| 致谢 | 第4-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-18页 |
| 1 玉米生产现状及发展趋势 | 第10-11页 |
| 2 植物非生物胁迫响应机制 | 第11-13页 |
| 3 组氨酸三聚体核苷结合蛋白(Histidine triad nucleotide binding protein，HINT)研 | 第13-15页 |
| 3.1 HINT的来源和命名 | 第13-14页 |
| 3.2 HINT的结构特征和分类 | 第14-15页 |
| 3.3 HINT的研究现状 | 第15页 |
| 4 转基因功能研究技术 | 第15-18页 |
| 第二章 玉米Zm-HINT1基因的克隆和生物信息学分析 | 第18-29页 |
| 1 材料与方法 | 第18-23页 |
| 1.1 实验材料 | 第18页 |
| 1.2 实验方法 | 第18-23页 |
| 1.2.1 植物总RNA的提取及检测 | 第18-19页 |
| 1.2.2 cDNA第一链的合成和检测 | 第19-20页 |
| 1.2.3 Zm-HINT1的克隆 | 第20-21页 |
| 1.2.4 Zm-HINT1 PCR扩增产物的回收、连接与转化 | 第21-23页 |
| 1.2.5 生物信息学分析方法 | 第23页 |
| 2 结果与分析 | 第23-27页 |
| 2.1 RNA提取、纯化与第一链合成检测 | 第23页 |
| 2.2 Zm-HINT1基因的克隆分析 | 第23-24页 |
| 2.3 玉米Zm-HINT1基因相关序列分析 | 第24-25页 |
| 2.4 不同物种氨基酸序列比对 | 第25-26页 |
| 2.5 Zm-HINT1的遗传进化分析 | 第26页 |
| 2.6 Zm-HINT1在不同组织间的表达 | 第26-27页 |
| 3 结论与讨论 | 第27-29页 |
| 第三章 Zm-HINT1在逆境胁迫下的表达分析 | 第29-37页 |
| 1 材料与方法 | 第29-31页 |
| 1.1 实验材料 | 第29页 |
| 1.2 实验方法 | 第29-31页 |
| 1.2.1 材料的处理和取样 | 第29-30页 |
| 1.2.2 总RNA的提取和c DNA的合成及PCR引物的设计 | 第30-31页 |
| 1.2.3 数据处理 | 第31页 |
| 2 结果与分析 | 第31-34页 |
| 2.1 盐胁迫条件下玉米Zm-HINT1基因的表达分析 | 第31-32页 |
| 2.2 高温胁迫条件下玉米Zm-HINT1基因的表达分析 | 第32页 |
| 2.3 SA胁迫条件下玉米Zm-HINT1基因的表达分析 | 第32-33页 |
| 2.4 PEG6000胁迫条件下玉米Zm-HINT1基因的表达分析 | 第33-34页 |
| 2.5 干旱胁迫条件下玉米Zm-HINT1基因的表达分析 | 第34页 |
| 3 结论与讨论 | 第34-37页 |
| 3.1 盐胁迫条件下玉米Zm-HINT1基因的表达分析 | 第34-35页 |
| 3.2 高温胁迫下玉米Zm-HINT1基因的表达分析 | 第35页 |
| 3.3 激素处理后的玉米Zm-HINT1基因的表达分析 | 第35页 |
| 3.4 干旱胁迫下玉米Zm-HINT1基因的表达分析 | 第35-37页 |
| 第四章 玉米Zm-HINT1基因的亚细胞定位 | 第37-47页 |
| 1 材料与方法 | 第37-43页 |
| 1.1 实验材料 | 第37页 |
| 1.2 实验方法 | 第37-43页 |
| 1.2.1 融合表达载体的构建 | 第37-40页 |
| 1.2.2 轰击前洋葱表皮的培养 | 第40-41页 |
| 1.2.3 金粉悬浮液的制备过程 | 第41-42页 |
| 1.2.4 基因枪轰击和观察 | 第42-43页 |
| 2 结果与分析 | 第43-45页 |
| 2.1 荧光表达载体的构建 | 第43-44页 |
| 2.2 洋葱表皮瞬时表达亚细胞定位结果 | 第44-45页 |
| 3 结论与讨论 | 第45-47页 |
| 第五章 Zm-HINT1在非生物胁迫中的功能分析 | 第47-61页 |
| 1 材料与方法 | 第47-52页 |
| 1.1 实验材料 | 第47页 |
| 1.2 实验方法 | 第47-52页 |
| 1.2.1 过表达载体构建 | 第47-49页 |
| 1.2.2 拟南芥转化 | 第49-50页 |
| 1.2.2.1 拟南芥种植 | 第49页 |
| 1.2.2.2 重组质粒和空载体的转化 | 第49-50页 |
| 1.2.3 转基因拟南芥阳性植株的筛选 | 第50-51页 |
| 1.2.3.1 转基因拟南芥抗性筛选 | 第50-51页 |
| 1.2.3.2 转基因拟南芥PCR检测 | 第51页 |
| 1.2.4 转基因T3代拟南芥处理 | 第51-52页 |
| 1.2.4.1 盐胁迫条件下，转基因T3代拟南芥处理 | 第51页 |
| 1.2.4.2 高温条件下转基因T3代拟南芥处理 | 第51-52页 |
| 1.2.4.3 干旱条件下转基因T3代拟南芥处理 | 第52页 |
| 1.2.5 脯氨酸含量的测定方法 | 第52页 |
| 2 结果与分析 | 第52-59页 |
| 2.1 过表达载体构建及重组质粒和空载体的农杆菌转化 | 第52-53页 |
| 2.2 转基因拟南芥潮霉素筛选和PCR分析 | 第53-54页 |
| 2.3 转基因拟南芥非生物胁迫条件下的表型鉴定和相关基因的表达分析 | 第54-59页 |
| 2.3.1 盐胁迫下转基因拟南芥表型分析和相关基因的表达分析 | 第54-55页 |
| 2.3.2 高温胁迫下转基因拟南芥表型分析和脯氨酸含量测定 | 第55-57页 |
| 2.3.3 干旱胁迫下转基因拟南芥表型分析和脯氨酸含量测定 | 第57-59页 |
| 3 结论与讨论 | 第59-61页 |
| 第六章 Zm-HINT1基因下一步研究展望 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-69页 |
| Abatract | 第69-70页 |
