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肠道菌群失调促进慢性便秘发生的机制研究

中文摘要第4-7页
abstract第7-10页
缩略语/符号说明第13-15页
前言第15-17页
    研究现状、成果第15-16页
    研究目的、方法第16-17页
一、对象和方法第17-28页
    1.1 实验材料第17-19页
        1.1.1 实验动物第17页
        1.1.2 主要试剂第17-18页
        1.1.3 主要仪器第18-19页
        1.1.4 主要液体溶剂第19页
    1.2 实验方法第19-27页
        1.2.1 实验小鼠的饲养、粪菌液收集和制备第19-20页
        1.2.2 动物分组、干预及组织标本留取方法第20页
        1.2.3 排便参数测定第20页
        1.2.4 粪菌液刺激Caco-2细胞体外实验第20-21页
            1.2.4.1 Caco-2细胞培养第20页
            1.2.4.2 粪菌液刺激Caco-2细胞流程第20-21页
        1.2.5 Realtime-PCR方法第21-22页
            1.2.5.1 RNA提取第21页
            1.2.5.2 逆转录成cDNA第21页
            1.2.5.3 引物合成第21-22页
            1.2.5.4 PCR反应体系第22页
            1.2.5.5 Realtime-PCR反应条件第22页
            1.2.5.6 Realtime-PCR数据分析第22页
        1.2.6 Western blot技术第22-24页
        1.2.7 酶联免疫吸附测定(ELISA)方法第24-25页
        1.2.8 组织学染色技术第25-26页
            1.2.8.1 制备石蜡切片第25页
            1.2.8.2 免疫荧光染色技术第25-26页
            1.2.8.3 免疫组织化学染色方法第26页
        1.2.9 粪便菌群16SrRNA菌群测序技术第26-27页
    1.3 统计学方法第27-28页
二、结果第28-35页
    2.1 肠道菌群失调使小鼠排便功能异常第28-29页
    2.2 肠道菌群失调促使小鼠肠道动力异常第29-30页
    2.3 肠道菌群失调升高SERT水平第30-31页
        2.3.1 肠道菌群失调升高小鼠结肠组织SERTmRNA及蛋白水平第30页
        2.3.2 肠道菌群失调升高Caco-2细胞内SERTmRNA及蛋白表达第30-31页
    2.4 肠道菌群失调降低小鼠结肠组织中5-HT水平第31-32页
        2.4.1 ELISA方法评价小鼠结肠组织中的5-HT水平第31页
        2.4.2 免疫荧光染色方法显示小鼠结肠中5-HT阳性细胞数减少第31-32页
    2.5 肠道菌群失调导致小鼠肠道菌群改变第32-33页
    2.6 肠道菌群失调破坏小鼠结肠粘膜屏障功能第33-35页
        2.6.1 肠道菌群失调降低小鼠结肠组织中粘蛋白表达第33页
        2.6.2 肠道菌群失调减少小鼠结肠组织杯状细胞数量第33-35页
三、讨论第35-38页
    3.1 慢性便秘与肠道菌群失调第35页
    3.2 肠道菌群失调促进便秘发生的可能机制第35-38页
        3.2.1 肠道菌群失调上调SERT表达水平第35-36页
        3.2.2 肠道菌群失调改变Transgelin蛋白表达第36页
        3.2.3 肠道菌群失调破坏肠道屏障功能第36-38页
结论第38-39页
参考文献第39-43页
发表论文和参加科研情况说明第43-44页
综述第44-55页
    综述参考文献第50-55页
致谢第55-57页
个人简历第57页

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