| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 1 前言 | 第10-12页 |
| 2 文献综述 | 第12-39页 |
| 2.1 乳酸传统角色 | 第12-13页 |
| 2.1.1 乳酸来源 | 第12页 |
| 2.1.2 乳酸的转运和去处 | 第12-13页 |
| 2.2 乳酸新角色——分子信号物质 | 第13-18页 |
| 2.2.1 乳酸抑制运动过程中脂肪酸释放 | 第13-16页 |
| 2.2.2 乳酸抑制脂肪组织脂解作用 | 第16-17页 |
| 2.2.3 乳酸/GPR81受体信号通路的确定 | 第17-18页 |
| 2.3 乳酸/GPR81信号通路直接抑制脂肪组织脂解作用 | 第18-21页 |
| 2.4 乳酸/GPR81是肿瘤细胞生长所必需的 | 第21-22页 |
| 2.5 乳酸在缺血性脑卒神经元损害中作用 | 第22-23页 |
| 2.6 乳酸对白色脂肪褐色化作用 | 第23-24页 |
| 2.7 乳酸/GPR81信号可能是调节运动骨骼肌底物代谢转化的机制 | 第24-28页 |
| 2.8 耐力训练增加骨骼肌肌细胞TG含量和线粒体功能 | 第28-31页 |
| 2.9 EPS诱发肌管细胞收缩运动模型分析 | 第31-37页 |
| 2.10 选题依据 | 第37-39页 |
| 2.10.1 目前研究存在的问题 | 第37-38页 |
| 2.10.2 研究目的及意义 | 第38-39页 |
| 2.10.3 研究思路 | 第39页 |
| 3.第一部分 乳酸/GPR81信号通路参与调节C2C12肌管细胞TG合成和线粒体功能蛋白增加 | 第39-62页 |
| 3.1 前言 | 第39-41页 |
| 3.2 研究对象和方法 | 第41-49页 |
| 3.2.1 细胞培养 | 第41-42页 |
| 3.2.2 细胞处理 | 第42页 |
| 3.2.3 油红O染色 | 第42-43页 |
| 3.2.4 甘油三酯测试 | 第43页 |
| 3.2.5 蛋白质提取及浓度测定 | 第43-44页 |
| 3.2.6 Western blot检测蛋白表达量 | 第44-46页 |
| 3.2.7 实时荧光定量RT-PCR | 第46-47页 |
| 3.2.8 丙酮酸脱氢酶活性测试 | 第47-48页 |
| 3.2.9 丙酮酸含量测试 | 第48页 |
| 3.2.10 数据统计方法 | 第48-49页 |
| 3.3 结果 | 第49-57页 |
| 3.3.1 乳酸诱导C2C12肌管细胞中TG的堆积 | 第49-50页 |
| 3.3.2 乳酸抑制c AMP-PKA信号通路 | 第50-51页 |
| 3.3.3 乳酸促进线粒体蛋白MCAT表达量和PDH活性 | 第51-52页 |
| 3.3.4 c AMP信号通路抑制MCAT蛋白表达量 | 第52-53页 |
| 3.3.5 丙酮酸和乳酸作用不同 | 第53-54页 |
| 3.3.6 乳酸诱导其受体GPR81表达 | 第54-56页 |
| 3.3.7 乳酸对MCT1和MCT4 m RNA含量的影响 | 第56-57页 |
| 3.4 分析与讨论 | 第57-61页 |
| 3.4.1 乳酸/GPR81信号通路促进C2C12肌管细胞TG堆积 | 第58-59页 |
| 3.4.2 乳酸/GPR81信号通路增强线粒体功能相关蛋白MCAT表达量和PDH活性 | 第59页 |
| 3.4.3 乳酸诱发其受体GPR81表达 | 第59-60页 |
| 3.4.4 乳酸发挥作用不依赖丙酮酸 | 第60页 |
| 3.4.5 乳酸诱发C2C12肌管细胞中乳酸转运体表达 | 第60-61页 |
| 3.5 小结 | 第61-62页 |
| 4 第二部分 乳酸/GPR81信号通路参与调节骨骼肌收缩诱导肌细胞TG合成和线粒体功能蛋白增加 | 第62-89页 |
| 4.1 前言 | 第62-63页 |
| 4.2 实验材料和方法 | 第63-71页 |
| 4.2.1 细胞培养 | 第63-64页 |
| 4.2.2 EPS方案 | 第64页 |
| 4.2.3 细胞药物处理 | 第64-65页 |
| 4.2.4 细胞中TG测试 | 第65页 |
| 4.2.5 细胞中乳酸含量测试 | 第65-66页 |
| 4.2.6 ATP含量测试 | 第66页 |
| 4.2.7 c AMP含量检测 | 第66-67页 |
| 4.2.8 蛋白质提取及浓度测定 | 第67-68页 |
| 4.2.9 Western blot检测蛋白表达量 | 第68-69页 |
| 4.2.10 实时荧光定量RT-PCR | 第69-71页 |
| 4.2.11 数据统计方法 | 第71页 |
| 4.3 结果 | 第71-84页 |
| 4.3.1 一次性EPS对C2C12肌管细胞中乳酸和ATP含量的影响 | 第71-74页 |
| 4.3.2 不同EPS方案对C2C12肌管细胞中肌球蛋白重链亚型m RNA含量的影响 | 第74-75页 |
| 4.3.3 不同EPS方案对C2C12肌管细胞中线粒体相关收缩蛋白m RNA含量影响 | 第75-76页 |
| 4.3.4 不同EPS方案对C2C12肌管细胞中MCT1、MCT4和GPR81m RNA含量的影响 | 第76-78页 |
| 4.3.5 EPS-诱发C2C12肌管细胞中TG堆积模型建立 | 第78-79页 |
| 4.3.6 GPR81抑制剂 3-OBA最优剂量确定 | 第79-81页 |
| 4.3.7 乳酸/GPR81信号通路参与调节骨骼肌收缩诱发肌细胞TG堆积 | 第81-82页 |
| 4.3.8 乳酸/GPR81信号通路参与调节骨骼肌收缩诱发肌细胞MCAT和GPR81蛋白表达量增加 | 第82-84页 |
| 4.4 分析与讨论 | 第84-88页 |
| 4.4.1 C2C12肌管细胞收缩和乳酸含量增多的EPS方案建立 | 第84-86页 |
| 4.4.2 EPS-诱发C2C12肌管细胞乳酸产生并促进其转运体MCT1和MCT4及受体GPR81表达 | 第86页 |
| 4.4.3 EPS-诱发C2C12肌管细胞乳酸和TG增多模型建立 | 第86-87页 |
| 4.4.4 C2C12肌管细胞上受体GPR81抑制剂 3-OBA最优剂量确定 | 第87页 |
| 4.4.5 乳酸/GPR81信号通路参与调节骨骼肌细胞收缩诱发TG堆积和线粒体功能蛋白MCAT合成 | 第87-88页 |
| 4.4.6 乳酸/GPR81信号通路参与调节骨骼肌细胞收缩诱发乳酸受体GPR81蛋白表达量增加 | 第88页 |
| 4.5 小结 | 第88-89页 |
| 5 全文总结 | 第89-90页 |
| 6 创新点 | 第90-91页 |
| 致谢 | 第91-92页 |
| 参考文献 | 第92-107页 |
| 附录 | 第107-110页 |
| 个人简历 在读期间发表的学术论文与研究成果 | 第110页 |
