| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-18页 |
| 文献综述 | 第18-37页 |
| 前言 | 第18-19页 |
| 第一章 动物分子育种技术及其发展概述 | 第19-23页 |
| ·育种学发展历程 | 第19页 |
| ·分子标记辅助选择育种 | 第19-20页 |
| ·分子标记辅助选择概念 | 第19页 |
| ·分子标记种类 | 第19-20页 |
| ·转基因育种 | 第20-21页 |
| ·动物育种技术新进展 | 第21-22页 |
| ·全基因组选择育种概念 | 第21页 |
| ·全基因组选择育种优势 | 第21页 |
| ·全基因组选择育种影响因素 | 第21-22页 |
| ·全基因组选择在育种上应用 | 第22页 |
| ·小结 | 第22-23页 |
| 第二章 中国黄牛育种研究现状 | 第23-32页 |
| ·中国黄牛起源与进化 | 第23页 |
| ·中国黄牛育种的必要性和可能性 | 第23-24页 |
| ·中国黄牛经济性状相关候选基因研究进展 | 第24-31页 |
| ·中国黄牛生长性状候选基因研究进展 | 第25-27页 |
| ·中国黄牛肉质性状候选基因研究进展 | 第27-28页 |
| ·中国黄牛繁殖性状候选基因研究进展 | 第28-29页 |
| ·中国黄牛抗病性状候选基因研究进展 | 第29-31页 |
| ·小结 | 第31-32页 |
| 第三章 VEGF 家族成员的结构和功能 | 第32-37页 |
| ·VEGF 家族成员及其结构特征 | 第32-34页 |
| ·VEGF 家族成员 | 第32页 |
| ·VEGF 鉴定和命名 | 第32页 |
| ·VEGF 结构 | 第32-33页 |
| ·VEGF-B 结构 | 第33页 |
| ·VEGF 受体及其信号转导机制 | 第33-34页 |
| ·VEGF 基因家族功能 | 第34-36页 |
| ·VEGF 在血管生成过程中作用机理和生物学功能 | 第34-35页 |
| ·VEGF 在正常生理和病理血管生成中作用 | 第35页 |
| ·VEGF 和VEGF-B 对动物生长发育作用 | 第35-36页 |
| ·VEGF 与家畜育种研究 | 第36页 |
| ·小结 | 第36-37页 |
| 试验研究 | 第37-99页 |
| 第四章 黄牛VEGF 基因遗传变异及其与南阳牛生长性状关联 | 第37-48页 |
| ·材料和方法 | 第37-39页 |
| ·动物来源 | 第37页 |
| ·主要溶液与缓冲液 | 第37页 |
| ·DNA 提取 | 第37页 |
| ·引物设计和PCR 反应条件 | 第37-38页 |
| ·SSCP 试验步骤 | 第38页 |
| ·核苷酸测序分析 | 第38页 |
| ·统计分析 | 第38-39页 |
| ·结果与分析 | 第39-43页 |
| ·三个黄牛品种VEGF 基因PCR-SSCP 多态性 | 第39页 |
| ·三个黄牛品种VEGF 基因SNPs 检测 | 第39-41页 |
| ·黄牛VEGF 基因变异群体遗传学特征 | 第41-42页 |
| ·黄牛VEGF 基因多态性与南阳牛生长性状关联 | 第42-43页 |
| ·讨论 | 第43-46页 |
| ·中国黄牛与国外海福特牛VEGF 基因遗传变异比较 | 第43-44页 |
| ·三个黄牛品种之间VEGF 基因遗传变异比较 | 第44页 |
| ·三个黄牛品种VEGF 基因遗传变异原因推测 | 第44-45页 |
| ·VEGF 基因遗传变异与南阳牛生长性状关联 | 第45-46页 |
| ·小结 | 第46-48页 |
| 第五章 黄牛VEGF-B 基因遗传变异及其与南阳牛生长性状关联 | 第48-56页 |
| ·材料与方法 | 第48-49页 |
| ·动物来源 | 第48页 |
| ·主要溶液与缓冲液 | 第48页 |
| ·DNA 提取 | 第48页 |
| ·PCR-SSCP 分析 | 第48-49页 |
| ·核苷酸序列分析 | 第49页 |
| ·统计分析 | 第49页 |
| ·结果与分析 | 第49-53页 |
