缩略词 | 第7-9页 |
摘要 | 第9-11页 |
abstract | 第11-13页 |
1.前言 | 第14-37页 |
1.1 登革热的发展现状 | 第14-15页 |
1.2 伊蚊致死的关键基因 | 第15-30页 |
1.2.1 孤儿核受体HR | 第15-22页 |
1.2.2 羟基犬尿氨酸转氨酶基因3HKT | 第22-30页 |
1.3 RNAi技术 | 第30-32页 |
1.3.1 RNAi作用机制 | 第31页 |
1.3.2 dsRNA转运方式 | 第31-32页 |
1.4 叶绿体表达载体的研究进展 | 第32-33页 |
1.5 微藻的优势和特点 | 第33-34页 |
1.6 研究目的意义和技术路线 | 第34-37页 |
1.6.1 研究目的意义 | 第34-35页 |
1.6.2 技术路线 | 第35-37页 |
2.实验材料与方法 | 第37-58页 |
2.1 材料与试剂 | 第37-41页 |
2.1.1 实验材料 | 第37页 |
2.1.2 实验试剂 | 第37-39页 |
2.1.3 实验仪器 | 第39页 |
2.1.4 实验载体 | 第39-41页 |
2.2 实验方法 | 第41-58页 |
2.2.1 HR3和3HKT基因生物信息学分析和引物设计 | 第41-42页 |
2.2.2 HR3和3HKT基因细胞核表达载体的构建 | 第42-47页 |
2.2.3 HR3和3HKT基因叶绿体表达载体的构建 | 第47-50页 |
2.2.4 细胞核表达载体转化莱茵衣藻CC425 及藻株筛选 | 第50-52页 |
2.2.5 叶绿体表达载体转化莱茵衣藻及藻株筛选 | 第52-54页 |
2.2.6 伊蚊的饲养 | 第54-55页 |
2.2.7 伊蚊幼虫的生物学检测 | 第55页 |
2.2.8 HR3和3HKT基因RNA水平检测 | 第55-58页 |
3.实验结果与分析 | 第58-81页 |
3.1 埃及伊蚊HR3和3HKT基因片段的全长克隆 | 第58-59页 |
3.2 RNAi表达载体的构建、转化和检测 | 第59-65页 |
3.2.1 HR3和3HKT基因细胞核表达载体构建 | 第59-63页 |
3.2.2 HR3和3HKT基因叶绿体表达载体构建 | 第63-65页 |
3.3 细胞核表达载体转化莱茵衣藻 CC425 | 第65页 |
3.4 细胞核表达载体转化子检测 | 第65-66页 |
3.5 饲喂转基因藻株的埃及伊蚊幼虫检测 | 第66-78页 |
3.5.1 生物学检测 | 第66-71页 |
3.5.2 细胞学检测 | 第71-75页 |
3.5.3 RNA水平检测 | 第75-78页 |
3.6 叶绿体表达载体转化莱茵衣藻 | 第78-81页 |
3.6.1 壮观霉素浓度梯度确定 | 第78-79页 |
3.6.2 基因枪转化藻细胞的筛选 | 第79-81页 |
4.讨论 | 第81-87页 |
4.1 微藻作为埃及伊蚊幼虫食物的优势 | 第81-82页 |
4.2 关于目标基因的敲除 | 第82-84页 |
4.2.1 HR3 | 第82-83页 |
4.2.2 3HKT | 第83-84页 |
4.3 关于叶绿体表达载体转化 | 第84-85页 |
4.4 经口RNAi的作用途径 | 第85页 |
4.5 本研究的实际应用 | 第85-86页 |
4.6 不足和展望 | 第86-87页 |
5.结论 | 第87-89页 |
参考文献 | 第89-97页 |
综述 | 第97-113页 |
参考文献 | 第105-113页 |
致谢 | 第113-114页 |
作者简历 | 第114页 |