摘要 | 第6-7页 |
abstract | 第7-8页 |
英文缩略表 | 第12-13页 |
第一章 引言 | 第13-29页 |
1.1 植物花色素研究进展 | 第13-16页 |
1.1.1 植物花色成分组成 | 第13-14页 |
1.1.2 花青素苷生化合成途径的分子生物学研究 | 第14页 |
1.1.3 百合花色素研究进展 | 第14-16页 |
1.2 植物花青素苷转运机理的研究进展 | 第16-20页 |
1.2.1 GST参与的花青素苷转运 | 第16页 |
1.2.2 MRP参与的花青素苷转运 | 第16-17页 |
1.2.3 BTL-homologue(Bilitranslocase-homologue)参与的花青素苷转运 | 第17页 |
1.2.4 MATE转运蛋白参与的花青素苷转运 | 第17-20页 |
1.2.5 囊泡参与的花青素苷转运 | 第20页 |
1.3 拟南芥DTX35基因研究进展 | 第20页 |
1.4 病毒诱导基因沉默研究概况 | 第20-26页 |
1.4.1 VIGS的分子机制 | 第21-22页 |
1.4.2 VIGS技术应用的优缺点 | 第22-23页 |
1.4.3 VIGS技术的影响因素 | 第23-25页 |
1.4.4 VIGS技术的应用领域 | 第25-26页 |
1.4.5 VIGS技术在百合基因功能研究中的前景 | 第26页 |
1.5 本研究目的意义及研究内容 | 第26-29页 |
1.5.1 研究的目的和意义 | 第26-27页 |
1.5.2 研究的主要内容 | 第27-28页 |
1.5.3 技术路线 | 第28-29页 |
第二章 LhDTX35基因克隆及表达模式分析 | 第29-47页 |
2.1 材料与方法 | 第29-36页 |
2.1.1 植物材料 | 第29页 |
2.1.2 试剂与试剂盒 | 第29-30页 |
2.1.3 仪器设备 | 第30页 |
2.1.4 LhDTX35全长扩增 | 第30-35页 |
2.1.5 LhDTX35基因全长生物信息学分析 | 第35-36页 |
2.1.6 LhDTX35基因的表达模式分析 | 第36页 |
2.2 结果与分析 | 第36-45页 |
2.2.1 LhDTX35全长扩增 | 第36-39页 |
2.2.2 LhDTX35系统进化树分析 | 第39页 |
2.2.3 LhDTX35基因编码蛋白质序列的特性分析 | 第39-44页 |
2.2.4 LhDTX35基因的时空表达分析 | 第44-45页 |
2.3 讨论 | 第45-47页 |
第三章 LhDTX35基因的亚细胞定位研究 | 第47-53页 |
3.1 材料与方法 | 第47-50页 |
3.1.1 植物材料 | 第47页 |
3.1.2 菌株及载体 | 第47页 |
3.1.3 试剂与试剂盒 | 第47页 |
3.1.4 LhDTX35亚细胞定位载体构建及烟草转化 | 第47-50页 |
3.2 结果与分析 | 第50-52页 |
3.2.1 PCMBIA2300-GFP-LhDTX35亚细胞定位载体构建 | 第50-51页 |
3.2.2 PCMBIA2300-GFP-LhDTX35亚细胞定位载体转化烟草 | 第51-52页 |
3.3 讨论 | 第52-53页 |
第四章 LhDTX35基因的拟南芥DTX35突变体互补实验研究 | 第53-59页 |
4.1 材料与方法 | 第53-55页 |
4.1.1 植物材料 | 第53页 |
4.1.2 菌株及载体 | 第53页 |
4.1.3 PCMBIA3301-LhDTX35载体构建 | 第53-55页 |
4.1.4 拟南芥转化 | 第55页 |
4.2 结果与分析 | 第55-58页 |
4.2.1 PCMBIA3301-LhDTX35表达载体的构建 | 第55-56页 |
4.2.2 功能互补实验 | 第56-58页 |
4.3 讨论 | 第58-59页 |
第五章 百合VIGS体系构建及百合花色VIGS体系验证LhDTX35基因功能 | 第59-77页 |
5.1 材料与方法 | 第60-64页 |
5.1.1 试验材料 | 第60页 |
5.1.2 菌株及载体 | 第60页 |
5.1.3 实验试剂 | 第60页 |
5.1.4 总RNA提取及反转录PCR | 第60-61页 |
5.1.5 cDNA片段克隆 | 第61页 |
5.1.6 载体构建 | 第61-62页 |
5.1.7 载体转入农杆菌GV3101 | 第62页 |
5.1.8 转化农杆菌鉴定 | 第62-63页 |
5.1.9 农杆菌的接种 | 第63页 |
5.1.10 TRV检测 | 第63页 |
5.1.11 荧光定量(RT-qPCR)分析 | 第63-64页 |
5.2 结果与分析 | 第64-75页 |
5.2.1 百合四个品种中PDS基因片段,MYB基因片段及珊瑚樱中ChlH基因片段分离和序列分析 | 第64-65页 |
5.2.2 百合TRV2-LhPDS,TRV2-LhMYB载体和珊瑚樱TRV2-SpChlH载体结构验证 | 第65-66页 |
5.2.3 TRV2-LhPDS载体诱导百合幼苗PDS基因沉默 | 第66-70页 |
5.2.4 TRV2-LhMYB载体在百合花中诱导MYB基因沉默 | 第70-73页 |
5.2.5 TRV2-LhDTX35载体在百合花中诱导LhDTX35基因沉默 | 第73-75页 |
5.3 讨论 | 第75-77页 |
第六章 全文结论 | 第77-78页 |
参考文献 | 第78-89页 |
附录 | 第89-101页 |
致谢 | 第101-102页 |
作者简介 | 第102页 |