摘要 | 第6-7页 |
abstract | 第7-8页 |
英文缩略表 | 第13-14页 |
第一章 引言 | 第14-22页 |
1.1 新发鸭生长迟缓病的概述 | 第14页 |
1.2 新发鸭生长迟缓病的临床症状及病理变化 | 第14-15页 |
1.2.1 临床症状 | 第14-15页 |
1.2.2 剖解症状 | 第15页 |
1.3 新发鸭生长迟缓病的流行病学 | 第15-16页 |
1.4 新发鸭生长迟缓病的诊断方法 | 第16-17页 |
1.4.1 临床诊断及病理学诊断 | 第16页 |
1.4.2 实验室诊断 | 第16-17页 |
1.5 新发鸭生长迟缓病的防控与治疗 | 第17-18页 |
1.6 ELISA技术概述 | 第18-19页 |
1.6.1 ELISA技术原理 | 第18页 |
1.6.2 ELISA技术的特点 | 第18-19页 |
1.6.3 ELISA技术的应用 | 第19页 |
1.7 单克隆抗体技术概述 | 第19-20页 |
1.7.1 单克隆抗体技术的原理 | 第19-20页 |
1.7.2 单克隆抗体制备的技术路线 | 第20页 |
1.7.3 单克隆抗体技术的特点 | 第20页 |
1.7.4 单克隆抗体技术的应用 | 第20页 |
1.8 本研究的目的和意义 | 第20-22页 |
第二章 鸭生长迟缓病毒ANHUI2株单克隆抗体的制备及鉴定 | 第22-33页 |
2.1 材料 | 第22-23页 |
2.1.1 Anhui2病毒、细胞株及血清 | 第22页 |
2.1.2 实验动物 | 第22页 |
2.1.3 主要试剂 | 第22-23页 |
2.1.4 仪器设备 | 第23页 |
2.2 方法 | 第23-28页 |
2.2.1 Anhui2抗原的制备 | 第23-24页 |
2.2.2 BALB/c小鼠的免疫 | 第24页 |
2.2.3 间接ELISA筛选方法的建立 | 第24-25页 |
2.2.4 饲养层细胞的制备 | 第25页 |
2.2.5 骨髓瘤细胞的准备 | 第25页 |
2.2.6 脾细胞的制备 | 第25-26页 |
2.2.7 细胞融合 | 第26页 |
2.2.8 杂交瘤细胞株的筛选 | 第26-27页 |
2.2.9 阳性杂交瘤细胞株的冻存与复苏 | 第27页 |
2.2.10 单克隆抗体腹水的制备 | 第27页 |
2.2.11 单克隆抗体特性的鉴定 | 第27-28页 |
2.3 结果 | 第28-31页 |
2.3.1 病毒的纯化结果 | 第28页 |
2.3.2 间接ELISA筛选方法的建立 | 第28页 |
2.3.3 免疫小鼠血清效价的测定 | 第28-29页 |
2.3.4 杂交瘤细胞的筛选 | 第29页 |
2.3.5 小鼠腹水单克隆抗体的制备 | 第29页 |
2.3.6 单克隆抗体特异性鉴定 | 第29-31页 |
2.4 讨论 | 第31-33页 |
2.4.1 Anhui2抗原的纯化 | 第31页 |
2.4.2 小鼠的免疫 | 第31页 |
2.4.3 融合细胞的筛选 | 第31-32页 |
2.4.4 细胞融合的影响因素 | 第32-33页 |
第三章 鸭生长迟缓病毒ANHUI2株阻断ELISA的建立 | 第33-40页 |
3.1 材料 | 第33页 |
3.1.1 血清样本 | 第33页 |
3.1.2 主要试剂 | 第33页 |
3.1.3 主要仪器 | 第33页 |
3.2 方法 | 第33-36页 |
3.2.1 阻断ELISA方法的操作步骤 | 第33-34页 |
3.2.2 被检血清最佳浓度的确定 | 第34页 |
3.2.3 最佳单克隆抗体的确定 | 第34页 |
3.2.4 单克隆抗体最佳浓度的确定 | 第34-35页 |
3.2.5 酶标二抗最佳浓度的确定 | 第35页 |
3.2.6 阻断ELISA诊断方法判定标准的确定 | 第35页 |
3.2.7 特异性检验 | 第35-36页 |
3.2.8 敏感性试验 | 第36页 |
3.3 结果 | 第36-38页 |
3.3.1 被检鸭血清最佳稀释度的确定 | 第36页 |
3.3.2 最佳单克隆抗体的确定 | 第36页 |
3.3.3 单克隆抗体最佳浓度的确定 | 第36-37页 |
3.3.4 酶标二抗最佳浓度的确定 | 第37页 |
3.3.5 阻断ELISA诊断方法判定标准的确定 | 第37页 |
3.3.6 特异性实验结果 | 第37-38页 |
3.3.7 敏感性实验结果 | 第38页 |
3.4 讨论 | 第38-40页 |
第四章 鸭生长迟缓病毒ANHUI2株鸡胚传代致弱的研究 | 第40-48页 |
4.1 材料 | 第40-41页 |
4.1.1 病毒、实验动物 | 第40页 |
4.1.2 主要试剂 | 第40页 |
4.1.3 主要仪器 | 第40-41页 |
4.2 方法 | 第41-43页 |
4.2.1 Anhui2毒株鸡胚传代适应 | 第41页 |
4.2.2 不同代次鸡胚尿囊液病毒滴度的测定 | 第41页 |
4.2.3 Anhui2野毒和传代毒的致病性实验 | 第41-43页 |
4.3 结果 | 第43-47页 |
4.3.1 SPF鸡胚传代 | 第43页 |
4.3.2 Anhui2传代毒第40、80、110、111代的毒力测定结果 | 第43页 |
4.3.3 Anhui2野毒和100代传代毒致病性实验结果 | 第43-45页 |
4.3.4 Anhui2第111代传代毒免疫保护实验结果 | 第45-46页 |
4.3.5 免疫组、攻毒对照组以及空白对照组免疫后抗体水平的检测结果 | 第46-47页 |
4.4 讨论 | 第47-48页 |
全文结论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-54页 |
致谢 | 第54-55页 |
作者简介 | 第55页 |