |
| ·酵母细胞色素C | 第14-15页 |
| ·细胞色素C 致死突变体蛋白 | 第15页 |
| ·运用点突变技术研究细胞色素C | 第15-17页 |
| ·定点突变技术 | 第15-16页 |
| ·点突变研究细胞色素C 及其现状 | 第16-17页 |
| ·突变位点的选择 | 第17页 |
| ·突变蛋白的表达体系介绍 | 第17-20页 |
| ·YEp13/GM-3C-2 表达体系 | 第17-18页 |
| ·pBTR1/BL21 表达体系 | 第18-19页 |
| ·两种表达体系的优劣性比较 | 第19-20页 |
| ·细胞色素C 的动力学研究 | 第20-23页 |
| ·细胞色素C 的紫外-可见光吸收谱 | 第20-21页 |
| ·自氧化反应 | 第21页 |
| ·与维生素C 的反应 | 第21-22页 |
| ·与CcP 的反应 | 第22-23页 |
| ·关于本课题的研究 | 第23-25页 |
| 第2章 突变体蛋白的制备 | 第25-45页 |
| ·实验仪器设备 | 第25-26页 |
| ·主要实验材料与试剂 | 第26页 |
| ·重组质粒的构建 | 第26-30页 |
| ·提取含有突变基因的质粒 | 第26-27页 |
| ·PCR 引物设计 | 第27页 |
| ·PCR 扩增目的基因 | 第27-28页 |
| ·PCR 产物的酶切及回收纯化 | 第28-29页 |
| ·空白载体质粒的提取 | 第29页 |
| ·载体质粒的酶切、回收与去磷酸化 | 第29-30页 |
| ·载体与目的基因连接 | 第30页 |
| ·突变体蛋白的表达 | 第30-34页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制作与重组质粒的转化 | 第30-31页 |
| ·阳性单克隆菌落的检验 | 第31-32页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定与测序 | 第32页 |
| ·蛋白的最佳表达条件摸索 | 第32-33页 |
| ·收菌 | 第33页 |
| ·超声破菌 | 第33-34页 |
| ·蛋白的提取与纯化 | 第34-38页 |
| ·硫胺沉淀 | 第34-36页 |
| ·透析 | 第36页 |
| ·超滤 | 第36-37页 |
| ·阳离子交换 | 第37-38页 |
| ·SDS-PAGE 检测突变体蛋白 | 第38页 |
| ·SDS-PAGE 胶的制备 | 第38页 |
| ·胶的染色与脱色 | 第38页 |
| ·实验结果 | 第38-45页 |
| ·含有目的基因质粒及载体质粒的提取 | 第38-39页 |
| ·PCR 产物与空白载体质粒酶切后产物 | 第39-40页 |
| ·菌落PCR 鉴定重组质粒 | 第40-41页 |
| ·测序结果 | 第41页 |
| ·突变体蛋白的表达 | 第41-42页 |
| ·蛋白的纯化 | 第42-43页 |
| ·sCc-M80A/F82H 的SDS-PAGE | 第43-45页 |
| 第3章 M80A/F82H 蛋白的相关性质及动力学研究 | 第45-51页 |
| ·实验仪器设备 | 第45页 |
| ·主要实验材料与试剂 | 第45-46页 |
| ·制备完全氧化态与完全还原态的细胞色素C | 第46-47页 |
| ·制备全氧化（还原）态的细胞色素C | 第46页 |
| ·细胞色素C 浓度及还原态蛋白比例的标定 | 第46-47页 |
| ·动力学研究实验 | 第47-48页 |
| ·空气中的自养化反应 | 第47-48页 |
| ·与维生素C 反应速率的测定 | 第48页 |
| ·与CCP 的反应 | 第48页 |
| ·实验结果 | 第48-51页 |
| ·制备完全氧化（还原）态的细胞色素C | 第48-49页 |
| ·与维生素C 的反应 | 第49页 |
| ·自氧化反应和与CCP 的反应 | 第49-51页 |
| 第4章 实验结论与前景展望 | 第51-57页 |
| ·蛋白质最佳表达条件 | 第51-52页 |
| ·sCc-M80A/F82H 是致死突变的原因分析 | 第52-53页 |
| ·sCc-M80A/F82H 特殊氧化还原性质的分析 | 第53-55页 |
| ·前景展望 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第62页 |
