摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
缩写词 | 第10-11页 |
引言 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-25页 |
1.1 棕色棉研究进展 | 第12-13页 |
1.1.1 棕色棉纤维遗传控制的研究 | 第12-13页 |
1.1.2 棕色棉色素本质及成分的研究 | 第13页 |
1.2 原花色素的研究进展 | 第13-16页 |
1.2.1 原花色素的结构特征和生物学功能 | 第13-14页 |
1.2.2 原花色素的生物合成、转运和氧化聚合 | 第14-16页 |
1.3 MATE基因家族 | 第16-23页 |
1.3.1 MATE基因家族的基本特征 | 第16-17页 |
1.3.2 MATE转运蛋白的结构和转运机制 | 第17页 |
1.3.3 MATE转运蛋白的生理功能 | 第17-23页 |
1.4 研究的目的意义及技术路线 | 第23-25页 |
第二章 陆地棉MATE家族基因的鉴定及表达分析 | 第25-39页 |
2.1 实验材料 | 第25页 |
2.1.1 植物材料 | 第25页 |
2.1.2 主要试剂 | 第25页 |
2.2 实验方法 | 第25-29页 |
2.2.1 棉花RNA的提取及CDNA的第一链的合成 | 第25-27页 |
2.2.2 陆地棉MATE家族基因的鉴定与生物信息学分析 | 第27-28页 |
2.2.3 MATE家族基因的表达分析 | 第28-29页 |
2.3 结果与分析 | 第29-39页 |
2.3.1 MATE家族基因的鉴定与命名 | 第29-30页 |
2.3.2 MATE家族基因的进化关系分析 | 第30页 |
2.3.3 MATE家族基因的保守域和结构分析 | 第30-34页 |
2.3.4 MATE家族基因的染色体定位 | 第34页 |
2.3.5 MATE家族基因的表达模式分析 | 第34-39页 |
第三章 彩色棉MATE家族基因的克隆及功能分析 | 第39-57页 |
3.1 实验材料 | 第39-40页 |
3.1.1 植物材料 | 第39页 |
3.1.2 菌株与载体 | 第39页 |
3.1.3 主要试剂 | 第39页 |
3.1.4 主要仪器设备 | 第39页 |
3.1.5 抗生素 | 第39-40页 |
3.2 实验方法 | 第40-48页 |
3.2.1 GhMATE13、GhMATE23基因全长扩增 | 第40页 |
3.2.2 目的片段连接载体 | 第40-42页 |
3.2.3 GhMATE基因表达载体的构建 | 第42-45页 |
3.2.4 拟南芥遗传转化 | 第45-46页 |
3.2.5 转基因植株的表达量分析 | 第46-47页 |
3.2.6 拟南芥原花色素含量的测定 | 第47-48页 |
3.3 结果与分析 | 第48-57页 |
3.3.1 GhMATE13、GhMATE23基因的克隆 | 第48-49页 |
3.3.2 植物表达载体和干扰载体的构建 | 第49页 |
3.3.3 表达载体转化农杆菌 | 第49-50页 |
3.3.4 拟南芥的转化及分子鉴定 | 第50-52页 |
3.3.5 拟南芥转基因阳性植株原花青素含量的测定 | 第52-55页 |
3.3.6 拟南芥原花青素生物合成相关基因的表达 | 第55-56页 |
3.3.7 拟南芥转基因株系表型观察 | 第56-57页 |
第四章 MATE及其上游基因的棉花遗传转化 | 第57-66页 |
4.1 实验材料 | 第57页 |
4.1.1 植物材料 | 第57页 |
4.1.2 菌株、质粒与载体 | 第57页 |
4.2 实验方法 | 第57-62页 |
4.2.1 利用CRISPR/Cas9技术定点编辑MATE、ANR、LAR基因 | 第57-60页 |
4.2.2 棉花的遗传转化 | 第60-62页 |
4.3 结果与分析 | 第62-66页 |
4.3.1 ANR、LAR基因编辑载体构建 | 第62-63页 |
4.3.2 彩色棉茎尖的遗传转化 | 第63-64页 |
4.3.3 农杆菌介导下胚轴的转化 | 第64页 |
4.3.4 转基因棉花的检测 | 第64-66页 |
第五章 讨论 | 第66-68页 |
5.1 MATE家族基因功能研究 | 第66-67页 |
5.2 GhMATE13、GhMATE23的功能分析 | 第67-68页 |
第六章 总结与展望 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-75页 |
附录 | 第75-82页 |
致谢 | 第82-83页 |
作者简介 | 第83-84页 |
石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表 | 第84页 |