| 中文摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 缩略词表 | 第8-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-19页 |
| 1.1 非酒精性脂肪肝与鹅肥肝 | 第13页 |
| 1.2 非酒精性脂肪肝与鹅肥肝形成机理 | 第13-15页 |
| 1.2.1 非酒精性脂肪肝形成机理 | 第13-14页 |
| 1.2.2 鹅肥肝形成机理 | 第14-15页 |
| 1.3 线粒体功能障碍与鹅肥肝 | 第15-16页 |
| 1.3.1 线粒体结构与功能 | 第15-16页 |
| 1.3.2 线粒体功能障碍 | 第16页 |
| 1.4 线粒体外膜蛋白己糖激酶(HK)基因及其功能 | 第16-18页 |
| 1.4.1 己糖激酶(HK)的结构与组成 | 第16-17页 |
| 1.4.2 己糖激酶(HK)的生物学功能 | 第17-18页 |
| 1.5 本研究目的、意义及主要研究内容 | 第18-19页 |
| 2 材料方法 | 第19-38页 |
| 2.1 试验材料 | 第19-25页 |
| 2.1.1 试验动物及饲养管理 | 第19页 |
| 2.1.2 朗德鹅胚胎孵化 | 第19页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第19-20页 |
| 2.1.4 常用的试验试剂及试剂盒 | 第20-22页 |
| 2.1.5 主要相关试剂的配制 | 第22-24页 |
| 2.1.6 试验所需引物设计 | 第24-25页 |
| 2.2 试验方法及步骤 | 第25-38页 |
| 2.2.1 总RNA提取前的准备 | 第25页 |
| 2.2.2 总RNA的提取 | 第25-26页 |
| 2.2.3 总RNA反转录为cDNA | 第26-27页 |
| 2.2.4 实时荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第27-28页 |
| 2.2.5 HK1基因上游转录因子软件预测 | 第28页 |
| 2.2.6 鹅原代肝细胞的分离与培养 | 第28-29页 |
| 2.2.7 葡萄糖、胰岛素、脂肪酸、链脲佐菌素、维甲酸处理鹅原代肝细胞 | 第29-30页 |
| 2.2.8 细胞RNA提取、反转录以及荧光定量检测 | 第30-31页 |
| 2.2.9 过表达HK1基因 | 第31页 |
| 2.2.10 提取HK1基因过表达载体质粒 | 第31-32页 |
| 2.2.11 转染HK1基因过表达载体 | 第32-33页 |
| 2.2.12 细胞RNA提取 | 第33页 |
| 2.2.13 RNA反转录及荧光定量检测 | 第33页 |
| 2.2.14 小干扰siRNA的设计与合成 | 第33-34页 |
| 2.2.15 siRNA转染鹅原代肝细胞 | 第34页 |
| 2.2.16 RNA的提取 | 第34页 |
| 2.2.17 RNA反转录及荧光定量检测 | 第34页 |
| 2.2.18 油红O细胞染色 | 第34-35页 |
| 2.2.19 蛋白样品制备 | 第35页 |
| 2.2.20 蛋白浓度检测 | 第35-36页 |
| 2.2.21 活性氧检测 | 第36-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-63页 |
| 3.1 HK1基因在鹅肥肝形成过程中的时空表达规律 | 第38-39页 |
| 3.1.1 HK1基因在朗德鹅填饲不同阶段肝脏中的表达规律 | 第38页 |
| 3.1.2 HK1基因在朗德鹅填饲不同阶段胸肌、腹脂中的表达规律 | 第38-39页 |
| 3.2 脂肪肝形成相关因子对HK1基因的调控研究 | 第39-42页 |
| 3.2.1 葡萄糖对HK1基因的调控研究 | 第39-40页 |
| 3.2.2 胰岛素对HK1基因的调控研究 | 第40页 |
| 3.2.3 油酸对HK1基因的调控研究 | 第40-41页 |
| 3.2.4 亚油酸对HK1基因的调控研究 | 第41-42页 |
| 3.2.5 棕榈酸对HK1基因的调控研究 | 第42页 |
| 3.3 HK1基因的转录调控研究 | 第42-46页 |
| 3.3.1 HK1基因转录因子预测 | 第42-44页 |
| 3.3.2 Pax-4对HK1基因的调控 | 第44页 |
| 3.3.3 HNF-1对HK1基因的调控 | 第44-46页 |
| 3.4 HK1基因的生物学功能研究 | 第46-51页 |
| 3.4.1 HK1基因过表达对鹅细胞脂肪沉积的影响 | 第46-47页 |
| 3.4.2 siRNA敲低HK1基因表达对鹅肝细胞中脂肪沉积的影响 | 第47-49页 |
| 3.4.3 过表达HK1基因对氧化应激水平的影响 | 第49-51页 |
| 3.4.4 敲低HK1基因对氧化应激水平的影响 | 第51页 |
| 3.5 HK1基因下游相关信号通路分析 | 第51-63页 |
| 3.5.1 样品总RNA质量评估 | 第52页 |
| 3.5.2 测序错误率分布检查 | 第52-55页 |
| 3.5.3 参考序列比对分析 | 第55-57页 |
| 3.5.4 差异表达基因分析 | 第57-59页 |
| 3.5.5 差异基因GO富集分析 | 第59-60页 |
| 3.5.6 差异基因KEGG富集分析 | 第60-62页 |
| 3.5.7 qRT-PCR验证 | 第62-63页 |
| 4 讨论 | 第63-67页 |
| 4.1 HK1基因在鹅肥肝形成过程中的表达规律 | 第63-64页 |
| 4.2 脂肪肝形成相关因子和转录因子对HK1基因表达的调控 | 第64-65页 |
| 4.3 HK1基因的生物学功能 | 第65-67页 |
| 5 全文结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-76页 |
| 附录 | 第76-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文目录 | 第81-82页 |
