摘要 | 第2-4页 |
abstract | 第4-5页 |
引言 | 第8-9页 |
材料与方法 | 第9-22页 |
1 仪器、试剂和耗材 | 第9-11页 |
1.1 主要仪器 | 第9页 |
1.2 主要试剂和耗材 | 第9-10页 |
1.3 常用试剂配制 | 第10-11页 |
2 细胞系的选择 | 第11-12页 |
3 细胞处理 | 第12-13页 |
3.1 首次传代前细胞的复苏 | 第12页 |
3.2 细胞传代 | 第12页 |
3.3 5-Aza-dc作用 | 第12-13页 |
4 MAP9启动子甲基化检测 | 第13-15页 |
4.1 细胞系DNA的提取 | 第13页 |
4.2 DNA样本的焦亚硫酸盐修饰 | 第13-14页 |
4.3 亚硫酸氢盐基因组测序(BGS) | 第14-15页 |
5 MAP9基因mRNA检测 | 第15-17页 |
5.1 细胞系RNA的提取 | 第15页 |
5.2 RNA样品中gDNA去除 | 第15-16页 |
5.3 cDNA合成 | 第16页 |
5.4 实时荧光定量PCR | 第16-17页 |
5.5 Real-timePCR结果数据分析 | 第17页 |
6 胃癌细胞系中MAP9蛋白表达 | 第17-19页 |
6.1 胃癌细胞系蛋白提取 | 第17页 |
6.2 Westernblotting检测胃癌细胞系MAP9蛋白水平 | 第17-19页 |
7 免疫组化检测胃癌组织MAP9蛋白表达 | 第19-20页 |
8 LMP2A和EBER1过表达细胞模型建立 | 第20-21页 |
9 统计学分析 | 第21-22页 |
结果 | 第22-30页 |
1 Real-timePCR检测胃癌细胞系基因的转录表达 | 第22-23页 |
2 Westernblotting检测胃癌细胞系中MAP9蛋白表达 | 第23-24页 |
3 MAP9启动子甲基化状态检测 | 第24-26页 |
3.1 BGS检测MAP9启动子甲基化状态 | 第24-26页 |
3.2 Real-timePCR检测药物作用前后胃癌细胞系中MAP9转录表达 | 第26页 |
4 免疫组化检测胃癌组织中MAP9表达情况 | 第26-27页 |
5 EBV潜伏期基因LMP2A、EBER1对MAP9的影响 | 第27-30页 |
5.1 外源性LMP2A表达对MAP9的影响 | 第27-28页 |
5.2 外源性EBER1表达对MAP9的影响 | 第28-30页 |
讨论 | 第30-33页 |
结论 | 第33-34页 |
参考文献 | 第34-36页 |
综述 | 第36-50页 |
综述参考文献 | 第44-50页 |
攻读学位期间的学术成果 | 第50-51页 |
缩略词表 | 第51-52页 |
致谢 | 第52-53页 |