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新发鸭生长迟缓病毒ELISA抗体检测方法的建立及传代致弱研究

摘要第6-7页
abstract第7-8页
英文缩略表第13-14页
第一章 引言第14-22页
    1.1 新发鸭生长迟缓病的概述第14页
    1.2 新发鸭生长迟缓病的临床症状及病理变化第14-15页
        1.2.1 临床症状第14-15页
        1.2.2 剖解症状第15页
    1.3 新发鸭生长迟缓病的流行病学第15-16页
    1.4 新发鸭生长迟缓病的诊断方法第16-17页
        1.4.1 临床诊断及病理学诊断第16页
        1.4.2 实验室诊断第16-17页
    1.5 新发鸭生长迟缓病的防控与治疗第17-18页
    1.6 ELISA技术概述第18-19页
        1.6.1 ELISA技术原理第18页
        1.6.2 ELISA技术的特点第18-19页
        1.6.3 ELISA技术的应用第19页
    1.7 单克隆抗体技术概述第19-20页
        1.7.1 单克隆抗体技术的原理第19-20页
        1.7.2 单克隆抗体制备的技术路线第20页
        1.7.3 单克隆抗体技术的特点第20页
        1.7.4 单克隆抗体技术的应用第20页
    1.8 本研究的目的和意义第20-22页
第二章 鸭生长迟缓病毒ANHUI2株单克隆抗体的制备及鉴定第22-33页
    2.1 材料第22-23页
        2.1.1 Anhui2病毒、细胞株及血清第22页
        2.1.2 实验动物第22页
        2.1.3 主要试剂第22-23页
        2.1.4 仪器设备第23页
    2.2 方法第23-28页
        2.2.1 Anhui2抗原的制备第23-24页
        2.2.2 BALB/c小鼠的免疫第24页
        2.2.3 间接ELISA筛选方法的建立第24-25页
        2.2.4 饲养层细胞的制备第25页
        2.2.5 骨髓瘤细胞的准备第25页
        2.2.6 脾细胞的制备第25-26页
        2.2.7 细胞融合第26页
        2.2.8 杂交瘤细胞株的筛选第26-27页
        2.2.9 阳性杂交瘤细胞株的冻存与复苏第27页
        2.2.10 单克隆抗体腹水的制备第27页
        2.2.11 单克隆抗体特性的鉴定第27-28页
    2.3 结果第28-31页
        2.3.1 病毒的纯化结果第28页
        2.3.2 间接ELISA筛选方法的建立第28页
        2.3.3 免疫小鼠血清效价的测定第28-29页
        2.3.4 杂交瘤细胞的筛选第29页
        2.3.5 小鼠腹水单克隆抗体的制备第29页
        2.3.6 单克隆抗体特异性鉴定第29-31页
    2.4 讨论第31-33页
        2.4.1 Anhui2抗原的纯化第31页
        2.4.2 小鼠的免疫第31页
        2.4.3 融合细胞的筛选第31-32页
        2.4.4 细胞融合的影响因素第32-33页
第三章 鸭生长迟缓病毒ANHUI2株阻断ELISA的建立第33-40页
    3.1 材料第33页
        3.1.1 血清样本第33页
        3.1.2 主要试剂第33页
        3.1.3 主要仪器第33页
    3.2 方法第33-36页
        3.2.1 阻断ELISA方法的操作步骤第33-34页
        3.2.2 被检血清最佳浓度的确定第34页
        3.2.3 最佳单克隆抗体的确定第34页
        3.2.4 单克隆抗体最佳浓度的确定第34-35页
        3.2.5 酶标二抗最佳浓度的确定第35页
        3.2.6 阻断ELISA诊断方法判定标准的确定第35页
        3.2.7 特异性检验第35-36页
        3.2.8 敏感性试验第36页
    3.3 结果第36-38页
        3.3.1 被检鸭血清最佳稀释度的确定第36页
        3.3.2 最佳单克隆抗体的确定第36页
        3.3.3 单克隆抗体最佳浓度的确定第36-37页
        3.3.4 酶标二抗最佳浓度的确定第37页
        3.3.5 阻断ELISA诊断方法判定标准的确定第37页
        3.3.6 特异性实验结果第37-38页
        3.3.7 敏感性实验结果第38页
    3.4 讨论第38-40页
第四章 鸭生长迟缓病毒ANHUI2株鸡胚传代致弱的研究第40-48页
    4.1 材料第40-41页
        4.1.1 病毒、实验动物第40页
        4.1.2 主要试剂第40页
        4.1.3 主要仪器第40-41页
    4.2 方法第41-43页
        4.2.1 Anhui2毒株鸡胚传代适应第41页
        4.2.2 不同代次鸡胚尿囊液病毒滴度的测定第41页
        4.2.3 Anhui2野毒和传代毒的致病性实验第41-43页
    4.3 结果第43-47页
        4.3.1 SPF鸡胚传代第43页
        4.3.2 Anhui2传代毒第40、80、110、111代的毒力测定结果第43页
        4.3.3 Anhui2野毒和100代传代毒致病性实验结果第43-45页
        4.3.4 Anhui2第111代传代毒免疫保护实验结果第45-46页
        4.3.5 免疫组、攻毒对照组以及空白对照组免疫后抗体水平的检测结果第46-47页
    4.4 讨论第47-48页
全文结论第48-49页
参考文献第49-54页
致谢第54-55页
作者简介第55页

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