缩略语 | 第6-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
前言 | 第13-16页 |
本研究的主要技术路线 | 第16-17页 |
一、类鼻疽伯克霍尔德菌sRNA伴侣蛋白Hfq的表达与纯化 | 第17-37页 |
1.1 材料和方法 | 第17-29页 |
1.1.1 菌种与质粒 | 第17页 |
1.1.2 主要试剂及仪器 | 第17-20页 |
1.1.3 B.p C006菌株Hf基因的扩增 | 第20-23页 |
1.1.4 重组表达质粒p ET30a(+)-Hfq的构建及鉴定 | 第23-27页 |
1.1.5 目的基因的诱导表达和表达产物的SDS-PAGE与Western blot分析 | 第27-28页 |
1.1.6 目的蛋白的纯化 | 第28-29页 |
1.2 结果与分析 | 第29-35页 |
1.2.1 Hfq基因扩增产物及亚克隆产物的鉴定 | 第29-31页 |
1.2.2 PET30a(+)-Hfq 重组表达质粒的鉴定 | 第31-33页 |
1.2.3 重组Hfq蛋白的SDS-PAGE分析 | 第33-34页 |
1.2.4 重组 Hfq 蛋白的 Western blot 鉴定 | 第34-35页 |
1.2.5 目的蛋白的纯化 | 第35页 |
1.3 讨论 | 第35-37页 |
二、菌体内Hfq吸附的mRNA分离与建库 | 第37-59页 |
2.1 材料与方法 | 第37-44页 |
2.1.1 菌种 | 第37页 |
2.1.2 主要试剂及仪器 | 第37-38页 |
2.1.3 实验方法 | 第38-44页 |
2.2 结果与分析 | 第44-56页 |
2.2.1 重组表达质粒p ET30a(+)-Hfq转化入大肠S17的鉴定 | 第44-45页 |
2.2.2 S17/p ET30a(+)-Hfq与B.p C006接合的鉴定 | 第45-46页 |
2.2.3 免疫共沉淀分离RISC复合物的Western blot鉴定 | 第46-47页 |
2.2.4 免疫共沉淀分离RNA与总RNA的电泳分析 | 第47-48页 |
2.2.5 免疫共沉淀分离RNA的高通量测序并且构建相关mRNA子文库 | 第48-56页 |
2.3 讨论 | 第56-59页 |
小结 | 第59-61页 |
参考文献 | 第61-65页 |
综述 | 第65-79页 |
综述参考文献 | 第74-79页 |
作者简历 | 第79-80页 |
致谢 | 第80页 |