| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 符号说明 | 第9-10页 |
| 文献综述 | 第10-19页 |
| 1 猪传染性胃肠炎病毒的病原学特征 | 第10-12页 |
| 1.1 猪传染性胃肠炎病毒的形态结构和理化性质 | 第10-11页 |
| 1.2 猪传染性胃肠炎病毒细胞培养特性 | 第11页 |
| 1.3 猪传染性胃肠炎病毒的抗原性和变异性 | 第11-12页 |
| 2 猪传染性胃肠炎病毒分子生物学特性 | 第12-14页 |
| 2.1 基因组结构特性 | 第12页 |
| 2.2 TGEV蛋白的结构及其功能 | 第12-14页 |
| 3 猪传染胃肠炎病毒的流行病学 | 第14页 |
| 3.1 传染源、传播途经和易感动物 | 第14页 |
| 3.2 流行特点 | 第14页 |
| 4 猪传染性胃肠炎病毒检测方法的研究进展 | 第14-17页 |
| 4.1 猪传染性胃肠炎病毒病原学检测方法 | 第14-15页 |
| 4.2 猪传染性胃肠炎病毒免疫学检测方法 | 第15-16页 |
| 4.3 猪传染性胃肠炎病毒分子生物学检测方法 | 第16-17页 |
| 5 预防与治疗 | 第17页 |
| 5.1 预防为主,加强管理 | 第17页 |
| 5.2 药物治疗及相关应急措施 | 第17页 |
| 6 研究目的及意义 | 第17-19页 |
| 研究内容一 猪传染性胃肠炎病毒TZ-10-2016的全基因序列分析 | 第19-38页 |
| 1 实验材料 | 第19-20页 |
| 1.1 主要试剂和生物材料 | 第19页 |
| 1.2 主要仪器 | 第19-20页 |
| 2 方法 | 第20-26页 |
| 2.1 病毒的分离与增殖 | 第20-24页 |
| 2.2 病毒全基因组测序 | 第24-25页 |
| 2.3 病毒全基因测序结果分析 | 第25-26页 |
| 3 结果 | 第26-36页 |
| 3.1 目的片段特异性鉴定 | 第26页 |
| 3.2 目的片段扩增 | 第26页 |
| 3.3 病毒感染ST细胞及小肠上皮细胞 | 第26-27页 |
| 3.4 全基因组扩增结果 | 第27-28页 |
| 3.5 TGEV-TZ-10-2016的遗传进化分析 | 第28-33页 |
| 3.6 TGEV-TZ-10-2016结构蛋白的生物信息学分析 | 第33-35页 |
| 3.7 ORF预测 | 第35-36页 |
| 4 讨论 | 第36-38页 |
| 研究内容二 猪传染性胃肠炎病毒Sa蛋白的原核表达及间接ELISA方法的建立 | 第38-51页 |
| 1 实验材料 | 第38页 |
| 1.1 主要试剂和生物材料 | 第38页 |
| 1.2 主要仪器 | 第38页 |
| 2. 猪传染性胃肠炎病毒Sa蛋白的原核表达 | 第38-42页 |
| 2.1 引物设计和目的片段的扩增 | 第38-39页 |
| 2.2 目的片段的克隆 | 第39页 |
| 2.3 TGEV-Sa原核表达载体的构建 | 第39-41页 |
| 2.4 TGEV抗鼠多抗血清的制备 | 第41-42页 |
| 2.5 间接免疫荧光常规方法 | 第42页 |
| 3 检测TGEV抗体间接ELISA方法的初步建立 | 第42-43页 |
| 3.1 间接ELISA方法常规步骤 | 第42页 |
| 3.2 间接ELISA方法反应条件的优化 | 第42-43页 |
| 4 结果 | 第43-49页 |
| 4.1 pCold-TF-Sa原核表达载体构建 | 第43-44页 |
| 4.2 His-Sa重组蛋白的诱导表达 | 第44页 |
| 4.3 His-Sa重组蛋白的Western-blot鉴定 | 第44页 |
| 4.4 His-Sa重组蛋白的纯化 | 第44-45页 |
| 4.5 抗原最佳包被浓度和血清最佳稀释度的优化 | 第45-46页 |
| 4.6 待检血清最佳孵育时间的优化 | 第46页 |
| 4.7 酶标二抗最佳孵育时间的优化 | 第46页 |
| 4.8 底物最佳显色时间的优化 | 第46-47页 |
| 4.9 间接ELISA方法阳性临界值的确定 | 第47页 |
| 4.10 间接ELISA方法交叉反应性检验 | 第47页 |
| 4.11 间接ELISA方法的批内和批间重复性检验 | 第47-49页 |
| 4.12 间接ELISA方法结果验证 | 第49页 |
| 5 讨论 | 第49-51页 |
| 全文总结 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-64页 |
| 附录 | 第64-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第67-68页 |