| ·三个黄牛品种VEGF-B 基因PCR-SSCP 多态性 | 第49-50页 |
| ·三个黄牛品种VEGF-B 基因SNPs 检测 | 第50-52页 |
| ·三个黄牛品种VEGF-B 基因变异的群体遗传学特征 | 第52页 |
| ·黄牛VEGF-B 基因遗传变异与南阳牛生长性状关联 | 第52-53页 |
| ·讨论 | 第53-54页 |
| ·小结 | 第54-56页 |
| 第六章 黄牛Flt–1 基因遗传变异及其与南阳牛生长性状关联 | 第56-72页 |
| ·材料与方法 | 第56-59页 |
| ·动物来源 | 第56页 |
| ·DNA 提取 | 第56页 |
| ·PCR 扩增 | 第56-58页 |
| ·SSCP 分析 | 第58页 |
| ·核苷酸序列分析 | 第58页 |
| ·统计分析 | 第58-59页 |
| ·结果与分析 | 第59-70页 |
| ·三个黄牛品种Flt- 1 基因PCR-SSCP 多态性 | 第59-60页 |
| ·黄牛Flt-1 基因SNPs 检测 | 第60-65页 |
| ·三个黄牛品种Flt-1 基因群体遗传学特征 | 第65-70页 |
| ·讨论 | 第70-71页 |
| ·小结 | 第71-72页 |
| 第七章 黄牛VEGF 和VEGF-B 基因mRNA 表达研究 | 第72-83页 |
| ·试验材料 | 第72页 |
| ·试验动物来源 | 第72页 |
| ·主要试剂以及配制 | 第72页 |
| ·主要仪器 | 第72页 |
| ·试验方法 | 第72-74页 |
| ·引物设计与合成 | 第72-73页 |
| ·组织中总RNA 提取 | 第73页 |
| ·RNA 浓度和质量测定 | 第73页 |
| ·反转录反应 | 第73页 |
| ·SYBR green 实时荧光定量PCR | 第73-74页 |
| ·结果与分析 | 第74-80页 |
| ·总RNA 质量 | 第74-75页 |
| ·各组织样本VEGF 和VEGF-B mRNA 相对表达水平 | 第75-80页 |
| ·讨论 | 第80-82页 |
| ·总RNA 的质量评价方法 | 第80页 |
| ·SYBR green 实时荧光定量PCR 技术 | 第80-81页 |
| ·VEGF mRNA 和 VEGF-B mRNA 组织表达 | 第81-82页 |
| ·小结 | 第82-83页 |
| 第八章 黄牛VEGF 基因CDS 区克隆与原核表达研究 | 第83-99页 |
| ·材料与方法 | 第83-84页 |
| ·试验动物来源 | 第83页 |
| ·酶与试剂 | 第83页 |
| ·菌株 | 第83页 |
| ·主要试验仪器 | 第83-84页 |
| ·试验方法 | 第84-90页 |
| ·目的基因的合成 | 第84-86页 |
| ·目的基因的克隆 | 第86-88页 |
| ·重组表达质粒pET-28a-VEGF 构建 | 第88-89页 |
| ·目的蛋白IPTG 诱导表达 | 第89-90页 |
| ·IPTG 诱导表达产物SDS-PAGE 检测 | 第90页 |
| ·结果与分析 | 第90-96页 |
| ·总RNA 质量 | 第90-91页 |
| ·RT-PCR 检测 | 第91页 |
| ·重组质粒菌液PCR 鉴定 | 第91页 |
| ·重组质粒PMD19-T-VEGF 双酶切鉴定 | 第91页 |
| ·重组质粒PMD19-T-VEGF 测序鉴定 | 第91-92页 |
| ·重组质粒pET-28a-VEGF 测序鉴定 | 第92-94页 |
| ·IPTG 诱导目的蛋白表达 | 第94-96页 |
| ·讨论 | 第96-98页 |
| ·影响外源基因在E.coli 中表达效率的因素 | 第96页 |
| ·目的蛋白VEGF 表达条件的优化 | 第96-98页 |
| ·目的蛋白VEGF 表达条件确定 | 第98页 |
| ·小结 | 第98-99页 |
| 结论 | 第99-100页 |
| 创新点 | 第100-101页 |
| 参考文献 | 第101-115页 |
| 附录 | 第115-121页 |
| 附表 | 第121-123页 |
| 致谢 | 第123-124页 |
| 作者简介 | 第124页 |
