| 缩略语表 | 第6-8页 |
| 中文摘要 | 第8-12页 |
| 英文摘要 | 第12-15页 |
| 前言 | 第16-18页 |
| 文献回顾 | 第18-31页 |
| 第一部分 miR-291a/b-5p在小鼠着床前胚胎发育的表达及Atg5和Becn1在着床前胚胎中的动态变化 | 第31-50页 |
| 1 材料 | 第31-33页 |
| 2 方法 | 第33-39页 |
| 2.1 特殊试剂配制与移卵针制备 | 第33页 |
| 2.2 小鼠MⅡ期卵母细胞与着床前胚胎的采集 | 第33-35页 |
| 2.3 Real Time PCR | 第35-37页 |
| 2.4 小鼠MⅡ期卵母细胞与着床前胚胎的免疫荧光检测 | 第37-38页 |
| 2.5 小鼠着床前胚胎透射电镜标本的制备与检测 | 第38页 |
| 2.6 统计学分析与图形分析 | 第38-39页 |
| 3 结果 | 第39-45页 |
| 3.1 miR-291a/b-5p在小鼠MⅡ期卵母细胞和着床前胚胎中的表达 | 第39页 |
| 3.2 Atg5和Becn1在小鼠MⅡ期卵母细胞和着床前胚胎中的表达 | 第39-41页 |
| 3.3 在小鼠MⅡ期卵母细胞和着床前胚胎中，miR-291a/b-5p与自噬相关基因Atg5和Becn1动态表达的对应关系 | 第41页 |
| 3.4 免疫荧光检测小鼠MⅡ期卵母细胞和着床前胚胎中自噬的动态变化 | 第41-44页 |
| 3.5 透射电镜检测小鼠MⅡ期卵母细胞和受精卵中自噬的变化 | 第44-45页 |
| 4 讨论 | 第45-50页 |
| 第二部分 miR-291a/b-5p通过靶向Atg5和Becn1抑制NIH/3T3细胞自噬体形成 | 第50-67页 |
| 1 材料 | 第50-52页 |
| 2 方法 | 第52-59页 |
| 2.1 双荧光素酶报告基因载体构建 | 第52-54页 |
| 2.2 细胞培养与转染 | 第54-56页 |
| 2.3 双荧光素酶活性检测 | 第56页 |
| 2.4 Real Time PCR检测 | 第56-58页 |
| 2.5 Western blot检测 | 第58页 |
| 2.6 统计学分析与图形分析 | 第58-59页 |
| 3 结果 | 第59-65页 |
| 3.1 miR-291a/b-5p靶向Atg5和Becn1序列的生物信息学分析结果 | 第59-60页 |
| 3.2 双荧光素酶报告基因载体测序结果 | 第60-61页 |
| 3.3 Luciferase Assay检测miR-291a/b-5p对Atg5和Becn1的靶向作用 | 第61页 |
| 3.4 过表达miR-291a/b-5p对Atg5和Becn1 mRNA表达的影响 | 第61-63页 |
| 3.5 过表达miR-291a/b-5p对雷帕霉素诱导自噬后NIH/3T3细胞中Atg5和Becn1蛋白表达的影响 | 第63页 |
| 3.6 过表达miR-291a/b-5p对雷帕霉素诱导自噬后NIH/3T3细胞自噬体形成的影响 | 第63-65页 |
| 4 讨论 | 第65-67页 |
| 第三部分 抑制miR-291a-5p对小鼠着床前胚胎Atg5和Becn1表达及早期胚胎发育的影响 | 第67-78页 |
| 1 材料 | 第67-69页 |
| 2 方法 | 第69-72页 |
| 2.1 特殊试剂配制 | 第69页 |
| 2.2 小鼠 1-cell期胚胎的获取和采集 | 第69-70页 |
| 2.3 小鼠 1-cell期胚胎的胞浆显微注射和体外培养 | 第70-71页 |
| 2.4 Real Time PCR | 第71页 |
| 2.5 统计学分析 | 第71-72页 |
| 3 结果 | 第72-76页 |
| 3.1 胞浆显微注射后miR-291a-5p inhibitor在小鼠着床前胚胎中的表达 | 第72-73页 |
| 3.2 胞浆显微注射miR-291a-5p inhibitor对miR-291a-5p的抑制效应及其对Atg5和Becn1mRNA表达的影响 | 第73页 |
| 3.3 胞浆显微注射miR-291a-5p inhibitor对小鼠着床前胚胎发育的影响 | 第73-76页 |
| 4 讨论 | 第76-78页 |
| 小结 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-93页 |
| 个人简历和研究成果 | 第93-94页 |
| 致谢 | 第94-95页 |
