摘要 | 第4-7页 |
abstract | 第7-9页 |
引言 | 第12-15页 |
第一章 FPN1与肝癌临床相关性的研究 | 第15-24页 |
前言 | 第15页 |
1.1 材料 | 第15-17页 |
1.1.1 标本的来源 | 第15页 |
1.1.2 肝癌患者的临床特征 | 第15-16页 |
1.1.3 主要试剂及耗材 | 第16页 |
1.1.4 主要仪器 | 第16-17页 |
1.2 试验方法 | 第17-19页 |
1.2.1 芯片数据库 | 第17页 |
1.2.2 组织包埋与切片 | 第17页 |
1.2.3 免疫组织化学方法 | 第17-18页 |
1.2.4 结果判断和评分标准 | 第18-19页 |
1.3 统计学分析 | 第19页 |
1.4 实验结果 | 第19-22页 |
1.4.1 FPN1 mRNA在不同肿瘤类型中的表达 | 第19-20页 |
1.4.2 FPN1蛋白在五种不同肿瘤标本中的表达情况 | 第20-21页 |
1.4.3 FPN1在肝癌中的表达以及与肝癌患者预后的相关性 | 第21-22页 |
1.5 讨论和小结 | 第22-24页 |
第二章 FPN1对肝癌细胞增殖及侵袭迁移的影响 | 第24-44页 |
前言 | 第24页 |
2.1 材料与仪器 | 第24-26页 |
2.1.1 主要的试剂与耗材 | 第24-25页 |
2.1.2 主要的仪器 | 第25-26页 |
2.2 实验方法 | 第26-34页 |
2.2.1 细胞的培养 | 第26-27页 |
2.2.2 稳定表达FPN1肝癌细胞株的构建 | 第27-29页 |
2.2.3 Western blotting检测FPN1蛋白的表达 | 第29-31页 |
2.2.4 实时荧光定量PCR检测FPN1 mRNA表达 | 第31-33页 |
2.2.5 FPN1对肝癌细胞增值及侵袭迁移能力的影响 | 第33-34页 |
2.2.6 细胞划痕实验检测肝癌细胞的迁移能力 | 第34页 |
2.2.7 基质胶侵袭实验 | 第34页 |
2.3 统计分析 | 第34页 |
2.4 实验结果 | 第34-42页 |
2.4.1 FPN1慢病毒干扰序列的验证 | 第34-35页 |
2.4.2 慢病毒转染后荧光表达情况 | 第35-36页 |
2.4.3 Western blotting以及RT-qPCR检测FPN1表达情况 | 第36-37页 |
2.4.4 抑制FPN1的表达促进肝癌细胞的增殖 | 第37-38页 |
2.4.5 抑制FPN1的表达能够促进肝癌细胞的迁移 | 第38-39页 |
2.4.6 过表达FPN1抑制肝癌细胞的增殖 | 第39-40页 |
2.4.7 过表达FPN1能够抑制肝癌细胞的迁移 | 第40-41页 |
2.4.8 FPN1对肝癌细胞HepG2侵袭能力的影响 | 第41-42页 |
2.5 讨论和小结 | 第42-44页 |
第三章 下调FPN1促进肝癌细胞增殖的作用机制 | 第44-50页 |
前言 | 第44-45页 |
3.1 材料与仪器 | 第45页 |
3.1.1 主要的仪器 | 第45页 |
3.1.2 主要的试剂和耗材 | 第45页 |
3.2 实验方法 | 第45页 |
3.2.1 Western blotting检测STAT3、AKT等相关通路蛋白的表达 | 第45页 |
3.2.2 MTT实验检测肝癌细胞增殖 | 第45页 |
3.3 统计学分析 | 第45-46页 |
3.4 实验结果 | 第46-48页 |
3.4.1 FPN1调节肝癌细胞的增值不完全依赖细胞内的铁 | 第46页 |
3.4.2 下调FPN1能够激活AKT及STAT3相关蛋白通路 | 第46-47页 |
3.4.3 加入AKT及STAT3抑制剂对肝癌细胞增殖的影响 | 第47-48页 |
3.5 讨论和小结 | 第48-50页 |
第四章 结论与展望 | 第50-51页 |
4.1 结论 | 第50页 |
4.2 展望 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-55页 |
缩略词表 | 第55-56页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第56-57页 |
致谢 | 第57页 |