摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
文献综述 | 第12-28页 |
第一章 水通道蛋白相关研究进展 | 第12-21页 |
1.1 水通道蛋白的发现 | 第12-14页 |
1.1.1 水通道的早期研究 | 第12-13页 |
1.1.2 第一个水通道蛋白的发现 | 第13-14页 |
1.2 水通道蛋白的结构 | 第14-15页 |
1.2.1 NPA 结构域与单体结构 | 第14-15页 |
1.2.2 四聚体结构 | 第15页 |
1.3 水通道蛋白的功能 | 第15-19页 |
1.3.1 AQP0 | 第16页 |
1.3.2 AQP1 | 第16-17页 |
1.3.3 AQP2 | 第17页 |
1.3.4 AQP3 | 第17页 |
1.3.5 AQP4 | 第17-18页 |
1.3.6 AQP5 | 第18页 |
1.3.7 AQP6 | 第18页 |
1.3.8 AQP7 | 第18页 |
1.3.9 AQP8 | 第18-19页 |
1.3.10 AQP9 | 第19页 |
1.4 水通道蛋白分布 | 第19-21页 |
1.4.1 在动物体内的分布 | 第19-20页 |
1.4.2 在植物上的分布 | 第20-21页 |
第二章 生殖系统内液体平衡 | 第21-28页 |
2.1 子宫内液体平衡 | 第21-25页 |
2.1.1 甾体激素与子宫内液体平衡 | 第22-24页 |
2.1.2 水通道与离子通道参与子宫腔内液体平衡 | 第24-25页 |
2.2 卵巢内液体平衡 | 第25-26页 |
2.3 输卵管内液体平衡 | 第26-28页 |
2.3.1 输卵管液体的组成 | 第26-27页 |
2.3.2 输卵管腔液体的功能 | 第27-28页 |
实验研究 | 第28-70页 |
第三章 水通道蛋白参与激素调控下小鼠卵巢囊内液体的平衡 | 第28-48页 |
3.1 材料 | 第29-30页 |
3.1.1 主要试剂 | 第29页 |
3.1.2 主要仪器 | 第29-30页 |
3.2 方法 | 第30-35页 |
3.2.1 实验动物及处理 | 第30页 |
3.2.2 构建小鼠 Aqp2、Aqp5、Gapdh 全长质粒 | 第30-33页 |
3.2.3 引物设计 PCR 反应 | 第33-34页 |
3.2.4 标准曲线的制作 | 第34页 |
3.2.5 冰冻切片制备 | 第34页 |
3.2.6 免疫荧光 | 第34-35页 |
3.2.7 石蜡切片的制作与 HE 染色 | 第35页 |
3.2.8 卵巢囊内液体的测量 | 第35页 |
3.2.9 数据分析 | 第35页 |
3.3 结果 | 第35-45页 |
3.3.1 质粒构建及鉴定 | 第35-36页 |
3.3.2 标准曲线的绘制 | 第36页 |
3.3.3 小鼠卵巢囊液体的变化 | 第36-38页 |
3.3.4 小鼠整个卵巢内水通道蛋白家族的表达 | 第38-41页 |
3.3.5 小鼠卵巢囊的结构 | 第41-43页 |
3.3.6 荧光定量 PCR 检测卵巢与卵巢囊 Aqp2 与 Aqp5 表达 | 第43-44页 |
3.3.7 免疫荧光结果 | 第44-45页 |
3.4 讨论 | 第45-47页 |
3.5 小结 | 第47-48页 |
第四章 免疫共沉淀结合质谱分析筛选与 AQP5 相互作用的蛋白 | 第48-58页 |
4.1 材料 | 第48-49页 |
4.1.1 主要试剂 | 第48-49页 |
4.1.2 主要仪器 | 第49页 |
4.2 方法 | 第49-54页 |
4.2.1 实验动物 | 第49-50页 |
4.2.2 冰冻切片制备 | 第50页 |
4.2.3 免疫荧光 | 第50页 |
4.2.4 免疫共沉淀 | 第50-52页 |
4.2.5 Western Blot | 第52-53页 |
4.2.6 银染 | 第53-54页 |
4.2.7 质谱 | 第54页 |
4.3 结果 | 第54-56页 |
4.3.1 AQP5 在小鼠唾液腺中的表达定位 | 第54页 |
4.3.2 Western Blot 检测免疫共沉淀物中 AQP5 的表达 | 第54-55页 |
4.3.3 银染分析免疫共沉淀所得到的蛋白质 | 第55-56页 |
4.3.4 质谱分析与 AQP5 相互作用的蛋白 | 第56页 |
4.4 讨论 | 第56-57页 |
4.5 小结 | 第57-58页 |
第五章 过量子宫腔液体导致小鼠胚胎异常植入及妊娠失败 | 第58-70页 |
5.1 材料 | 第59-60页 |
5.1.1 主要试剂 | 第59页 |
5.1.2 主要仪器 | 第59-60页 |
5.2 方法 | 第60-61页 |
5.2.1 实验动物及处理 | 第60-61页 |
5.2.2 RNA 提取与实时定量 PCR | 第61页 |
5.2.3 冰冻切片与 HE 染色 | 第61页 |
5.2.4 数据分析 | 第61页 |
5.3 结果 | 第61-68页 |
5.3.1 植入前子宫腔内灌注不同剂量生理盐水导致植入率下降 | 第61-62页 |
5.3.2 植入率下降并不是过量液体将胚胎冲出子宫 | 第62-64页 |
5.3.3 胚胎植入延迟与分布紊乱导致胚胎植入率下降 | 第64页 |
5.3.4 胚胎延迟植入与分布紊乱导致胚胎发育迟缓及妊娠中期流产 | 第64-66页 |
5.3.5 植入前子宫腔灌注生理盐水导致胚胎植入标志分子表达发生变化 | 第66-68页 |
5.4 讨论 | 第68-69页 |
5.5 小结 | 第69-70页 |
结论 | 第70页 |
创新点 | 第70页 |
进一步研究 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-87页 |
缩略词 | 第87-88页 |
致谢 | 第88-89页 |
作者简介 | 第89页 |