摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
缩略词表 | 第8-12页 |
第一章 前言 | 第12-29页 |
1.1 引言 | 第12-13页 |
1.2 低温对植物的影响 | 第13-18页 |
1.2.1 低温影响植物光合作用及叶绿体的稳定 | 第13-16页 |
1.2.2 低温影响核糖体的功能 | 第16页 |
1.2.3 低温损伤膜脂结构 | 第16-17页 |
1.2.4 低温诱导植物脱水 | 第17页 |
1.2.5 低温影响植物的生长和发育 | 第17-18页 |
1.3 植物对低温胁迫的应答 | 第18-21页 |
1.3.1 ABA响应途径 | 第18-19页 |
1.3.2 CBF响应途径 | 第19-20页 |
1.3.3 ROS响应途径 | 第20页 |
1.3.4 其他低温响应途径 | 第20-21页 |
1.4 低温下活性氧的产生和清除 | 第21-23页 |
1.4.1 活性氧的产生 | 第22页 |
1.4.2 活性氧的清除 | 第22-23页 |
1.5 水稻耐低温研究进展 | 第23-26页 |
1.5.1 水稻耐低温QTLs研究 | 第24-25页 |
1.5.2 水稻耐低温GWAS研究 | 第25页 |
1.5.3 水稻耐低温转录组研究 | 第25-26页 |
1.5.4 水稻耐低温蛋白组研究 | 第26页 |
1.6 广西普通野生稻耐冷研究的目的和意义 | 第26-29页 |
第二章 材料和方法 | 第29-40页 |
2.1 植物材料 | 第29-30页 |
2.2 冷胁迫表型鉴定 | 第30页 |
2.3 QTL定位方法 | 第30-31页 |
2.3.1 定位群体构建 | 第30页 |
2.3.2 多态性分子标记筛选 | 第30页 |
2.3.3 F_2基因型鉴定 | 第30-31页 |
2.3.4 遗传连锁作图 | 第31页 |
2.4 比较转录组学分析 | 第31-32页 |
2.4.1 转录组学分析样品采集 | 第31页 |
2.4.2 RNA的提取和cDNA文库构建及测序 | 第31页 |
2.4.3 RNA-seq数据处理及转录组学分析 | 第31-32页 |
2.5 比较蛋白组学分析 | 第32-35页 |
2.5.1 植物材料培养及冷处理样品采集 | 第32-33页 |
2.5.2 蛋白样品制备 | 第33页 |
2.5.3 蛋白样品的预处理 | 第33页 |
2.5.4 iTRAQ标记 | 第33-34页 |
2.5.5 多肽分离 | 第34页 |
2.5.6 EASY-nLC结合Orbitrap质谱分析 | 第34页 |
2.5.7 蛋白质的鉴定和定量 | 第34页 |
2.5.8 差异表达蛋白(DEP)检测标准 | 第34-35页 |
2.5.9 蛋白聚类分析 | 第35页 |
2.5.10 GO富集分析,功能分类和表达模式分析 | 第35页 |
2.6 Quantitative RT-PCR分析 | 第35-36页 |
2.7 组织化学ROS检测,ROS清除酶活性测量和ASA处理实验 | 第36-38页 |
2.7.1 DAB染色法检测组织中H_2O_2 | 第36页 |
2.7.2 NBT染色法检测O~(2-) | 第36页 |
2.7.3 ROS清除酶活性测量 | 第36-38页 |
2.7.4 ASA对植物低温胁迫的影响 | 第38页 |
2.8 其他生理指标测定 | 第38-40页 |
2.8.1 含水量测定 | 第38页 |
2.8.2 电导率测定 | 第38-39页 |
2.8.3 MDA含量测定 | 第39页 |
2.8.4 叶绿素含量测定 | 第39-40页 |
第三章 结果分析 | 第40-64页 |
3.1 qCTS12定位在12号染色体上1.36Mb范围内 | 第40-44页 |
3.2 qCTS12介导冷胁迫下叶绿体中相关基因表达下调 | 第44-51页 |
3.2.1 转录组数据获取 | 第44-45页 |
3.2.2 DC90和9311基因表达水平十分相似 | 第45页 |
3.2.3 DC90和9311冷胁迫下差异表达基因的鉴定 | 第45-46页 |
3.2.4 冷胁迫下DC90和9311位于叶绿体中的基因大量下调 | 第46-47页 |
3.2.5 DC90在冷胁迫下叶绿体及其核糖体相关基因表达下调 | 第47-51页 |
3.3 qCTS12介导叶绿体及其核糖体蛋白冷驯化和去冷驯化过程 | 第51-59页 |
3.3.1 蛋白组数据获取 | 第51页 |
3.3.2 DC90和9311冷胁迫阶段和恢复阶段蛋白表达差异明显 | 第51-52页 |
3.3.3 DC90和9311中差异表达蛋白的鉴定 | 第52-53页 |
3.3.4 DC90和9311中DEPs主要位于叶绿体 | 第53-54页 |
3.3.5 DC90和9311叶绿体及其核糖体蛋白在胁迫阶段呈现不同的变化模式 | 第54-59页 |
3.4 qCTS12参与维持冷胁迫下H_2O_2产生与清除间平衡 | 第59-64页 |
3.4.1 DC90和9311冷胁迫下过氧化氢清除能力存在显著差异 | 第59-60页 |
3.4.2 提升9311过氧化氢清除能力增强了其耐冷性 | 第60-62页 |
3.4.3 qCTS12介导冷胁迫下过氧化氢酶活性的稳定涉及复杂的机制 | 第62页 |
3.4.4 DC90和9311冷胁迫下其他生理指标比较 | 第62-64页 |
第四章 讨论 | 第64-69页 |
4.1 qCTS12是一个新的水稻苗期耐冷QTL | 第64页 |
4.2 水稻低温响应下游调控主要发生在叶绿体中 | 第64-65页 |
4.3 水稻调控叶绿体及其核糖体蛋白冷驯化和去冷驯化过程来适应冷胁迫 | 第65-66页 |
4.4 ROS产生与清除的平衡对叶绿体蛋白去冷驯化作用至关重要 | 第66-67页 |
4.5 qCTS12可能通过介导H_2O_2产生与清除的平衡来提升水稻耐低温能力 | 第67页 |
4.6 下步工作 | 第67-69页 |
参考文献 | 第69-80页 |
附录 | 第80-86页 |
致谢 | 第86-87页 |
攻读学位期间论文发表情况 | 第87页 |