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RNAi工程微藻防控登革热传毒媒介伊蚊的研究

缩略词第7-9页
摘要第9-11页
abstract第11-13页
1.前言第14-37页
    1.1 登革热的发展现状第14-15页
    1.2 伊蚊致死的关键基因第15-30页
        1.2.1 孤儿核受体HR第15-22页
        1.2.2 羟基犬尿氨酸转氨酶基因3HKT第22-30页
    1.3 RNAi技术第30-32页
        1.3.1 RNAi作用机制第31页
        1.3.2 dsRNA转运方式第31-32页
    1.4 叶绿体表达载体的研究进展第32-33页
    1.5 微藻的优势和特点第33-34页
    1.6 研究目的意义和技术路线第34-37页
        1.6.1 研究目的意义第34-35页
        1.6.2 技术路线第35-37页
2.实验材料与方法第37-58页
    2.1 材料与试剂第37-41页
        2.1.1 实验材料第37页
        2.1.2 实验试剂第37-39页
        2.1.3 实验仪器第39页
        2.1.4 实验载体第39-41页
    2.2 实验方法第41-58页
        2.2.1 HR3和3HKT基因生物信息学分析和引物设计第41-42页
        2.2.2 HR3和3HKT基因细胞核表达载体的构建第42-47页
        2.2.3 HR3和3HKT基因叶绿体表达载体的构建第47-50页
        2.2.4 细胞核表达载体转化莱茵衣藻CC425 及藻株筛选第50-52页
        2.2.5 叶绿体表达载体转化莱茵衣藻及藻株筛选第52-54页
        2.2.6 伊蚊的饲养第54-55页
        2.2.7 伊蚊幼虫的生物学检测第55页
        2.2.8 HR3和3HKT基因RNA水平检测第55-58页
3.实验结果与分析第58-81页
    3.1 埃及伊蚊HR3和3HKT基因片段的全长克隆第58-59页
    3.2 RNAi表达载体的构建、转化和检测第59-65页
        3.2.1 HR3和3HKT基因细胞核表达载体构建第59-63页
        3.2.2 HR3和3HKT基因叶绿体表达载体构建第63-65页
    3.3 细胞核表达载体转化莱茵衣藻 CC425第65页
    3.4 细胞核表达载体转化子检测第65-66页
    3.5 饲喂转基因藻株的埃及伊蚊幼虫检测第66-78页
        3.5.1 生物学检测第66-71页
        3.5.2 细胞学检测第71-75页
        3.5.3 RNA水平检测第75-78页
    3.6 叶绿体表达载体转化莱茵衣藻第78-81页
        3.6.1 壮观霉素浓度梯度确定第78-79页
        3.6.2 基因枪转化藻细胞的筛选第79-81页
4.讨论第81-87页
    4.1 微藻作为埃及伊蚊幼虫食物的优势第81-82页
    4.2 关于目标基因的敲除第82-84页
        4.2.1 HR3第82-83页
        4.2.2 3HKT第83-84页
    4.3 关于叶绿体表达载体转化第84-85页
    4.4 经口RNAi的作用途径第85页
    4.5 本研究的实际应用第85-86页
    4.6 不足和展望第86-87页
5.结论第87-89页
参考文献第89-97页
综述第97-113页
    参考文献第105-113页
致谢第113-114页
作者简历第114页

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