| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 1 前言 | 第9-18页 |
| 1.1 柠檬酸的性质 | 第9页 |
| 1.2 柠檬酸的应用 | 第9-10页 |
| 1.3 黑曲霉柠檬酸发酵 | 第10-11页 |
| 1.3.1 培养基成分 | 第10页 |
| 1.3.2 pH | 第10-11页 |
| 1.3.3 溶氧 | 第11页 |
| 1.4 黑曲霉遗传转化方法 | 第11-12页 |
| 1.5 透明颤菌血红蛋白 | 第12页 |
| 1.6 透明颤菌血红蛋白的应用 | 第12-17页 |
| 1.6.1 透明颤菌血红蛋白在细菌中的应用 | 第12-15页 |
| 1.6.2 透明颤菌血红蛋白在酵母中的应用 | 第15-16页 |
| 1.6.3 透明颤菌血红蛋白在真菌中的应用 | 第16-17页 |
| 1.7 研究目标与意义 | 第17页 |
| 1.8 本课题拟研究内容 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-35页 |
| 2.1 材料 | 第18-24页 |
| 2.1.1 菌种与质粒 | 第18页 |
| 2.1.2 仪器与试剂 | 第18-21页 |
| 2.1.3 溶液与培养基 | 第21-24页 |
| 2.1.4 引物 | 第24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-35页 |
| 2.2.1 基本分子生物学方法 | 第24-29页 |
| 2.2.2 透明颤菌血红蛋白在E.coli BL21(DE3)中表达 | 第29页 |
| 2.2.3 透明颤菌血红蛋白在黑曲霉中表达 | 第29-32页 |
| 2.2.4 透明颤菌血红蛋白活性检测 | 第32页 |
| 2.2.5 黑曲霉柠檬酸发酵 | 第32-33页 |
| 2.2.6 透明颤菌血红蛋白对黑曲霉柠檬酸发酵的影响 | 第33-35页 |
| 3 结果与讨论 | 第35-54页 |
| 3.1 透明颤菌血红蛋白在大肠杆菌中活性表达 | 第35-37页 |
| 3.1.1 透明颤菌血红蛋白表达载体的构建 | 第35-36页 |
| 3.1.2 透明颤菌血红蛋白在E.coli BL21(DE3)中诱导表达 | 第36-37页 |
| 3.1.3 透明颤菌血红蛋白活性检测 | 第37页 |
| 3.1.4 小结与讨论 | 第37页 |
| 3.2 产柠檬酸黑曲霉透明颤菌血红蛋白重组菌株的构建 | 第37-45页 |
| 3.2.1 黑曲霉表达系统中透明颤菌血红蛋白表达载体的构建 | 第37-39页 |
| 3.2.2 黑曲霉原生质体转化体系建立 | 第39-41页 |
| 3.2.3 黑曲霉原生质体转化与转化子验证 | 第41-43页 |
| 3.2.4 透明颤菌血红蛋白重组菌株胞内血红蛋白活性表达检测 | 第43-44页 |
| 3.2.5 透明颤菌血红蛋白重组菌株柠檬酸发酵 | 第44页 |
| 3.2.6 小结与讨论 | 第44-45页 |
| 3.3 透明颤菌血红蛋白对黑曲霉柠檬酸发酵的影响 | 第45-54页 |
| 3.3.1 不同溶氧水平对黑曲霉柠檬酸发酵的影响 | 第45-46页 |
| 3.3.2 溶氧充足条件下透明颤菌血红蛋白对黑曲霉柠檬酸发酵的影响 | 第46-48页 |
| 3.3.3 溶氧不足条件下透明颤菌血红蛋白对黑曲霉柠檬酸发酵的影响 | 第48-53页 |
| 3.3.4 小结与讨论 | 第53-54页 |
| 4 结论 | 第54-55页 |
| 5 展望 | 第55-56页 |
| 6 参考文献 | 第56-63页 |
| 7 攻读硕士学位期间发表论文与获奖情况 | 第63-64页 |
| 8 致谢 | 第64页 |
