中文摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
前言 | 第10-12页 |
第一部分 三七皂苷对高糖诱导的NRK-52E细胞EMT的影响 | 第12-31页 |
一、材料与方法 | 第12-20页 |
(一)实验材料 | 第12-13页 |
1.细胞株来源及主要试剂 | 第12-13页 |
2.主要仪器 | 第13页 |
(二)实验方法 | 第13-20页 |
1.细胞培养 | 第13-14页 |
2.细胞计数 | 第14页 |
3.细胞分组及干预 | 第14页 |
4.免疫组化检测细胞蛋白表达 | 第14-15页 |
5.Real-time PCR检测细胞mRNA的表达 | 第15-17页 |
6.Western blot检测细胞蛋白的表达 | 第17-18页 |
7.免疫共沉淀 | 第18-19页 |
8.统计学分析 | 第19-20页 |
二、实验结果 | 第20-26页 |
(一)肾小管上皮细胞免疫组化结果 | 第20页 |
(二)肾小管上皮细胞PCR结果 | 第20-22页 |
1.细胞α-SMA和E-cadherin mRNA的表达 | 第20-21页 |
2.各组细胞TGF-β_1、SIRT1、Smad3和Smad4 mRNA的表达 | 第21-22页 |
(三)肾小管上皮细胞Western-blot结果 | 第22-25页 |
1.各组细胞α-SMA和E-cadherin蛋白的表达 | 第22-24页 |
2.各组细胞TGF-β_1和SIRT1蛋白表达 | 第24-25页 |
(四)肾小管上皮细胞免疫共沉淀结果 | 第25-26页 |
三、分析与讨论 | 第26-30页 |
四、小结 | 第30-31页 |
第二部分 、三七皂苷对TGF-β_1诱导的NRK-52E细胞EMT的影响 | 第31-43页 |
一、材料与方法 | 第31-34页 |
(一)实验材料 | 第31-32页 |
1.细胞株来源及主要试剂 | 第31-32页 |
2.主要仪器 | 第32页 |
(二)实验方法 | 第32-34页 |
1.细胞复苏 | 第32页 |
2.细胞培养 | 第32页 |
3.细胞计数 | 第32-33页 |
4.细胞分组及干预 | 第33页 |
5.Real-time PCR检测细胞mRNA的表达 | 第33页 |
6.Western blot检测细胞蛋白的表达 | 第33页 |
7.统计学分析 | 第33-34页 |
二、实验结果 | 第34-39页 |
(一)肾小管上皮细胞PCR结果 | 第34-36页 |
1.各组细胞α-SMA和 E-cadherin mRNA的表达 | 第34页 |
2.细胞SIRT1,TGF-β_1,Smad3和Smad4 mRNA的表达 | 第34-36页 |
(二)肾小管上皮细胞Western-blot结果 | 第36-39页 |
1.各组细胞内α-SMA和E-cadherin蛋白的表达 | 第36-37页 |
2.各组细胞内TGF-β_1和SIRT1蛋白的表达 | 第37-39页 |
三、分析与讨论 | 第39-42页 |
四、小结 | 第42-43页 |
结论 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-49页 |
附图 | 第49-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
文献综述 | 第51-66页 |
参考文献 | 第60-66页 |