| 摘要 | 第6-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 前言 | 第13-15页 |
| 第一章 慢病毒制备及感染人原代T细胞条件优化 | 第15-35页 |
| 1 引言 | 第15页 |
| 2 材料与方法 | 第15-24页 |
| 2.1 细胞与菌株 | 第15-16页 |
| 2.2 主要实验仪器 | 第16页 |
| 2.3 实验试剂 | 第16-18页 |
| 2.4 方法 | 第18-24页 |
| 2.5 统计学方法 | 第24页 |
| 3 结果 | 第24-32页 |
| 3.1 慢病毒表达质粒pLVX-CMV-EGFP的鉴定结果 | 第24-25页 |
| 3.2 重组慢病毒表达质粒pLVX-EF1α-EGFP的鉴定结果 | 第25-27页 |
| 3.3 重组慢病毒的制备 | 第27-28页 |
| 3.4 T细胞的分离、纯化及活化 | 第28-29页 |
| 3.5 慢病毒制备及存储条件优化 | 第29-31页 |
| 3.6 慢病毒感染人原代T细胞条件优化 | 第31-32页 |
| 4 讨论 | 第32-34页 |
| 5 结论 | 第34-35页 |
| 第二章 靶向CD19同种异体通用型CAR-T细胞的构建及体外杀伤效应 | 第35-54页 |
| 1 引言 | 第35-36页 |
| 2 材料与方法 | 第36-45页 |
| 2.1 主要实验仪器 | 第36-37页 |
| 2.2 主要实验试剂 | 第37-39页 |
| 2.3 方法 | 第39-44页 |
| 2.4 统计学方法 | 第44-45页 |
| 3 结果 | 第45-50页 |
| 3.1 重组慢病毒表达质粒pLVX-EF1α-CAR19的酶切鉴定结果 | 第45页 |
| 3.2 慢病毒表达重组质粒pLVX-EF1α-CAR19的CAR19的DNA测序鉴定结果 | 第45-46页 |
| 3.3 T细胞敲除TCR和HLA-I后的流式检测分析结果 | 第46-47页 |
| 3.4 混合淋巴细胞反应 | 第47页 |
| 3.5 TCR和HLA-I双阴性T细胞分选结果 | 第47-48页 |
| 3.6 敲除TCR和HLA-I的T细胞的CAR表达情况 | 第48页 |
| 3.7 荧光素酶测定效应细胞对靶细胞的杀伤活性 | 第48-49页 |
| 3.8 ELISA检测效靶细胞共培养后上清液中IL-2和IFN-γ的表达 | 第49-50页 |
| 4 讨论 | 第50-53页 |
| 5 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 文献综述 | 第58-70页 |
| 参考文献 | 第65-70页 |
| 附录 | 第70-71页 |
| 攻读硕士期间成果 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
