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棕色棉纤维MATE基因的克隆及功能初步研究

摘要第5-6页
Abstract第6-7页
缩写词第10-11页
引言第11-12页
第一章 文献综述第12-25页
    1.1 棕色棉研究进展第12-13页
        1.1.1 棕色棉纤维遗传控制的研究第12-13页
        1.1.2 棕色棉色素本质及成分的研究第13页
    1.2 原花色素的研究进展第13-16页
        1.2.1 原花色素的结构特征和生物学功能第13-14页
        1.2.2 原花色素的生物合成、转运和氧化聚合第14-16页
    1.3 MATE基因家族第16-23页
        1.3.1 MATE基因家族的基本特征第16-17页
        1.3.2 MATE转运蛋白的结构和转运机制第17页
        1.3.3 MATE转运蛋白的生理功能第17-23页
    1.4 研究的目的意义及技术路线第23-25页
第二章 陆地棉MATE家族基因的鉴定及表达分析第25-39页
    2.1 实验材料第25页
        2.1.1 植物材料第25页
        2.1.2 主要试剂第25页
    2.2 实验方法第25-29页
        2.2.1 棉花RNA的提取及CDNA的第一链的合成第25-27页
        2.2.2 陆地棉MATE家族基因的鉴定与生物信息学分析第27-28页
        2.2.3 MATE家族基因的表达分析第28-29页
    2.3 结果与分析第29-39页
        2.3.1 MATE家族基因的鉴定与命名第29-30页
        2.3.2 MATE家族基因的进化关系分析第30页
        2.3.3 MATE家族基因的保守域和结构分析第30-34页
        2.3.4 MATE家族基因的染色体定位第34页
        2.3.5 MATE家族基因的表达模式分析第34-39页
第三章 彩色棉MATE家族基因的克隆及功能分析第39-57页
    3.1 实验材料第39-40页
        3.1.1 植物材料第39页
        3.1.2 菌株与载体第39页
        3.1.3 主要试剂第39页
        3.1.4 主要仪器设备第39页
        3.1.5 抗生素第39-40页
    3.2 实验方法第40-48页
        3.2.1 GhMATE13、GhMATE23基因全长扩增第40页
        3.2.2 目的片段连接载体第40-42页
        3.2.3 GhMATE基因表达载体的构建第42-45页
        3.2.4 拟南芥遗传转化第45-46页
        3.2.5 转基因植株的表达量分析第46-47页
        3.2.6 拟南芥原花色素含量的测定第47-48页
    3.3 结果与分析第48-57页
        3.3.1 GhMATE13、GhMATE23基因的克隆第48-49页
        3.3.2 植物表达载体和干扰载体的构建第49页
        3.3.3 表达载体转化农杆菌第49-50页
        3.3.4 拟南芥的转化及分子鉴定第50-52页
        3.3.5 拟南芥转基因阳性植株原花青素含量的测定第52-55页
        3.3.6 拟南芥原花青素生物合成相关基因的表达第55-56页
        3.3.7 拟南芥转基因株系表型观察第56-57页
第四章 MATE及其上游基因的棉花遗传转化第57-66页
    4.1 实验材料第57页
        4.1.1 植物材料第57页
        4.1.2 菌株、质粒与载体第57页
    4.2 实验方法第57-62页
        4.2.1 利用CRISPR/Cas9技术定点编辑MATE、ANR、LAR基因第57-60页
        4.2.2 棉花的遗传转化第60-62页
    4.3 结果与分析第62-66页
        4.3.1 ANR、LAR基因编辑载体构建第62-63页
        4.3.2 彩色棉茎尖的遗传转化第63-64页
        4.3.3 农杆菌介导下胚轴的转化第64页
        4.3.4 转基因棉花的检测第64-66页
第五章 讨论第66-68页
    5.1 MATE家族基因功能研究第66-67页
    5.2 GhMATE13、GhMATE23的功能分析第67-68页
第六章 总结与展望第68-69页
参考文献第69-75页
附录第75-82页
致谢第82-83页
作者简介第83-84页
石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表第84页

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