摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
缩略词表 | 第9-10页 |
1、前言 | 第10-18页 |
1.1 唇腭裂 | 第10-13页 |
1.2 唇腭裂相关基因 | 第13-17页 |
1.3 本篇研究目的和意义 | 第17-18页 |
2、材料和试剂 | 第18-24页 |
2.1 实验所需载体菌种 | 第18-19页 |
2.2 实验仪器 | 第19-20页 |
2.3 主实验试剂 | 第20-21页 |
2.4 试剂的配置 | 第21-24页 |
3、实验方法 | 第24-38页 |
3.1 重组载体构建 | 第24-29页 |
3.2 细胞培养 | 第29-30页 |
3.3 转染siRNA | 第30页 |
3.4 qRT-PCR——目标基因的mRNA的表达 | 第30-34页 |
3.5 Western-blot法检测干扰后的目标蛋白变化 | 第34-35页 |
3.6 划痕法检测对细胞移行的影响 | 第35-36页 |
3.7 CCK8法检测细胞增殖情况 | 第36页 |
3.8 细胞凋亡检测 | 第36-37页 |
3.9 检测细胞形态,E-cadherin和Vimentin的变化 | 第37-38页 |
4、实验结果与分析 | 第38-55页 |
4.1 pEGFP-MID1重组质粒构建成功 | 第38-40页 |
4.2 重组载体在293T细胞内成功表达 | 第40-41页 |
4.3 qRT-PCR筛选最佳抑制效果siRNA序列 | 第41-43页 |
4.4 Western-blot法检测干扰后的目标蛋白变化 | 第43-44页 |
4.5 划痕法检测对细胞移行的影响 | 第44-46页 |
4.6 CCK8法检测细胞增殖情况 | 第46-47页 |
4.7 对细胞凋亡的影响 | 第47-49页 |
4.8 观察细胞形态,检测E-cadherin和vimentin的变化 | 第49-55页 |
5、讨论与展望 | 第55-59页 |
5.1 讨论 | 第55-58页 |
5.2 展望 | 第58-59页 |
6、结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-64页 |
附录 | 第64-68页 |
附录一 MID1基因序列 | 第64页 |
附录二 pEGFP-MID1重组质粒测序结果 | 第64-65页 |
附录三 pEGFP-MID1重组质粒测序结果NCBI在线比对 | 第65-68页 |
致谢 | 第68页 |