摘要 | 第8-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
第一章 文献综述 | 第14-22页 |
1.1 激素参与免疫调节的研究进展 | 第14-17页 |
1.1.1 蜕皮激素20E对昆虫免疫反应的调节 | 第14-16页 |
1.1.2 蜕皮激素20E对家蚕免疫反应的调节 | 第16-17页 |
1.2 蜕皮激素早期应答因子BR-C的研究进展 | 第17-22页 |
1.2.1 昆虫BR-C基因结构概述 | 第17页 |
1.2.2 昆虫BR-C基因功能研究概述 | 第17-19页 |
1.2.3 家蚕BmBR-C基因功能研究概述 | 第19-22页 |
第二章 引言 | 第22-26页 |
2.1 研究背景及目的意义 | 第22-23页 |
2.2 主要研究内容 | 第23-24页 |
2.3 研究技术路线 | 第24-26页 |
第三章 家蚕BmBR-CZ2基因与20E可促进免疫相关基因的表达 | 第26-44页 |
3.1 材料和试剂 | 第26-30页 |
3.1.1 实验材料 | 第26页 |
3.1.2 实验仪器 | 第26-27页 |
3.1.3 实验试剂 | 第27页 |
3.1.4 主要溶液配制 | 第27-30页 |
3.2 方法和步骤 | 第30-38页 |
3.2.1 RNA提取 | 第30-31页 |
3.2.2 RNA的浓度及纯度检测 | 第31页 |
3.2.3 cDNA的合成 | 第31页 |
3.2.4 cDNA检测 | 第31-32页 |
3.2.5 实时荧光定量PCR | 第32页 |
3.2.6 细胞复苏 | 第32-33页 |
3.2.7 细胞传代 | 第33页 |
3.2.8 细胞冻存 | 第33页 |
3.2.9 添加20E | 第33-34页 |
3.2.10 过表达载体的构建 | 第34-36页 |
3.2.11 细胞转染 | 第36页 |
3.2.12 Western-blot检测 | 第36-38页 |
3.3 结果与分析 | 第38-41页 |
3.3.1 BmBR-CZ2各组织表达谱分析 | 第38页 |
3.3.2 BmBR-CZ2时空表达谱分析 | 第38-39页 |
3.3.3 20 E可上调BmBR-CZ2的表达 | 第39页 |
3.3.4 20 E可上调免疫相关基因的表达 | 第39-40页 |
3.3.5 过表达BmBR-CZ2可上调免疫相关基因的表达 | 第40-41页 |
3.4 小结与讨论 | 第41-44页 |
第四章 家蚕BmBR-CZ2基因可调控蚕体的抗菌能力 | 第44-52页 |
4.1 材料和试剂 | 第44-45页 |
4.1.1 实验材料 | 第44页 |
4.1.2 实验仪器 | 第44页 |
4.1.3 实验试剂 | 第44页 |
4.1.4 主要溶液配制 | 第44-45页 |
4.2 方法和步骤 | 第45-47页 |
4.2.1 蚕体攻毒实验 | 第45页 |
4.2.2 体外转录合成dsRNA | 第45-47页 |
4.2.3 BmN4-SID-1细胞系中添加dsRNA | 第47页 |
4.2.4 蚕体注射dsRNA后细菌攻毒 | 第47页 |
4.3 结果与分析 | 第47-50页 |
4.3.1 蚕体细菌攻毒实验会上调BmBR-CZ2基因的表达 | 第47-48页 |
4.3.2 合成dsBmBR-CZ2基因的双链干涉片段 | 第48-49页 |
4.3.3 下调BmBR-CZ2基因的表达后抗菌类基因也被下调 | 第49-50页 |
4.3.4 蚕体注射dsRNA后减弱了蚕体的抗菌能力 | 第50页 |
4.4 小结与讨论 | 第50-52页 |
第五章 家蚕BmBR-CZ2可以结合在LZM基因的启动子上激活其表达 | 第52-58页 |
5.1 材料和试剂 | 第52-53页 |
5.1.1 实验材料 | 第52页 |
5.1.2 实验仪器 | 第52页 |
5.1.3 实验试剂 | 第52页 |
5.1.4 主要溶液配置 | 第52-53页 |
5.2 方法和步骤 | 第53-55页 |
5.2.1 基因组的提取 | 第53页 |
5.2.2 预测启动子序列扩增 | 第53-54页 |
5.2.3 目的基因T克隆 | 第54页 |
5.2.4 目的基因克隆 | 第54页 |
5.2.5 细胞转染 | 第54-55页 |
5.2.6 双荧光素酶活活性测定 | 第55页 |
5.3 结果与分析 | 第55-56页 |
5.3.1 家蚕BmBR-CZ2可以激活LZM基因的启动子起始其表达 | 第55-56页 |
5.4 小结与讨论 | 第56-58页 |
第六章 全文总结 | 第58-60页 |
6.1 家蚕BmBR-CZ2基因表达谱分析 | 第58页 |
6.2 家蚕BmBR-CZ2基因与20E可促进同类免疫相关基因的表达 | 第58页 |
6.3 家蚕BmBR-CZ2基因会影响家蚕对细菌侵染的抵抗力 | 第58-59页 |
6.4 家蚕BmBR-CZ2可以结合在LZM基因的启动子上激活其表达 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-66页 |
附录 | 第66-70页 |
硕士期间发表文章及参研课题情况 | 第70-72页 |
致谢 | 第72-73页 |