| 中文摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-23页 |
| 1.1 拟南芥种子发育过程 | 第10-16页 |
| 1.1.1 种胚的发育过程及储藏物的积累 | 第10-12页 |
| 1.1.2 成熟干种子中主要贮藏物质 | 第12-13页 |
| 1.1.3 脂肪酸的生物合成 | 第13-14页 |
| 1.1.4 种子大小的调控机制 | 第14-16页 |
| 1.2 植物转录子 | 第16-21页 |
| 1.2.1 转录因子的结构 | 第17页 |
| 1.2.2 bHLH转录因子的结构特征 | 第17-18页 |
| 1.2.3 bHLH转录因子的分类 | 第18页 |
| 1.2.4 bHLH转录因子的生物学功能 | 第18-19页 |
| 1.2.5 拟南芥SPT基因的生物学功能 | 第19-21页 |
| 1.3 我国油菜产量现状 | 第21-22页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 第二章 BnaA01g00730(BnSPT1)和BnaC03g61610D(BnSPT4)基因的克隆与表达分析 | 第23-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第23页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第23页 |
| 2.1.2 载体 | 第23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-29页 |
| 2.2.1 植物总RNA提取 | 第23-24页 |
| 2.2.2 cDNA第一条链的合成 | 第24页 |
| 2.2.3 目的基因扩增 | 第24-25页 |
| 2.2.4 切胶回收目的片段 | 第25-26页 |
| 2.2.5 酶切目的片段 | 第26页 |
| 2.2.6 连接及转化 | 第26页 |
| 2.2.7 大肠杆菌DH5α感受态制备及质粒转化 | 第26-29页 |
| 2.2.8 油菜种植方法 | 第29页 |
| 2.2.9 BnSPT1和BnSPT4在油菜不同组织中的表达模式 | 第29页 |
| 2.3 结果与分析 | 第29-33页 |
| 2.3.1 BnSPT1和BnSPT4基因CDS序列克隆及分析 | 第29-30页 |
| 2.3.2 启动子序列分析 | 第30-31页 |
| 2.3.3 BnSPT1和BnSPT4在油菜不同组织中的表达情况 | 第31-32页 |
| 2.3.4 BnSPT1和BnSPT4在角果不同发育时期的表达量 | 第32-33页 |
| 2.4 讨论 | 第33-34页 |
| 第三章 BnSPT1 (BnaA01g00730)基因的克隆和功能验证 | 第34-59页 |
| 3.1 材料方法 | 第34-36页 |
| 3.1.1 植物材料与种植方法 | 第34页 |
| 3.1.2 菌株 | 第34页 |
| 3.1.3 载体 | 第34-35页 |
| 3.1.4 引物与测序分析 | 第35-36页 |
| 3.2 实验方法 | 第36-40页 |
| 3.2.1 基因克隆及载体构建 | 第36页 |
| 3.2.2 农杆菌GV3101感受态制作及转化 | 第36-37页 |
| 3.2.3 拟南芥转化及株系筛选 | 第37-38页 |
| 3.2.4 荧光定量PCR | 第38-39页 |
| 3.2.5 CTAB法提取植物总DNA | 第39页 |
| 3.2.6 拟南芥植株表型分析 | 第39页 |
| 3.2.7 种子脂肪酸提取及含量测定 | 第39-40页 |
| 3.2.8 透射电子显微镜观察种子油滴 | 第40页 |
| 3.3 结果与分析 | 第40-56页 |
| 3.3.1 过表达株系的筛选 | 第40-42页 |
| 3.3.2 BnSPT1过表达和突变体植株形态观察 | 第42-45页 |
| 3.3.3 BnSPT1过表达对种子表型的的影响 | 第45-49页 |
| 3.3.4 转基因和突变体植株成熟种子含油量和组分分析 | 第49-53页 |
| 3.3.5 种子发育相关基因表达分析 | 第53-56页 |
| 3.3.5.1 BnSPT1基因对种子油脂合成相关基因表达的调控 | 第53-55页 |
| 3.3.5.2 BnSPT1基因对拟南芥种子发育过程中蛋白和油脂积累相关基因表达的影响 | 第55-56页 |
| 3.4 讨论 | 第56-59页 |
| 第四章 BnSPT4(BnaC03g61610D)基因的克隆与功能验证 | 第59-66页 |
| 4.1 材料与方法 | 第59页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第59页 |
| 4.1.2 拟南芥种植方法 | 第59页 |
| 4.1.3 目的基因克隆 | 第59页 |
| 4.1.4 过表达载体构建 | 第59页 |
| 4.1.5 农杆菌遗传转化拟南芥及转基因植株鉴定与筛选 | 第59页 |
| 4.2 结果与分析 | 第59-64页 |
| 4.2.1 过表达株系的筛选 | 第59-60页 |
| 4.2.2 BnSPT4过表达对株高和角果发育的影响 | 第60-62页 |
| 4.2.3 BnSPT4过表达对种子发育的影响 | 第62-64页 |
| 4.2.4 过表达BnSPT4对成熟种子含油量和脂肪酸组分的影响 | 第64页 |
| 4.3 讨论 | 第64-66页 |
| 第五章 全文总结和展望 | 第66-68页 |
| 5.1 全文总结 | 第66-67页 |
| 5.2 展望 | 第67-68页 |
| References | 第68-75页 |
| 附件 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
