| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 主要符号对照表 | 第8-9页 |
| 第1章 引言 | 第9-24页 |
| ·课题背景及意义 | 第9-10页 |
| ·BH4 及其功能 | 第10-13页 |
| ·BH4 循环 | 第10页 |
| ·BH4 是体内必需的辅酶 | 第10-13页 |
| ·BH4 在中枢神经系统中的功能 | 第13-15页 |
| ·BH4 在心血管系统中的功能 | 第15-17页 |
| ·BH4 与相关疾病 | 第17-19页 |
| ·BH4 与神经退行性病变 | 第17-18页 |
| ·BH4 与心血管疾病 | 第18-19页 |
| ·GCH1 基因及表达调控 | 第19-24页 |
| 第2章 实验方法 | 第24-35页 |
| ·实验试剂与材料 | 第24-25页 |
| ·细胞系及培养基 | 第24页 |
| ·菌株及载体 | 第24页 |
| ·试剂盒 | 第24页 |
| ·其他化学试剂 | 第24-25页 |
| ·主要实验仪器 | 第25页 |
| ·主要实验方法和步骤 | 第25-35页 |
| ·细胞培养及药物处理 | 第25页 |
| ·SDS-PAGE | 第25页 |
| ·SDS 凝胶酶解 | 第25-26页 |
| ·考马斯亮蓝染色 | 第26-27页 |
| ·免疫印记 | 第27页 |
| ·转化 | 第27页 |
| ·质粒抽提 | 第27-28页 |
| ·琼脂糖凝胶回收 | 第28页 |
| ·DNA 酶切 | 第28页 |
| ·5’突出末端平滑化 | 第28页 |
| ·载体去磷酸化 | 第28页 |
| ·连接 | 第28页 |
| ·报告质粒的构建 | 第28-29页 |
| ·转染 | 第29-30页 |
| ·双荧光素酶报告基因检测 | 第30-31页 |
| ·Streptavidin Agarose Pulldown Assay | 第31-32页 |
| ·聚合酶链式反应（polymerase chain reaction, PCR） | 第32页 |
| ·BCA 法测定蛋白质含量 | 第32-33页 |
| ·HPLC 法测定GCH 酶活 | 第33-35页 |
| 第3章 实验结果与讨论 | 第35-47页 |
| ·LPS 激活RAW264.7 细胞GCH1 的表达 | 第35页 |
| ·不同信号通路抑制剂对LPS 上调GCH1 表达的影响 | 第35-38页 |
| ·LPS 激活GCH1 的表达依赖于内含子1 | 第38页 |
| ·人类GCH1 基因内含子1 中增强子的鉴定 | 第38-44页 |
| ·构建不同内含子的双荧光素酶报告基因 | 第38页 |
| ·内含子332 bp 区域响应LPS 对RAW264.7 细胞的刺激 | 第38-42页 |
| ·内含子332bp区域响应TNFα/IFNγ对HUVEC细胞的刺激 | 第42页 |
| ·寡核苷酸干扰对报告质粒转录活性的影响 | 第42-44页 |
| ·结合在GCH1 基因内含子1 中332 bp 增强子的转录因子的鉴定 | 第44-45页 |
| ·讨论 | 第45-47页 |
| 第4章 结论与展望 | 第47-48页 |
| ·主要结论 | 第47页 |
| ·不足及展望 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第56页 |
