中文摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
符号说明 | 第10-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-18页 |
1 仔猪腹泻病对我国养猪业的影响 | 第12-13页 |
2 产肠毒素大肠杆菌的致病机理 | 第13页 |
3 仔猪抵抗E.coli F18的分子选育现状 | 第13-15页 |
4 猪分子抗病育种的一般评估 | 第15-17页 |
5 本研究的目的及意义 | 第17-18页 |
第二章 猪FUT2、FUT1基因mRNA表达水平与仔猪E.coli F18抗性的初步分析 | 第18-42页 |
1 试验材料 | 第18-20页 |
1.1 实验动物 | 第18-19页 |
1.2 主要仪器 | 第19页 |
1.3 主要试剂 | 第19-20页 |
1.4 主要试剂的配制 | 第20页 |
2 试验方法 | 第20-24页 |
2.1 梅山仔猪攻毒前E. coli F18、E. coli F4菌株和常见致仔猪腹泻病毒的检测 | 第20-21页 |
2.2 FUT2、FUT1基因的荧光定量PCR引物设计 | 第21-22页 |
2.3 常规Trizol法提取组织总RNA | 第22页 |
2.4 RNA甲醛变性电泳检测 | 第22-23页 |
2.5 组织总RNA浓度的测定及稀释 | 第23页 |
2.6 反转录 | 第23页 |
2.7 对目的基因和内参基因引物PCR检测 | 第23页 |
2.8 实时荧光定量PCR反应 | 第23-24页 |
2.9 数据处理分析 | 第24页 |
3 结果与分析 | 第24-38页 |
3.1 梅山仔猪攻毒前体内常见致腹泻病原检测结果 | 第24-25页 |
3.2 梅山仔猪攻毒后抗性型和敏感型个体鉴定 | 第25-27页 |
3.3 仔猪组织总RNA纯度与完整性检测 | 第27-28页 |
3.4 实时荧光定量引物常规PCR检测结果 | 第28页 |
3.5 实时荧光定量PCR的扩增曲线和熔解曲线 | 第28-29页 |
3.6 FUT2、FUT1基因在苏太猪E.coli F18抗性型和敏感型个体间表达水平分析 | 第29-31页 |
3.7 FUT2、FUT1基因在苏太猪不同日龄个体间表达水平分析 | 第31-32页 |
3.8 FUT2、FUT1基因在苏太E.coli F18抗性型和敏感型个体表达水平的相关性分析 | 第32-34页 |
3.9 FUT2、FUT1基因在梅山猪E.coli F18抗性型和敏感型个体间表达水平分析 | 第34-36页 |
3.10 FUT2、FUT1基因在不同品种间表达水平分析 | 第36-38页 |
4 讨论 | 第38-42页 |
4.1 FUT2、FUTl基因在苏太猪E.coliF18抗性型和敏感型个体及不同日龄个体间的表达规律分析 | 第38-39页 |
4.2 FUT2、FUT1基因在苏太仔猪抗性型和敏感型个体间表达水平的相关性分析 | 第39-40页 |
4.3 FUT2、FUT1基因在梅山猪E.coli F18抗性型和敏感型个体间表达水平分析 | 第40页 |
4.4 FUT2、FUT1基因在不同品种11个检测组织中表达水平分析 | 第40-42页 |
第三章 猪FUT2基因遗传变异检测及其遗传效应初步分析 | 第42-56页 |
1 实验材料 | 第42-44页 |
1.1 实验动物 | 第42页 |
1.2 主要仪器 | 第42-43页 |
1.3 主要试剂 | 第43-44页 |
2 试验方法 | 第44-47页 |
2.1 猪基因组DNA的提取 | 第44-45页 |
2.2 引物设计 | 第45页 |
2.3 组织RNA提取、反转录、荧光定量引物设计及荧光定量PCR | 第45页 |
2.4 FUT2基因CDs和部分上游序列混合DNA池法PCR扩增(第1次PCR)及产物测序 | 第45页 |
2.5 FUT2基因部分上游序列PCR扩增(第2次PCR)、SSCP检测及产物测序 | 第45-46页 |
2.6 细胞因子的测定 | 第46-47页 |
2.7 部分生产性状及繁殖性能的测定 | 第47页 |
2.8 数据处理分析 | 第47页 |
3 实验结果与分析 | 第47-53页 |
3.1 第1次PCR扩增、测序及Blast结果 | 第47-49页 |
3.2 第2次PCR扩增检测及PCR-SSCP分析结果 | 第49-50页 |
3.3 等位基因及基因型频率分布分析 | 第50-51页 |
3.4 不同基因型个体间FUT2基因mRNA表达水平差异分析 | 第51-52页 |
3.5 不同基因型个体部分重要细胞免疫因子水平差异分析 | 第52页 |
3.6 不同基因型个体部分重要经济性状差异分析 | 第52-53页 |
4 讨论 | 第53-56页 |
4.1 猪FUT2基因遗传变异检测及多态分布 | 第53-54页 |
4.2 FUT2基因变异位点的遗传效应分析 | 第54-56页 |
全文结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第67-68页 |
参与申请国家发明专利 | 第68-69页 |