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类鼻疽伯克霍尔德菌Hfq伴侣蛋白相关mRNA文库的构建及测序分析

缩略语第6-8页
中文摘要第8-10页
ABSTRACT第10-12页
前言第13-16页
本研究的主要技术路线第16-17页
一、类鼻疽伯克霍尔德菌sRNA伴侣蛋白Hfq的表达与纯化第17-37页
    1.1 材料和方法第17-29页
        1.1.1 菌种与质粒第17页
        1.1.2 主要试剂及仪器第17-20页
        1.1.3 B.p C006菌株Hf基因的扩增第20-23页
        1.1.4 重组表达质粒p ET30a(+)-Hfq的构建及鉴定第23-27页
        1.1.5 目的基因的诱导表达和表达产物的SDS-PAGE与Western blot分析第27-28页
        1.1.6 目的蛋白的纯化第28-29页
    1.2 结果与分析第29-35页
        1.2.1 Hfq基因扩增产物及亚克隆产物的鉴定第29-31页
        1.2.2 PET30a(+)-Hfq 重组表达质粒的鉴定第31-33页
        1.2.3 重组Hfq蛋白的SDS-PAGE分析第33-34页
        1.2.4 重组 Hfq 蛋白的 Western blot 鉴定第34-35页
        1.2.5 目的蛋白的纯化第35页
    1.3 讨论第35-37页
二、菌体内Hfq吸附的mRNA分离与建库第37-59页
    2.1 材料与方法第37-44页
        2.1.1 菌种第37页
        2.1.2 主要试剂及仪器第37-38页
        2.1.3 实验方法第38-44页
    2.2 结果与分析第44-56页
        2.2.1 重组表达质粒p ET30a(+)-Hfq转化入大肠S17的鉴定第44-45页
        2.2.2 S17/p ET30a(+)-Hfq与B.p C006接合的鉴定第45-46页
        2.2.3 免疫共沉淀分离RISC复合物的Western blot鉴定第46-47页
        2.2.4 免疫共沉淀分离RNA与总RNA的电泳分析第47-48页
        2.2.5 免疫共沉淀分离RNA的高通量测序并且构建相关mRNA子文库第48-56页
    2.3 讨论第56-59页
小结第59-61页
参考文献第61-65页
综述第65-79页
    综述参考文献第74-79页
作者简历第79-80页
致谢第80页

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