中文摘要 | 第4-7页 |
abstract | 第7-10页 |
缩略语/符号说明 | 第13-15页 |
前言 | 第15-17页 |
研究现状、成果 | 第15-16页 |
研究目的、方法 | 第16-17页 |
一、对象和方法 | 第17-28页 |
1.1 实验材料 | 第17-19页 |
1.1.1 实验动物 | 第17页 |
1.1.2 主要试剂 | 第17-18页 |
1.1.3 主要仪器 | 第18-19页 |
1.1.4 主要液体溶剂 | 第19页 |
1.2 实验方法 | 第19-27页 |
1.2.1 实验小鼠的饲养、粪菌液收集和制备 | 第19-20页 |
1.2.2 动物分组、干预及组织标本留取方法 | 第20页 |
1.2.3 排便参数测定 | 第20页 |
1.2.4 粪菌液刺激Caco-2细胞体外实验 | 第20-21页 |
1.2.4.1 Caco-2细胞培养 | 第20页 |
1.2.4.2 粪菌液刺激Caco-2细胞流程 | 第20-21页 |
1.2.5 Realtime-PCR方法 | 第21-22页 |
1.2.5.1 RNA提取 | 第21页 |
1.2.5.2 逆转录成cDNA | 第21页 |
1.2.5.3 引物合成 | 第21-22页 |
1.2.5.4 PCR反应体系 | 第22页 |
1.2.5.5 Realtime-PCR反应条件 | 第22页 |
1.2.5.6 Realtime-PCR数据分析 | 第22页 |
1.2.6 Western blot技术 | 第22-24页 |
1.2.7 酶联免疫吸附测定(ELISA)方法 | 第24-25页 |
1.2.8 组织学染色技术 | 第25-26页 |
1.2.8.1 制备石蜡切片 | 第25页 |
1.2.8.2 免疫荧光染色技术 | 第25-26页 |
1.2.8.3 免疫组织化学染色方法 | 第26页 |
1.2.9 粪便菌群16SrRNA菌群测序技术 | 第26-27页 |
1.3 统计学方法 | 第27-28页 |
二、结果 | 第28-35页 |
2.1 肠道菌群失调使小鼠排便功能异常 | 第28-29页 |
2.2 肠道菌群失调促使小鼠肠道动力异常 | 第29-30页 |
2.3 肠道菌群失调升高SERT水平 | 第30-31页 |
2.3.1 肠道菌群失调升高小鼠结肠组织SERTmRNA及蛋白水平 | 第30页 |
2.3.2 肠道菌群失调升高Caco-2细胞内SERTmRNA及蛋白表达 | 第30-31页 |
2.4 肠道菌群失调降低小鼠结肠组织中5-HT水平 | 第31-32页 |
2.4.1 ELISA方法评价小鼠结肠组织中的5-HT水平 | 第31页 |
2.4.2 免疫荧光染色方法显示小鼠结肠中5-HT阳性细胞数减少 | 第31-32页 |
2.5 肠道菌群失调导致小鼠肠道菌群改变 | 第32-33页 |
2.6 肠道菌群失调破坏小鼠结肠粘膜屏障功能 | 第33-35页 |
2.6.1 肠道菌群失调降低小鼠结肠组织中粘蛋白表达 | 第33页 |
2.6.2 肠道菌群失调减少小鼠结肠组织杯状细胞数量 | 第33-35页 |
三、讨论 | 第35-38页 |
3.1 慢性便秘与肠道菌群失调 | 第35页 |
3.2 肠道菌群失调促进便秘发生的可能机制 | 第35-38页 |
3.2.1 肠道菌群失调上调SERT表达水平 | 第35-36页 |
3.2.2 肠道菌群失调改变Transgelin蛋白表达 | 第36页 |
3.2.3 肠道菌群失调破坏肠道屏障功能 | 第36-38页 |
结论 | 第38-39页 |
参考文献 | 第39-43页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第43-44页 |
综述 | 第44-55页 |
综述参考文献 | 第50-55页 |
致谢 | 第55-57页 |
个人简历 | 第57页 |